| 缩略词表（Abbreviation） | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 第一部分 蓝舌病病毒核酸通用检测试剂质控参比品的建立 | 第20-35页 |
| 1 材料与方法 | 第20-25页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·蓝舌病病毒的培养纯化与鉴定 | 第21-22页 |
| ·病毒的增殖 | 第21页 |
| ·病毒的纯化与鉴定 | 第21-22页 |
| ·特异性引物和TaqMan探针的设计与合成 | 第22-23页 |
| ·病毒序列分析 | 第22页 |
| ·引物和探针的设计及其特性分析 | 第22-23页 |
| ·对不同血清型病毒的检测验证 | 第23页 |
| ·蓝舌病病毒核酸检测试剂质控参比品的建立 | 第23-25页 |
| ·重组质粒DNA参比品 | 第23-24页 |
| ·体外转录RNA参比品 | 第24-25页 |
| ·病毒阳性参比品 | 第25页 |
| ·阴性参比品 | 第25页 |
| 2 结果 | 第25-33页 |
| ·病毒的培养纯化与鉴定 | 第25-27页 |
| ·细胞病变观察鉴定 | 第25-26页 |
| ·病毒纯化及形态学鉴定 | 第26页 |
| ·抗原蛋白鉴定 | 第26-27页 |
| ·引物和TaqMan探针设计及其特性分析 | 第27-31页 |
| ·病毒序列分析 | 第27-28页 |
| ·引物和探针的设计及其特性分析 | 第28-31页 |
| ·对不同血清型病毒的检测验证 | 第31页 |
| ·重组质粒DNA参比品 | 第31-32页 |
| ·病毒的RT-PCR | 第31页 |
| ·重组质粒制备鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·重组质粒DNA参比品的建立 | 第32页 |
| ·体外转录RNA参比品 | 第32-33页 |
| ·体外转录RNA的制备与鉴定 | 第32-33页 |
| ·体外转录RNA参比品的建立 | 第33页 |
| ·病毒参比品 | 第33页 |
| ·阴性参比品 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 4 小结 | 第34-35页 |
| 第二部分 蓝舌病病毒RT-PCR核酸通用检测试剂的研制 | 第35-52页 |
| 1 材料与方法 | 第35-40页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·病毒RNA制备方法确定及鉴定 | 第36-37页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR核酸检测体系的确定 | 第37-38页 |
| ·反转录酶的选择 | 第37页 |
| ·反转录中预变性温度的确定 | 第37页 |
| ·PCR中dNTPs浓度的确定 | 第37页 |
| ·PCR中Taq DNA聚合酶浓度的确定 | 第37页 |
| ·PCR中退火温度的确定 | 第37-38页 |
| ·PCR中退火时间的确定 | 第38页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR核酸检测体系的评价 | 第38-40页 |
| ·特异性 | 第38页 |
| ·灵敏度 | 第38页 |
| ·重复性 | 第38页 |
| ·符合率 | 第38-39页 |
| ·样品检测 | 第39页 |
| ·消长规律试验 | 第39页 |
| ·保存期试验 | 第39-40页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR核酸检测试剂的中试与检验 | 第40页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR核酸检测试剂申报临床试验 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-50页 |
| ·病毒RNA制备方法确定 | 第40页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR检测体系确定 | 第40-43页 |
| ·反转录酶确定 | 第40-41页 |
| ·反转录中预变性温度确定 | 第41页 |
| ·PCR反应中dNTPs浓度确定 | 第41-42页 |
| ·PCR中Taq DNA聚合酶浓度确定 | 第42页 |
| ·PCR中退火温度的确定 | 第42页 |
| ·PCR中退火时间的确定 | 第42页 |
| ·蓝舌病病毒核酸RT-PCR检测体系 | 第42-43页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR检测体系的评价 | 第43-48页 |
| ·特异性 | 第43-44页 |
| ·灵敏度 | 第44-45页 |
| ·重复性 | 第45-46页 |
| ·符合率 | 第46页 |
| ·血清样品检测 | 第46-47页 |
| ·消长规律试验 | 第47-48页 |
| ·保存期试验 | 第48页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR核酸检测试剂的中试与检定 | 第48-49页 |
| ·蓝舌病病毒RT-PCR核酸检测试剂申报临床试验进展 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 第三部分 蓝舌病病毒RT-实时荧光定量PCR核酸通用检测试剂的研制 | 第52-70页 |
| 1 材料与方法 | 第52-57页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·病毒RNA制备方法确定及验证 | 第53-54页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR核酸检测体系的确定 | 第54-55页 |
| ·反转录酶的选择 | 第54页 |
| ·反转录中预变性温度的确定 | 第54页 |
| ·荧光定量PCR中dNTPs浓度的确定 | 第54页 |
| ·荧光定量PCR中Mg~(2+)浓度的确定 | 第54页 |
| ·荧光定量PCR中Taq酶浓度的确定 | 第54页 |
| ·荧光定量PCR中引物与TaqMan荧光探针浓度比例的确定 | 第54页 |
| ·荧光定量PCR中退火温度的确定 | 第54-55页 |
| ·荧光定量PCR中退火时间的确定 | 第55页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR核酸检测体系的评价 | 第55-56页 |
| ·特异性 | 第55页 |
| ·灵敏度 | 第55页 |
| ·定量分析特性 | 第55页 |
| ·重复性 | 第55-56页 |
| ·符合率 | 第56页 |
| ·血清样品检测 | 第56页 |
| ·消长规律试验 | 第56页 |
| ·保存期试验 | 第56页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR核酸检测试剂的中试与检定 | 第56-57页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR核酸检测试剂申报临床试验 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-68页 |
| ·病毒RNA制备方法确定 | 第57页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR核酸检测体系的确定 | 第57-60页 |
| ·反转录酶确定 | 第57-58页 |
| ·反转录中核酸预变性温度确定 | 第58页 |
| ·荧光定量PCR中dNTPs浓度的确定 | 第58页 |
| ·荧光定量PCR中Mg~(2+)浓度确定 | 第58-59页 |
| ·荧光定量PCR中Taq DNA聚合酶浓度的确定 | 第59页 |
| ·荧光定量PCR中引物与TaqMan荧光探针比的确定 | 第59-60页 |
| ·荧光定量PCR中退火温度的确定 | 第60页 |
| ·荧光定量PCR中退火时间的确定 | 第60页 |
| ·荧光定量PCR检测体系的确定 | 第60页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR检测体系的评价 | 第60-66页 |
| ·特异性 | 第60-61页 |
| ·灵敏度 | 第61-63页 |
| ·定量分析特性 | 第63页 |
| ·重复性 | 第63-65页 |
| ·符合率 | 第65页 |
| ·血清样品检测 | 第65-66页 |
| ·消长规律试验 | 第66页 |
| ·保存期试验 | 第66页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR核酸检测试剂的中试与检定 | 第66-67页 |
| ·蓝舌病病毒RT-荧光定量PCR核酸检测试剂申报临床试验进展 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 4 小结 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 附录 | 第78-83页 |
| 附录1 试剂配制 | 第78-80页 |
| 附录2 其他说明 | 第80-81页 |
| 附录3 攻读博士学位期间已（待）发表文章及申请专利等情况 | 第81-83页 |
| 个人简历 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
