摘要 | 第1-4页 |
Summary | 第4-10页 |
第一篇 文献综述 | 第10-27页 |
第一章 口蹄疫病毒 | 第10-17页 |
1 口蹄疫概述 | 第10-11页 |
2 发病机理 | 第11页 |
3 病理变化 | 第11-13页 |
·眼观变化 | 第11-12页 |
·病理组织学变化 | 第12-13页 |
4 口蹄疫病毒及其基因组 | 第13-17页 |
第二章 羊痘病毒的研究进展 | 第17-23页 |
1 羊痘的流行概况 | 第17页 |
2 病原 SPPV 和 GTPV | 第17-18页 |
3 SPPV 、GTPV 和 LSDV 基因组 | 第18-19页 |
4 P32 结构蛋白 | 第19-20页 |
5 胸腺嘧啶核苷激酶基因(TK 基因) | 第20-21页 |
6 羊痘发病机理 | 第21页 |
7 羊痘病毒病理变化 | 第21-22页 |
8 羊痘活载体疫苗研究进展 | 第22-23页 |
第三章 疫苗研究中应用的载体病毒 | 第23-27页 |
1 痘病毒载体 | 第23-24页 |
2 腺病毒 | 第24页 |
3 脊髓灰质炎病毒 | 第24-25页 |
4 疱疹病毒 | 第25页 |
5 其它病毒 | 第25-27页 |
第二篇 实验部分 | 第27-57页 |
第一章 含O 型FMDV P1-2A、3C 基因和EGFP 基因表达盒的构建与鉴定 | 第27-42页 |
1 材料与方法 | 第27-36页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·菌株与载体 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·仪器和设备 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-36页 |
·引物设计与合成 | 第28页 |
·FMDV 总 RNA 的提取 | 第28页 |
·P1-2A 及3C 基因 RT-PCR 扩增 | 第28-29页 |
·转移载体骨架的构建 | 第29-33页 |
·重组载体pMD18-T-P1-2A-3C 的构建 | 第33-35页 |
·p-EGFP-N1-P-7.5-P1-2A-3C 表达盒的构建 | 第35-36页 |
2 结果 | 第36-40页 |
·P1-2A 及3C 基因 RT-PCR 扩增产物 | 第36-37页 |
·pUC119-P1-2A 重组载体酶切鉴定和PCR 鉴定 | 第37-38页 |
·pMD18-T-3C 重组载体酶切鉴定和PCR 鉴定 | 第38页 |
·重组载体pMD18-T-P1-2A-3C 酶切鉴定和PCR 鉴定 | 第38-39页 |
·p-EGFP-N1-P-7.5-P1-2A-3C 表达盒酶切鉴定和PCR 鉴定 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第二章 表达含EGFP 基因FMDV P1-2A-3C 的山痘病毒复制非必需区TK 转移载体的构建与鉴定 | 第42-51页 |
1 材料与方法 | 第42-47页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·病毒 | 第42页 |
·菌种、载体 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·仪器和设备 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-47页 |
·重组载体pUC119-TK 的构建 | 第43-44页 |
·转移载体pUC119-TK-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C 的构建 | 第44-47页 |
2 结果 | 第47-48页 |
·重组质粒pUC119-TK 的酶切和PCR 鉴定 | 第47页 |
·转移载体pUC119-TK-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C 的鉴定BglⅡ酶切和PCR 鉴定 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-51页 |
第三章 O 型口蹄疫病毒P1-2A 3C 基因的山羊痘病毒弱毒株的表达及鉴定 | 第51-57页 |
1 材料与方法 | 第51-53页 |
·实验材料 | 第51页 |
·毒株和细胞 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·仪器和设备 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-53页 |
·GTPV AV41 株BHK-21 细胞传代 | 第51-52页 |
·GTPV AV41 与脂质体共转染BHK-21 细胞 | 第52页 |
·重组病毒的筛选 | 第52页 |
·RT-PCR 检测目的基因 | 第52页 |
·ELISA 检测目的表达抗原 | 第52-53页 |
2 结果 | 第53-56页 |
·GTPV AV41 感染BHK-21 细胞后的病变图 | 第53页 |
·重组CPV 的筛选 | 第53-54页 |
·重组 CPV 感染的细胞培养物RT-PCR 鉴定 | 第54-55页 |
·重组 CPV 在 BHK21 细胞中 FMDV P1-2A-3C 表达双抗夹心ELISA 检测 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-57页 |
创新点 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
作者简介 | 第66-67页 |
导师简介 | 第67-68页 |