英文缩略词 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
引言 | 第12-14页 |
第一部分 材料与方法 | 第14-25页 |
1 实验材料及来源 | 第14-16页 |
·菌株和质粒 | 第14页 |
·主要试剂及来源 | 第14-15页 |
·主要仪器设备 | 第15页 |
·实验所用溶液配方 | 第15-16页 |
·细胞培养 | 第16页 |
·组织样本来源 | 第16页 |
2 主要实验及其步骤 | 第16-25页 |
·GST-PBD 质粒的构建 | 第16-17页 |
·GST 融合蛋白诱导表达与纯化 | 第17-18页 |
·GST 沉淀实验(GST pull-down) | 第18页 |
·免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第18-19页 |
·逆转录病毒感染及细胞克隆筛选 | 第19页 |
·免疫组织化学实验 | 第19-20页 |
·细胞Transwell 迁移实验 | 第20-21页 |
·划痕实验 | 第21页 |
·细胞侵袭实验 | 第21页 |
·细胞免疫荧光实验 | 第21-22页 |
·F-actin 鬼笔环肽染色实验 | 第22页 |
·细胞黏附实验 | 第22-23页 |
·Rac1/Cdc42 活性检测实验(GST-PBD pull down) | 第23页 |
·RhoA 活性检测实验(GST-RBD pull down) | 第23-24页 |
·免疫组化结果的判读及统计分析 | 第24-25页 |
第二部分 实验结果 | 第25-43页 |
1 Gankyrin 表达水平与乳腺癌转移程度成正相关 | 第25-29页 |
·Gankyrin 在乳腺癌中高表达 | 第25-27页 |
·Gankyin 表达水平与乳腺癌淋巴结转移正相关 | 第27-28页 |
·本节小结 | 第28-29页 |
2 Gankyrin 影响细胞的迁移、侵润和黏附 | 第29-36页 |
·MDA-MB-231 pBabe-Gankyrin 过表达细胞系的构建 | 第29页 |
·Gankyrin 对乳腺癌细胞运动迁移的影响 | 第29-30页 |
·Gankyrin 对乳腺癌细胞侵袭的影响 | 第30-31页 |
·Gankyrin 抑制细胞黏附 | 第31-34页 |
·Gankyrin 对细胞内F-actin 分布的影响 | 第34页 |
·本节小结 | 第34-36页 |
3 Gankyrin 对细胞内Rho 家族小G 蛋白活性的影响 | 第36-43页 |
·GST-PBD 质粒的构建与融合蛋白的诱导纯化 | 第36-37页 |
·Gankyrin 对Rac1/Cdc42 活性的影响 | 第37-38页 |
·Gankyrin 抑制RhoA 的活性 | 第38-39页 |
·Gankyrin 对Rho 家族小G 蛋白活性的影响机制探讨 | 第39-41页 |
·本节小结 | 第41-43页 |
讨论 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
综述 | 第52-64页 |
参考文献 | 第58-64页 |
个人简历 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |