| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 1 绪论 | 第12-30页 |
| ·植物芽休眠调控机理的研究进展 | 第12-20页 |
| ·芽休眠概述 | 第12-13页 |
| ·芽休眠的定义 | 第12页 |
| ·芽休眠的分类 | 第12-13页 |
| ·芽休眠的生物学意义 | 第13页 |
| ·芽休眠调控机理的研究进展 | 第13-19页 |
| ·类休眠调控机理的研究进展 | 第13-16页 |
| ·内休眠调控机理的研究进展 | 第16-19页 |
| ·生态休眠调控机理的研究进展 | 第19页 |
| ·亟待解决的问题 | 第19-20页 |
| ·牡丹芽内休眠调控的研究进展 | 第20-21页 |
| ·牡丹芽的内休眠特性 | 第20页 |
| ·牡丹芽内休眠的调控 | 第20-21页 |
| ·低温在牡丹芽内休眠解除过程中起到质的作用 | 第21页 |
| ·外源激素对牡丹内休眠的解除具有辅助作用 | 第21页 |
| ·差异表达基因的筛选方法 | 第21-27页 |
| ·几种筛选差异表达基因的技术原理 | 第22-23页 |
| ·差异显示PCR | 第22页 |
| ·代表性差异显示分析技术 | 第22页 |
| ·基因表达系列分析技术 | 第22页 |
| ·抑制性差减杂交 | 第22-23页 |
| ·DNA 微阵列 | 第23页 |
| ·几种基因差异表达分析技术的优缺点比较 | 第23页 |
| ·本研究采用的抑制性差减杂交（SSH） | 第23-27页 |
| ·抑制性差减杂交的技术流程 | 第23-24页 |
| ·抑制性差减杂交技术在分离植物差异表达基因中的应用 | 第24-27页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| ·研究目的 | 第27页 |
| ·研究意义 | 第27-29页 |
| ·本项研究的技术路线 | 第29-30页 |
| 2 牡丹花芽内休眠解除相关基因的分离 | 第30-52页 |
| ·材料与方法 | 第30-43页 |
| ·试验材料 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·质粒及菌种 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-43页 |
| ·牡丹花芽内休眠解除过程中的形态解剖结构观察 | 第31页 |
| ·牡丹花芽总RNA 的提取及检测 | 第31-32页 |
| ·总RNA 中基因组DNA 的酶解 | 第32-33页 |
| ·mRNA 的纯化 | 第33页 |
| ·mRNA 的浓缩 | 第33页 |
| ·抑制性差减杂交（SSH） | 第33-40页 |
| ·应用T/A 克隆法构建正向差减文库 | 第40-41页 |
| ·差示筛选差减cDNA 文库 | 第41-43页 |
| ·DNA 测序与序列分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-49页 |
| ·牡丹花芽内休眠进程中形态解剖结构变化及内休眠时期的确定 | 第43-44页 |
| ·CTAB 法提取的总RNA 完整性和纯度检测 | 第44-46页 |
| ·RsaⅠ酶切效率检测 | 第46页 |
| ·抑制性差减杂交后二次PCR 产物分析 | 第46页 |
| ·差减cDNA 文库的构建及阳性克隆的筛选 | 第46-47页 |
| ·牡丹花芽内休眠解除相关基因的Blast 分析及功能分类 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·牡丹花芽总RNA 的提取 | 第49页 |
| ·差减cDNA 文库的筛选及差异基因冗余性 | 第49-50页 |
| ·休眠解除相关基因涉及生命活动的多个方面 | 第50-52页 |
| 3 牡丹花芽内休眠解除过程中差异基因的表达模式分析 | 第52-62页 |
| ·材料与方法 | 第52-56页 |
| ·试验材料 | 第52页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-56页 |
| ·Northern blot 分析 | 第52-56页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-58页 |
| ·不同时期牡丹花芽总RNA 的提取 | 第56-57页 |
| ·花芽内休眠解除过程中差异基因表达模式的northern blot 分析 | 第57页 |
| ·花芽内休眠解除过程中差异基因表达模式的RT-PCR 分析 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-62页 |
| ·PsPII 和PsMPT 基因的表达模式分析 | 第58-60页 |
| ·PsARP 和PsGA20 基因的表达模式分析 | 第60页 |
| ·PsSERK1 基因的表达模式分析 | 第60页 |
| ·PsDHN 和PsCXE 基因的表达模式分析 | 第60-61页 |
| ·低温诱导的核糖体蛋白的表达可能与花芽内休眠的解除有关 | 第61-62页 |
| 4 牡丹生长素抑制蛋白基因的功能分析 | 第62-80页 |
| ·材料与方法 | 第62-70页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·试验材料及其处理 | 第62页 |
| ·菌种 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-70页 |
| ·PsARP 基因全长cDNA 的扩增（RACE-PCR） | 第63-66页 |
| ·蛋白质的生物信息学分析 | 第66页 |
| ·PsARP 的亚细胞定位 | 第66-70页 |
| ·不同处理条件下PsARP 的northern blot 分析 | 第70页 |
| ·PsARP 的超表达转基因研究 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-78页 |
| ·PsARP 基因cDNA 全长的克隆 | 第70-72页 |
| ·PsARP 编码的蛋白质的生物信息学分析 | 第72-76页 |
| ·同源性比较 | 第72-73页 |
| ·功能结构域分析 | 第73-74页 |
| ·跨膜结构域分析 | 第74页 |
| ·信号肽分析 | 第74页 |
| ·系统进化树分析 | 第74-76页 |
| ·PsARP 的亚细胞定位 | 第76页 |
| ·不同处理条件下PsARP 的表达模式变化 | 第76页 |
| ·PsARP 超表达转基因植株的表型分析 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| ·PsARP 编码的蛋白质结构分析 | 第78页 |
| ·PsARP 编码的蛋白质功能分析 | 第78-80页 |
| 5 牡丹线粒体磷酸转移子基因的功能分析 | 第80-96页 |
| ·材料与方法 | 第80-83页 |
| ·材料 | 第80页 |
| ·试验材料及其处理（同4.1.1.1） | 第80页 |
| ·菌种（同4.1.1.2） | 第80页 |
| ·试剂（同4.1.1.3） | 第80页 |
| ·方法 | 第80-83页 |
| ·PsMPT 基因全长cDNA 的扩增（RACE-PCR） | 第80页 |
| ·蛋白质的生物信息学分析 | 第80页 |
| ·PsMPT 的亚细胞定位 | 第80-81页 |
| ·不同处理条件下PsMPT 的northern blot 分析 | 第81页 |
| ·不同处理条件下牡丹花芽内ATP 含量的测定 | 第81-82页 |
| ·PsMPT 的超表达转基因研究 | 第82-83页 |
| ·结果与分析 | 第83-91页 |
| ·PsMPT 基因cDNA 全长的克隆 | 第83-84页 |
| ·PsMPT 编码的蛋白质的生物信息学分析 | 第84-88页 |
| ·同源性比较 | 第84页 |
| ·功能结构域分析 | 第84-87页 |
| ·跨膜结构域分析 | 第87页 |
| ·信号肽分析 | 第87页 |
| ·系统进化树分析 | 第87-88页 |
| ·PsMPT 的亚细胞定位 | 第88-89页 |
| ·不同处理条件下PsMPT 的表达模式变化 | 第89页 |
| ·不同处理条件下牡丹花芽内ATP 的含量变化 | 第89-91页 |
| ·PsMPT 超表达植株的表型分析 | 第91页 |
| ·讨论 | 第91-96页 |
| ·PsMPT 编码的蛋白质结构分析 | 第91-93页 |
| ·PsMPT 编码的蛋白质功能分析 | 第93-96页 |
| 6 结论及研究展望 | 第96-100页 |
| ·结论 | 第96-98页 |
| ·研究展望 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 作者简介 | 第112-114页 |
| 导师简介 | 第114-116页 |
| 博士期间发表的论文 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
