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含O型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因的山羊痘病毒弱毒株的构建与表达

摘要第1-4页
Summary第4-10页
第一篇 文献综述第10-27页
 第一章 口蹄疫病毒第10-17页
  1 口蹄疫概述第10-11页
  2 发病机理第11页
  3 病理变化第11-13页
   ·眼观变化第11-12页
   ·病理组织学变化第12-13页
  4 口蹄疫病毒及其基因组第13-17页
 第二章 羊痘病毒的研究进展第17-23页
  1 羊痘的流行概况第17页
  2 病原 SPPV 和 GTPV第17-18页
  3 SPPV 、GTPV 和 LSDV 基因组第18-19页
  4 P32 结构蛋白第19-20页
  5 胸腺嘧啶核苷激酶基因(TK 基因)第20-21页
  6 羊痘发病机理第21页
  7 羊痘病毒病理变化第21-22页
  8 羊痘活载体疫苗研究进展第22-23页
 第三章 疫苗研究中应用的载体病毒第23-27页
  1 痘病毒载体第23-24页
  2 腺病毒第24页
  3 脊髓灰质炎病毒第24-25页
  4 疱疹病毒第25页
  5 其它病毒第25-27页
第二篇 实验部分第27-57页
 第一章 含O 型FMDV P1-2A、3C 基因和EGFP 基因表达盒的构建与鉴定第27-42页
  1 材料与方法第27-36页
   ·实验材料第27-28页
     ·菌株与载体第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·仪器和设备第28页
   ·实验方法第28-36页
     ·引物设计与合成第28页
     ·FMDV 总 RNA 的提取第28页
     ·P1-2A 及3C 基因 RT-PCR 扩增第28-29页
     ·转移载体骨架的构建第29-33页
     ·重组载体pMD18-T-P1-2A-3C 的构建第33-35页
     ·p-EGFP-N1-P-7.5-P1-2A-3C 表达盒的构建第35-36页
  2 结果第36-40页
   ·P1-2A 及3C 基因 RT-PCR 扩增产物第36-37页
   ·pUC119-P1-2A 重组载体酶切鉴定和PCR 鉴定第37-38页
   ·pMD18-T-3C 重组载体酶切鉴定和PCR 鉴定第38页
   ·重组载体pMD18-T-P1-2A-3C 酶切鉴定和PCR 鉴定第38-39页
   ·p-EGFP-N1-P-7.5-P1-2A-3C 表达盒酶切鉴定和PCR 鉴定第39-40页
  3 讨论第40-42页
 第二章 表达含EGFP 基因FMDV P1-2A-3C 的山痘病毒复制非必需区TK 转移载体的构建与鉴定第42-51页
  1 材料与方法第42-47页
   ·实验材料第42-43页
     ·病毒第42页
     ·菌种、载体第42页
     ·主要试剂第42页
     ·仪器和设备第42-43页
   ·实验方法第43-47页
     ·重组载体pUC119-TK 的构建第43-44页
     ·转移载体pUC119-TK-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C 的构建第44-47页
  2 结果第47-48页
   ·重组质粒pUC119-TK 的酶切和PCR 鉴定第47页
   ·转移载体pUC119-TK-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C 的鉴定BglⅡ酶切和PCR 鉴定第47-48页
  3 讨论第48-51页
 第三章 O 型口蹄疫病毒P1-2A 3C 基因的山羊痘病毒弱毒株的表达及鉴定第51-57页
  1 材料与方法第51-53页
   ·实验材料第51页
     ·毒株和细胞第51页
     ·主要试剂第51页
     ·仪器和设备第51页
   ·实验方法第51-53页
     ·GTPV AV41 株BHK-21 细胞传代第51-52页
     ·GTPV AV41 与脂质体共转染BHK-21 细胞第52页
     ·重组病毒的筛选第52页
     ·RT-PCR 检测目的基因第52页
     ·ELISA 检测目的表达抗原第52-53页
  2 结果第53-56页
   ·GTPV AV41 感染BHK-21 细胞后的病变图第53页
   ·重组CPV 的筛选第53-54页
   ·重组 CPV 感染的细胞培养物RT-PCR 鉴定第54-55页
   ·重组 CPV 在 BHK21 细胞中 FMDV P1-2A-3C 表达双抗夹心ELISA 检测第55-56页
  3 讨论第56-57页
创新点第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-66页
作者简介第66-67页
导师简介第67-68页

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