| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 阿维菌素的研究进展 | 第11-14页 |
| 1. 阿维菌素研究概述 | 第11-13页 |
| 2. 阿维菌素理化特性 | 第13页 |
| 3. 阿维菌素类药物的药理作用 | 第13页 |
| 4. 阿维菌素毒理学 | 第13页 |
| 5. 阿维菌素的临床应用 | 第13-14页 |
| 第二章 阿维菌素生物合成与调控 | 第14-19页 |
| 1. 阿维菌素生物合成研究进展 | 第14-16页 |
| ·糖苷配基和双糖的合成 | 第14-15页 |
| ·阿维菌素的甲基化修饰 | 第15页 |
| ·阿维菌素氧原子的来源 | 第15页 |
| ·阿维菌素合成途径 | 第15-16页 |
| 2. 阿维菌素生物合成基因结构研究进展 | 第16-19页 |
| ·阿维菌素生物合成基因结构组成 | 第16-17页 |
| ·阿维菌素生物合成关键基因 | 第17-19页 |
| ·聚酮合成酶基因 aveA | 第17页 |
| ·糖基化酶基因 aveB | 第17页 |
| ·C22 - C23 脱水酶基因 aveC | 第17页 |
| ·C5-0-甲基转移酶 aveD | 第17-18页 |
| ·正调节基因 aveR | 第18页 |
| ·关键基因 orfX | 第18页 |
| ·负调节基因 aveR1、aveR2 | 第18页 |
| ·afsR2 基因 | 第18-19页 |
| ·nsdA 基因 | 第19页 |
| ·I 基因 | 第19页 |
| 第三章 阿维链霉菌诱变育种进展 | 第19-24页 |
| 1. 工业微生物育种技术进展 | 第19-22页 |
| ·自然选育 | 第19-20页 |
| ·诱变育种 | 第20-21页 |
| ·物理因子诱变 | 第20页 |
| ·化学因子诱变 | 第20页 |
| ·生物因子诱变 | 第20页 |
| ·复合因子诱变与新型诱变剂 | 第20-21页 |
| ·基因重组 | 第21页 |
| ·杂交育种 | 第21页 |
| ·原生质体融合育种 | 第21页 |
| ·代谢控制育种 | 第21页 |
| ·基因工程育种 | 第21-22页 |
| 2. 阿维链霉菌育种进展 | 第22页 |
| 3. 重离子束在微生物选育中的研究进展 | 第22-24页 |
| ·重离子束在生物方面的应用 | 第22-23页 |
| ·重离子束在辐照育种中的优势 | 第23-24页 |
| 第四章 本论文研究意义 | 第24-27页 |
| 第二部分 实验内容 | 第27-72页 |
| 第一章 阿维链霉菌的重离子辐照诱变 | 第27-29页 |
| 1 材料与方法 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·原始菌株的复苏 | 第27页 |
| ·辐照样品的准备 | 第27页 |
| ·碳离子~(12)C~(+6)对菌株的辐照诱变 | 第27-28页 |
| ·辐照后样品处理 | 第28页 |
| 2. 辐照实验讨论 | 第28-29页 |
| 第二章 阿维链霉菌高产菌株筛选与培养基优化 | 第29-46页 |
| 1. 实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第29页 |
| ·常用试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-33页 |
| ·平板筛选 | 第30-31页 |
| ·实验室发酵培养与效价测试（筛选） | 第31页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第31-32页 |
| ·高效价菌株的遗传稳定性试验 | 第32页 |
| ·5L发酵中试实验 | 第32-33页 |
| 3. 实验结果 | 第33-45页 |
| ·最佳辐照剂量的确定 | 第33-34页 |
| ·诱变后的菌落形态构成与产抗的能力的关系 | 第34页 |
| ·摇瓶效价分析 | 第34-36页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第36-43页 |
| ·筛选配方与最佳合成配方的比较 | 第43页 |
| ·高效价菌株的遗传稳定性试验 | 第43页 |
| ·发酵中试实验 | 第43-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 阿维链霉菌突变基因的差异性研究 | 第46-60页 |
| 实验一 不同碳离子剂量对正突变株的基因差异性研究 | 第46-51页 |
| 1 实验材料 | 第47页 |
| ·实验菌株 | 第47页 |
| ·仪器设备 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| 2．实验方法 | 第47-48页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第47-48页 |
| ·PCR 扩增反应条件 | 第48页 |
| ·数据统计与处理: | 第48页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第48-51页 |
| ·基因组 DNA 的质量 | 第48页 |
| ·RAPD 扩增结果 | 第48-51页 |
| ·随即引物的选择 | 第48-49页 |
| ·4条随即引物扩增结果 | 第49-51页 |
| 4. 讨论 | 第51页 |
| 实验二 碳离子束诱变高产菌株与原始菌株基因差异性研究 | 第51-53页 |
| 1. 实验材料 | 第51-52页 |
| ·实验菌株 | 第51页 |
| ·仪器设备 | 第51-52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| 2. 实验方法 | 第52页 |
| ·PCR 扩增反应条件 | 第52页 |
| ·数据统计与处理: | 第52页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第52-53页 |
| 4. 讨论 | 第53页 |
| 实验三 诱变选育的高产菌株的生物合成关键基因差异性研究 | 第53-60页 |
| 1. 实验材料 | 第54页 |
| ·实验菌株 | 第54页 |
| ·仪器设备 | 第54页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| 2. 实验方法 | 第54-56页 |
| ·引物的设计 | 第54页 |
| ·扩增条件 | 第54-56页 |
| ·产物测序 | 第56页 |
| 3 实验结果结果 | 第56-58页 |
| ·C、D、I、R 基因扩增电泳图 | 第56页 |
| ·D基因扩增 Pcr 扩增电泳结果 | 第56-57页 |
| ·I基因扩增 | 第57页 |
| ·R基因扩增 | 第57页 |
| ·测序结果 | 第57-58页 |
| 4. 讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 诱变选育的高产菌株可溶性蛋白差异性研究 | 第60-70页 |
| 1. 实验材料 | 第61-62页 |
| ·仪器 | 第61页 |
| ·试剂 | 第61-62页 |
| 2 实验方法 | 第62-63页 |
| ·菌丝体可溶性蛋白提取 | 第62页 |
| ·蛋白质浓度依据(Bradford, 1976)方法即：考马斯亮蓝结合法 | 第62页 |
| ·电泳 | 第62-63页 |
| ·第一向固相 pH 梯度等电聚焦(IEF) | 第62-63页 |
| ·平衡 | 第63页 |
| ·第二向垂直平板电泳(SDS-PAGE) | 第63页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第63页 |
| ·扫描与分析 | 第63页 |
| 3. 结果与分析 | 第63-70页 |
| ·提取与电泳条件的选择 | 第63-66页 |
| ·提取时吸取蛋白层的确定 | 第63-64页 |
| ·蛋白裂解液的选择 | 第64-65页 |
| ·一向条件的选择 | 第65页 |
| ·胶条的选择 | 第65-66页 |
| ·高效价菌株 147、HS 与原始菌株 AO 的双向电泳图谱 | 第66-70页 |
| 4. 讨论 | 第70页 |
| 第五章 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 附录 | 第80-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 作者简介 | 第101-103页 |
| 导师简介 | 第103-105页 |
