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减毒鼠伤寒沙门菌为载体的幽门螺杆菌治疗性疫苗实验研究

英文缩略表第1-9页
ABSTRACT第9-12页
摘要第12-14页
1 前言第14-18页
   ·研究意义与背景第14页
   ·幽门螺杆菌疫苗临床研究现状第14-15页
   ·幽门螺杆菌疫苗候选抗原第15-16页
   ·减毒鼠伤寒沙门菌活疫苗载体第16-17页
   ·本文研究的目的第17-18页
2 实验材料第18-26页
   ·质粒及菌株第18页
   ·实验动物第18页
   ·主要仪器第18-19页
   ·主要试剂第19-21页
   ·主要溶液及试剂配制第21-26页
3 实验方法第26-42页
   ·重组疫苗的设计第26页
   ·构建融合基因第26-33页
     ·PCR 扩增H.pylori cagA160、vacA62 和ure8138 DNA 片段第27-30页
     ·构建融合基因第30-33页
   ·重组表达质粒的构建及重组减毒沙门菌的筛选鉴定第33-36页
     ·重组表达质粒pYA3149-fused_gene 构建第33-34页
     ·重组质粒pYA3149-fused_gene 转化S.typhimurium χ4550第34-35页
     ·重组减毒沙门菌的筛选鉴定第35-36页
   ·抗原表位融合蛋白在重组减毒沙门菌中的表达及抗原性检测第36-37页
     ·重组抗原表位融合蛋白表达鉴定第36页
     ·重组抗原表位融合蛋白的免疫反应性检测第36-37页
   ·重组减毒鼠伤寒沙门菌载体疫苗的免疫治疗实验第37-41页
     ·免疫治疗方案第37页
     ·幽门螺杆菌感染模型制备第37-38页
     ·定量 PCR 法检测 H.pylori 在胃粘膜的定植第38页
     ·ELISA 检测血清、胃和小肠液中H.pylori 特异性抗体变化第38-39页
     ·细胞因子检测第39-40页
     ·重组减毒伤寒沙门菌在小鼠体内的定植检测第40-41页
   ·统计学分析第41-42页
4 实验结果第42-56页
   ·重组疫苗的设计第42-43页
   ·基因的获得及重组疫苗株的构建第43-45页
     ·PCR 扩增H.pylori cagA160、vacA62 和ure8138 DNA 片段结果第43页
     ·构建融合基因第43-45页
   ·重组表达质粒的鉴定第45-50页
     ·双酶切鉴定重组质粒第45页
     ·基因序列测定第45-50页
   ·抗原表位融合蛋白在重组减毒沙门菌中的表达及抗原性检测第50-51页
     ·SDS-PAGE 检测重组抗原表位融合蛋白的表达第50-51页
       ·W estern blotting 检测重组蛋白的免疫反应性第51页
   ·重组减毒鼠伤寒沙门菌载体疫苗的免疫治疗实验第51-56页
     ·定量 PCR 法检测 H.pylori 在胃粘膜的定植第51-52页
     ·ELISA 检测血清、胃和小肠液中H.pylori 特异性抗体变化第52-53页
     ·细胞因子检测第53-54页
     ·重组减毒伤寒沙门菌在小鼠体内的定植第54-56页
5 讨论第56-64页
   ·H.pylori 疫苗的研究意义第56页
   ·疫苗治疗H.pylori 感染的可行性第56-57页
   ·疫苗抗原的选取第57-58页
   ·疫苗载体的选取第58-59页
   ·抗原表位融合蛋白的设计及对linker 的选择第59-60页
   ·重叠延伸PCR 法构建融合基因第60-61页
   ·重组抗原表位融合蛋白的表达第61页
   ·免疫治疗效果评价第61页
   ·免疫治疗机制探讨第61-63页
   ·展望第63-64页
6 全文总结第64-66页
致谢第66-67页
参考文献第67-73页
文献综述 治疗性疫苗研究新进展第73-81页
 参考文献第77-81页
在读期间发表的论文第81-82页

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