摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
1 绪论 | 第7-17页 |
·研究对象 | 第7-9页 |
·东北马鹿 | 第7页 |
·我国对鹿茸的应用 | 第7页 |
·鹿茸的化学成分以及药理作用 | 第7-8页 |
·分子标记辅助育种 | 第8-9页 |
·cDNA文库的构建策略及其进展 | 第9-14页 |
·cDNA文库的应用 | 第9页 |
·cDNA文库的不同类型 | 第9-11页 |
·cDNA文库的不同构建方法及其优缺点 | 第11-14页 |
·IGF1和IGF2基因 | 第14-16页 |
·IGF简介 | 第14-15页 |
·IGFl对骨细胞的作用 | 第15页 |
·IGF2对生长发育的作用 | 第15页 |
·克隆胰岛素样生长因子意义 | 第15-16页 |
·目前cDNA文库构建技术发展趋势 | 第16-17页 |
2 马鹿鹿茸上皮组织cDNA文库构建及IGFs基因克隆 | 第17-23页 |
·材料和实验药品 | 第17-18页 |
·材料与试剂盒 | 第17页 |
·实验药品配制 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-23页 |
·总RNA提取 | 第18页 |
·cDNA第一链的合成 | 第18页 |
·LD-PCR扩增cDNA | 第18-19页 |
·cDNA纯化 | 第19页 |
·Sfi I酶切 | 第19页 |
·用Chroma SPIN-400将cDNA过柱 | 第19-20页 |
·cDNA文库建立 | 第20-21页 |
·cDNA文库插入片断长度长度 | 第21页 |
·IGF1克隆及测序 | 第21页 |
·IGF2克隆及测序 | 第21-23页 |
3 结果与分析 | 第23-32页 |
·总RNA的提取 | 第23页 |
·双链cDNA合成和鉴定 | 第23页 |
·cDNA片段的酶切和分级分离 | 第23-24页 |
·原始文库质量鉴定 | 第24-25页 |
·扩增文库质量鉴定 | 第25页 |
·IGFl基因产物的克隆 | 第25页 |
·测序结果 | 第25页 |
·马鹿鹿茸上皮IGF1基因序列的比较分析 | 第25-27页 |
·分子系统进化树 | 第27页 |
·IGF2基因产物产物的克隆 | 第27-28页 |
·测序结果 | 第28页 |
·马鹿鹿茸上皮IGF2基因序列的比较分析 | 第28-32页 |
·分子系统进化树 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
·总RNA的纯度及完整性 | 第32页 |
·全长cDNA文库的构建 | 第32-33页 |
·鹿茸中间的IGFs基因的克隆及测序 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-38页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |