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核供体细胞体外培养及其对猪克隆胚生产效率的影响

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
英文缩略表第12-13页
第一部分 文献综述第13-38页
 第一章 核供体细胞与体细胞核移植第13-38页
  1. 体细胞核移植的理论基础第14页
  2. 核供体细胞的体外培养对哺乳动物核移植效率的影响第14-23页
   ·体细胞的来源及分化程度对核移植效率的影响第14-15页
   ·用于核移植的核供体细胞类型第15-17页
   ·供体细胞类型对核移植效率的影响第17-18页
   ·体细胞的传代培养对核移植效率的影响第18-19页
   ·体细胞的细胞周期对核移植效率的影响第19-20页
   ·供体细胞重新编程第20页
   ·体细胞的克隆效率第20-22页
   ·体细胞的冷冻与保存第22-23页
  3. 体细胞核移植技术第23-25页
   ·核移植受体胞质的准备第23页
   ·体细胞的制备第23-24页
   ·供体细胞的注入与融合第24-25页
   ·克隆后卵母细胞的激活第25页
   ·胚胎的体外培养第25页
  4. 体细胞核移植存在的问题第25-26页
  5. 哺乳动物体细胞核移植的应用前景第26-29页
   ·体细胞核移植研究在基础科学研究中的作用第26-27页
   ·体细胞核移植研究在医学领域的作用第27-28页
   ·体细胞核移植与动物保护第28页
   ·体细胞核移植在畜牧生产中的作用第28页
   ·提供实验动物第28-29页
  参考文献第29-38页
第二部分 实验研究第38-79页
 第二章 核供体细胞体外培养及生物学特性研究第38-64页
  1 材料与方法第38-41页
   ·材料第38-39页
   ·主要仪器设备第39页
   ·主要试剂和药品第39-40页
   ·主要试剂的配制第40-41页
  2 实验方法第41-45页
   ·体细的分离与培养第41-43页
   ·传代培养第43页
   ·HE染色第43页
   ·细胞的冻存第43页
   ·细胞的复苏第43页
   ·细胞生物学特性第43-44页
   ·试验设计第44-45页
   ·数据统计与分析第45页
  3 结果第45-55页
   ·体细胞的分离与培养第45-51页
   ·HE染色结果第51-52页
   ·几种供核细胞的生长曲线第52-53页
   ·不同冷冻方法对猪体细胞培养的影响第53-55页
   ·染色体核型分析第55页
  4 讨论第55-61页
  参考文献第61-64页
 第三章 核供体细胞对猪体细胞核移植效率的影响第64-79页
  1 材料第64-66页
   ·猪卵巢来源第65页
   ·主要仪器设备第65页
   ·主要试剂及药品第65页
   ·主要试剂的配置第65-66页
  2 方法第66-69页
   ·猪卵母细胞采集第66-67页
   ·猪卵泡液(porcine forllicular fluid,pFF)制备第67页
   ·卵母细胞体外成熟第67页
   ·核供体细胞的制备第67页
   ·卵母细胞去核与注核第67-69页
   ·融合和激活第69页
   ·重构胚胎的体外培养第69页
   ·试验设计第69页
   ·数据统计与分析第69页
  3 结果第69-73页
   ·体细胞核移植胚胎生产程序的建立第69-70页
   ·不同核供体细胞对体细胞核移植的影响第70-71页
   ·不同传代次数对核移植的影响第71-72页
   ·直接分离的卵丘细胞核和培养传代的卵丘细胞对体细胞核移植的影响第72-73页
  4 讨论第73-76页
  参考文献第76-79页
全文结论第79-80页
致谢第80页

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