| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
| 1 引言 | 第10页 |
| 2 移动蛋白研究进展 | 第10-22页 |
| 2.1 MPs的基本特性 | 第10-16页 |
| 2.1.1 MPs的编码策略 | 第11页 |
| 2.1.2 MPs之间的功能互补 | 第11-13页 |
| 2.1.3 MPs与细胞骨架的互作 | 第13-15页 |
| 2.1.4 胞间移动模型 | 第15-16页 |
| 2.2 MPs与病毒侵染能力 | 第16-19页 |
| 2.2.1 MPs与系统侵染 | 第16-17页 |
| 2.2.2 MPs与局部侵染 | 第17-19页 |
| 2.3 与MPs互作的寄主因子 | 第19-20页 |
| 2.3.1 DnaJ同源物 | 第19页 |
| 2.3.2 几丁质甲基化酶 | 第19-20页 |
| 2.4 胞间移动的调控 | 第20-22页 |
| 2.4.1 MPs的磷酸化 | 第20-21页 |
| 2.4.2 胞间连丝 | 第21-22页 |
| 3 内源大分子转运机制 | 第22-26页 |
| 3.1 胞间连丝 | 第22-23页 |
| 3.2 伴胞和筛管 | 第23页 |
| 3.3 MPs与光合产物运输 | 第23-24页 |
| 3.4 内源大分子转运 | 第24-26页 |
| 第二部分 研究内容 | 第26-70页 |
| 引言 | 第26-28页 |
| 第一章 材料与方法 | 第28-40页 |
| 1.1 材料 | 第28-29页 |
| 1.1.1 毒源 | 第28页 |
| 1.1.2 抗血清 | 第28页 |
| 1.1.3 供试鉴别寄主 | 第28页 |
| 1.1.4 菌种、质粒 | 第28页 |
| 1.1.5 常用缓冲液的配制 | 第28-29页 |
| 1.1.6 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第29页 |
| 1.2 方法 | 第29-40页 |
| 1.2.1 病毒提纯 | 第29-30页 |
| 1.2.1.1 病毒粗提纯 | 第29页 |
| 1.2.1.2 利用蔗糖连续密度梯度进一步提纯病毒 | 第29-30页 |
| 1.2.1.3 提纯病毒紫外检测 | 第30页 |
| 1.2.2 病毒基因组RNA抽提 | 第30-31页 |
| 1.2.2.1 病毒核酸提取 | 第30页 |
| 1.2.2.2 甲醛变性电泳检测 | 第30-31页 |
| 1.2.3 RT-PCR技术 | 第31-33页 |
| 1.2.3.1 cDNA第一链合成 | 第31页 |
| 1.2.3.2 普通PCR反应 | 第31-32页 |
| 1.2.3.3 长片段模板PCR | 第32页 |
| 1.2.3.4 PCR产物加A处理 | 第32-33页 |
| 1.2.3.5 PCR产物纯化 | 第33页 |
| 1.2.4 DNA克隆技术 | 第33-36页 |
| 1.2.4.1 连接方法 | 第33页 |
| 1.2.4.2 感受态细胞制备方法 | 第33-34页 |
| 1.2.4.3 转化 | 第34页 |
| 1.2.4.4 重组克隆的筛选与鉴定 | 第34-35页 |
| 1.2.4.5 重组质粒的提取和纯化 | 第35-36页 |
| 1.2.5 序列测定及分析 | 第36-37页 |
| 1.2.6 植物叶片中病毒蛋白的Western Blot的检测 | 第37-38页 |
| 1.2.6.1 植物可溶性蛋白样品的制备 | 第37页 |
| 1.2.6.2 免疫印迹杂交 | 第37-38页 |
| 1.2.7 体外转录方法 | 第38页 |
| 1.2.8 TAS-ELISA法定量检测ToMV/TMV | 第38-39页 |
| 1.2.9 水杨酸测定 | 第39-40页 |
| 第二章 侵染性MP置换克隆的构建 | 第40-53页 |
| 1 材料与方法 | 第40-44页 |
| 1.1 材料 | 第40页 |
| 1.2 方法 | 第40-44页 |
| 1.2.1 引物 | 第40-41页 |
| 1.2.2 TMV-B与ToMV-S1的基因组结构示意图 | 第41页 |
| 1.2.3 方法 | 第41-44页 |
| 2 结果 | 第44-50页 |
| 2.1 ToMV-S1 MP克隆的获得 | 第44页 |
| 2.2 TMV-B与ToMV-S1 MP基因置换 | 第44-46页 |
| 2.3 置换克隆的鉴定 | 第46-47页 |
| 2.4 置换克隆的侵染性试验 | 第47-48页 |
| 2.5 后代病毒鉴定 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 T/OMP与TMV、ToMV侵染性差异分析 | 第53-70页 |
| 1 材料和方法 | 第53-54页 |
| 1.1 材料 | 第53页 |
| 1.1.1 毒源来源及保存 | 第53页 |
| 1.1.2 抗血清 | 第53页 |
| 1.1.3 其它 | 第53页 |
| 1.2 方法 | 第53-54页 |
| 1.2.1 寄主范围测定 | 第53页 |
| 1.2.2 枯斑大小测定 | 第53页 |
| 1.2.3 病毒系统侵染能力测定 | 第53-54页 |
| 1.2.4 SA测定 | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-57页 |
| 2.1 T/OMP与TMV的寄主范围基本一致 | 第54页 |
| 2.2 T/OMP与TMV、ToMV诱发N基因介导的HR反应产生的枯斑大小差异 | 第54-56页 |
| 2.2.1 T/OMP与TMV的差异 | 第54-55页 |
| 2.2.2 T/OMP与ToMV的差异 | 第55-56页 |
| 2.3 T/OMP与TMV诱发HR反应产生的SA水平差异 | 第56-57页 |
| 2.4 T/OMP、TMV和ToMV系统侵染能力比较 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-70页 |
| 3.1 MP基因不是ToMV不能系统侵染普通烟的病毒决定因子 | 第57-59页 |
| 3.2 MP基因影响N基因介导的HR反应产生的枯斑直径 | 第59-64页 |
| 3.2.1 MP基因与N抗性基因的关系 | 第59-60页 |
| 3.2.2 MP基因影响枯斑大小 | 第60-61页 |
| 3.2.3 MP基因的表达量与枯斑生成关系 | 第61-62页 |
| 3.2.4 MP基因功能的差异 | 第62-64页 |
| 3.3 MP基因在病毒系统侵染中的作用 | 第64-70页 |
| 小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附录A: 常用试剂的配制 | 第77-81页 |
| 附录B: 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第81-82页 |