| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 一 前言 | 第8-14页 |
| 二 材料与方法 | 第14-31页 |
| （一） 材料 | 第14-17页 |
| 1、主要酶、荧光染料和化学试剂 | 第14页 |
| 2、样品标本 | 第14页 |
| 3、引物与探针合成 | 第14页 |
| 4、常用溶液、培养基配置（均以双蒸水配置） | 第14-16页 |
| 5、主要仪器 | 第16-17页 |
| （二） 实验方法 | 第17-31页 |
| 1． 孪生引物实时PCR方法的建立 | 第17-20页 |
| 2． 孪生引物实时PCR基因分型技术 | 第20-26页 |
| 3． 孪生引物实时PCR检测端粒酶活性 | 第26-27页 |
| 4． 荧光-淬灭双链探针检测DNase Ⅰ活性 | 第27-28页 |
| 5． 分子信标作用机理的研究 | 第28-31页 |
| 三 结果与讨论 | 第31-63页 |
| 1． 孪生引物实时荧光PCR检测技术的研究 | 第31-42页 |
| 1．1 孪生引物实时PCR检测技术的原理 | 第31-34页 |
| 1．2 孪生引物实时PCR方法的建立 | 第34-42页 |
| 1．2．1 孪生引物的杂交及其变温反应 | 第35-36页 |
| 1．2．2 标记型孪生引物的实时PCR检测 | 第36-37页 |
| 1．2．3 负引物的长度对孪生引物PCR扩增效率的影响 | 第37-39页 |
| 1．2．4 非标记型的孪生引物实时PCR检测 | 第39-42页 |
| 2． 孪生引物实时PCR基因分型技术 | 第42-54页 |
| 引言 | 第42-43页 |
| 2．1 突变型模板的合成和克隆 | 第43-46页 |
| 2．2 孪生引物实时PCR基因分型 | 第46-52页 |
| 2．3 孪生引物PCR产物的同步荧光扫描基因分型 | 第52-54页 |
| 3． 孪生引物实时PCR检测端粒酶活性 | 第54-58页 |
| 3．1 孪生引物实时PCR检测人胃癌细胞中端粒酶活性 | 第56-58页 |
| 4． 用荧光淬灭标记双链探针检测DNase Ⅰ的酶切活性 | 第58-63页 |
| 4．1 荧光淬灭双链探针法对DNase Ⅰ内切酶的活性检测 | 第60-63页 |
| 四 小结 | 第63页 |
| 五 展望 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录部分 利用毛细管电泳技术研究分子信标在实时荧光PCR检测技术中的作用机制 | 第71-78页 |
| 引言 | 第71-73页 |
| 1．利用双激光荧光毛细管电泳对实时PCR产物的分析 | 第73-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 待发表论文 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
