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转betA和TsVP基因提高棉花耐盐、抗旱性的研究

中文摘要第1-14页
Abstract第14-21页
符号说明第21-22页
第一章 前言第22-52页
   ·植物抗旱、耐盐分子机制第23-33页
     ·渗透保护物质(相容性溶质)的合成第25-28页
     ·水分与离子吸收、转运及离子渗透平衡调节第28-31页
       ·Na~+内流和K~+/Na~+平衡第28-29页
       ·Na~+的外排和细胞区隔化第29-30页
       ·Ca~(2+)渗透平衡调节第30页
       ·盐胁迫条件下的Cl~-离子渗透平衡调节第30-31页
       ·植物水通道蛋白第31页
     ·细胞抗氧化及活性氧清除第31-32页
     ·胚胎晚期丰富蛋白(LEA)和热休克蛋白(HSPs)第32-33页
   ·甜菜碱合成的基因工程研究第33-42页
     ·甜菜碱的生物合成途径第33-35页
     ·甜菜碱生物合成的基因工程研究第35-40页
       ·植物胆碱单加氧酶(CMO)/甜菜碱醛脱氢酶(BADH)途径的基因工程第36-37页
       ·E.coli胆碱脱氢酶(CDH)/甜菜碱醛脱氢酶(BADH)途径的基因工程第37-38页
       ·细菌胆碱氧化酶(COD)基因转基因研究第38-39页
       ·以甘氨酸为底物的甜菜碱合成途径的基因工程研究第39-40页
     ·甜菜碱的作用机制研究第40-42页
       ·渗透调节作用第40-41页
       ·稳定和保护生物大分子的结构和功能第41-42页
       ·膜完整性第42页
   ·H~+-PPase研究进展第42-47页
     ·液泡膜H~+-PPase的分子结构与功能第43-45页
       ·H~+-PPase的分子结构第43-44页
       ·H~+-PPase的主要功能第44-45页
     ·液泡膜H~+-PPase与植物耐盐、抗旱性第45-47页
       ·盐胁迫对植物液泡膜H~+-PPase活性的影响第45-46页
       ·转H~+-PPase基因的研究第46-47页
   ·棉花抗旱耐盐性研究和抗旱耐盐育种第47-51页
     ·棉花抗旱耐盐性研究第47-49页
     ·棉花抗旱(盐)育种现状第49-51页
   ·本研究的目的和意义第51-52页
第二章 转胆碱脱氢酶基因betA棉花的抗旱性分析第52-74页
   ·材料与方法第52-59页
     ·材料第52页
     ·转基因株系的遗传学分析第52-53页
     ·转基因棉花T2代植株的分子检测第53-56页
       ·PCR检测第53页
       ·Southern杂交检测第53-54页
       ·Northern杂交分析第54-56页
     ·干旱胁迫处理第56页
       ·苗期渗透胁迫处理第56页
       ·蕾期和开花期干旱胁迫处理第56页
     ·甜菜碱含量测定第56-57页
     ·叶片相对含水量测定第57页
     ·叶片光合速率测定第57页
     ·叶绿素含量测定第57页
     ·细胞溶质势测定和渗透调节计算第57-58页
     ·叶片可溶性糖和游离氨基酸总量测定第58页
     ·叶片细胞膜离子渗漏和丙二醛含量测定第58页
     ·超氧化物岐化酶活性测定第58-59页
   ·结果与分析第59-70页
     ·遗传分析第59页
     ·T2代转基因植株的分子检测第59-60页
     ·转基因株系苗期的抗渗透胁迫能力第60-63页
       ·渗透胁迫后棉花的形态变化和叶片相对含水量第60-61页
       ·渗透胁迫对光合作用的影响第61-62页
       ·渗透胁迫对棉花幼苗溶质势的影响第62-63页
     ·棉花蕾期抗旱性分析第63-69页
       ·干旱胁迫前后叶片甜菜碱含量变化第63-64页
       ·干旱胁迫后棉花生长情况及相对含水量变化第64-65页
       ·叶绿素含量第65-66页
       ·干旱胁迫对可溶性糖、游离氨基酸含量的影响及渗透调节第66-67页
       ·干旱胁迫对细胞膜离子渗漏和丙二醛水平的影响第67-68页
       ·超氧化物岐化酶活性第68-69页
     ·开花期干旱胁迫对棉花生长发育的影响第69-70页
   ·讨论第70-74页
第三章 转H~+-PPase基因TsVP棉花的获得及转基因植株的抗逆性分析第74-117页
   ·材料与方法第74-81页
     ·农杆菌介导的棉花遗传转化第74-76页
       ·棉花品种第74页
       ·植物表达载体构建第74-75页
       ·重组质粒转入农杆菌第75页
       ·培养基第75页
       ·棉花遗传转化第75-76页
       ·转化植株的筛选与PCR检测第76页
     ·转基因棉花后代的耐盐性分析第76-79页
       ·棉花材料第76页
       ·转基因棉花T2代植株的Southern和Northern杂交检测第76页
       ·叶盘法检测转基因棉花耐盐性第76-77页
       ·棉花植株培养与苗期盐胁迫处理第77页
       ·盐胁迫条件下棉花根系观察及生物量统计第77页
       ·棉花液泡膜的分离及液泡膜ATPase和H~+-PPase活性测定第77-79页
       ·棉花叶片叶绿素含量测定第79页
       ·光合作用和叶绿素荧光参数测定第79页
       ·叶片细胞膜离子渗漏和丙二醛含量测定第79页
       ·Na~+、K~+、Ca~(2+)和Cl~-离子含量测定第79页
       ·叶片可溶性糖含量和溶质势测定第79页
     ·转基因棉花后代抗旱性分析第79-81页
       ·棉花液泡膜分离和酶活性测定第79-80页
       ·干旱胁迫下棉花表型观察及生物量统计第80页
       ·干旱胁迫处理和生理指标的测定第80-81页
   ·结果与分析第81-111页
     ·转TsVP基因棉花的获得第81-82页
     ·转基因植株T2代Southern和Northern杂交检测第82-83页
     ·转基因棉花T2代耐盐性分析第83-97页
       ·液泡膜ATPase和H~+-PPase酶活性第83-84页
       ·盐胁迫对转基因棉花叶盘叶绿素含量的影响第84-85页
       ·盐处理条件下棉花幼苗形态及生物量变化第85-89页
       ·长时间盐处理下棉花叶片叶绿素含量的变化第89-90页
       ·盐处理对光合作用和叶绿素荧光参数的影响第90-92页
       ·盐处理对细胞膜离子渗漏和丙二醛含量的影响第92-93页
       ·棉花叶片和根的Na~+、K~+、Ca~(2+)和Cl~-离子含量第93-95页
       ·叶片可溶性糖含量和细胞溶质势第95-97页
     ·转基因棉花T2代抗旱性分析第97-111页
       ·干旱胁迫下液泡膜ATPase和H~+-PPase酶活性变化第97-98页
       ·干旱胁迫下棉花根系和地上部形态及生物量第98-99页
       ·转基因植株苗期抗渗透胁迫的能力第99-102页
       ·转TsVP基因棉花蕾期植株的抗旱性分析第102-107页
       ·开花期干旱胁迫对棉花光合作用和生长发育的影响第107-111页
   ·讨论第111-117页
     ·TsVP基因在棉花中的过表达促进了转基因植株地上部和根系的生长第112页
     ·转基因棉花的耐盐性第112-114页
     ·转基因棉花的耐旱性第114-116页
     ·TsVP反义基因的表达对棉花内源H~+-PPase活性的抑制效果第116-117页
第四章 总结与展望第117-119页
参考文献第119-134页
致谢第134-135页
攻读博士学位期间发表的学术论文目录第135-136页
学位论文评阅及答辩情况表第136-182页

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