英文缩略表 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
1 前言 | 第14-18页 |
·研究意义与背景 | 第14页 |
·幽门螺杆菌疫苗临床研究现状 | 第14-15页 |
·幽门螺杆菌疫苗候选抗原 | 第15-16页 |
·减毒鼠伤寒沙门菌活疫苗载体 | 第16-17页 |
·本文研究的目的 | 第17-18页 |
2 实验材料 | 第18-26页 |
·质粒及菌株 | 第18页 |
·实验动物 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·主要试剂 | 第19-21页 |
·主要溶液及试剂配制 | 第21-26页 |
3 实验方法 | 第26-42页 |
·重组疫苗的设计 | 第26页 |
·构建融合基因 | 第26-33页 |
·PCR 扩增H.pylori cagA160、vacA62 和ure8138 DNA 片段 | 第27-30页 |
·构建融合基因 | 第30-33页 |
·重组表达质粒的构建及重组减毒沙门菌的筛选鉴定 | 第33-36页 |
·重组表达质粒pYA3149-fused_gene 构建 | 第33-34页 |
·重组质粒pYA3149-fused_gene 转化S.typhimurium χ4550 | 第34-35页 |
·重组减毒沙门菌的筛选鉴定 | 第35-36页 |
·抗原表位融合蛋白在重组减毒沙门菌中的表达及抗原性检测 | 第36-37页 |
·重组抗原表位融合蛋白表达鉴定 | 第36页 |
·重组抗原表位融合蛋白的免疫反应性检测 | 第36-37页 |
·重组减毒鼠伤寒沙门菌载体疫苗的免疫治疗实验 | 第37-41页 |
·免疫治疗方案 | 第37页 |
·幽门螺杆菌感染模型制备 | 第37-38页 |
·定量 PCR 法检测 H.pylori 在胃粘膜的定植 | 第38页 |
·ELISA 检测血清、胃和小肠液中H.pylori 特异性抗体变化 | 第38-39页 |
·细胞因子检测 | 第39-40页 |
·重组减毒伤寒沙门菌在小鼠体内的定植检测 | 第40-41页 |
·统计学分析 | 第41-42页 |
4 实验结果 | 第42-56页 |
·重组疫苗的设计 | 第42-43页 |
·基因的获得及重组疫苗株的构建 | 第43-45页 |
·PCR 扩增H.pylori cagA160、vacA62 和ure8138 DNA 片段结果 | 第43页 |
·构建融合基因 | 第43-45页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第45-50页 |
·双酶切鉴定重组质粒 | 第45页 |
·基因序列测定 | 第45-50页 |
·抗原表位融合蛋白在重组减毒沙门菌中的表达及抗原性检测 | 第50-51页 |
·SDS-PAGE 检测重组抗原表位融合蛋白的表达 | 第50-51页 |
·W estern blotting 检测重组蛋白的免疫反应性 | 第51页 |
·重组减毒鼠伤寒沙门菌载体疫苗的免疫治疗实验 | 第51-56页 |
·定量 PCR 法检测 H.pylori 在胃粘膜的定植 | 第51-52页 |
·ELISA 检测血清、胃和小肠液中H.pylori 特异性抗体变化 | 第52-53页 |
·细胞因子检测 | 第53-54页 |
·重组减毒伤寒沙门菌在小鼠体内的定植 | 第54-56页 |
5 讨论 | 第56-64页 |
·H.pylori 疫苗的研究意义 | 第56页 |
·疫苗治疗H.pylori 感染的可行性 | 第56-57页 |
·疫苗抗原的选取 | 第57-58页 |
·疫苗载体的选取 | 第58-59页 |
·抗原表位融合蛋白的设计及对linker 的选择 | 第59-60页 |
·重叠延伸PCR 法构建融合基因 | 第60-61页 |
·重组抗原表位融合蛋白的表达 | 第61页 |
·免疫治疗效果评价 | 第61页 |
·免疫治疗机制探讨 | 第61-63页 |
·展望 | 第63-64页 |
6 全文总结 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
文献综述 治疗性疫苗研究新进展 | 第73-81页 |
参考文献 | 第77-81页 |
在读期间发表的论文 | 第81-82页 |