| 一. 缩略语英汉对照表 | 第1-7页 |
| 二. 中文摘要 | 第7-9页 |
| 三. 英文摘要 | 第9-11页 |
| 四. 引言 | 第11-26页 |
| 1 VTEC 疾病及检测方法的研究进展 | 第11-19页 |
| ·病原学研究 | 第11-13页 |
| ·VTEC 的流行病学研究 | 第13-14页 |
| ·VTEC 的诊断方法的研究 | 第14-19页 |
| 2、实时定量 PCR 研究进展 | 第19-26页 |
| ·荧光染料 | 第20-21页 |
| ·TaqMan 探针 | 第21-22页 |
| ·Amplisensor(Biotronics) | 第22页 |
| ·Molecular beacon | 第22页 |
| ·Lightcycler | 第22-23页 |
| ·复合探针法(complex probes) | 第23页 |
| ·Taqman－MB 荧光探针定量PCR 技术 | 第23-24页 |
| ·荧光双链引物法 | 第24页 |
| ·通用探针法 | 第24页 |
| ·荧光引物法 | 第24-26页 |
| 五. 研究内容 | 第26-44页 |
| 试验一 产 vero 毒素大肠杆菌(VTEC)多重荧光 PCR 检测方法的建立 | 第26-37页 |
| 1. 材料 | 第26-27页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·分子生物学试剂 | 第27页 |
| ·所使用软件 | 第27页 |
| ·试验用各种培养基和溶液的配制 | 第27页 |
| 2. 方法 | 第27-30页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·细菌的增殖 | 第28页 |
| ·细菌的模板的制备 | 第28-29页 |
| ·常规单一 PCR 方法 | 第29页 |
| ·常规多重 PCR 方法 | 第29页 |
| ·SYBR Green Ⅰ多重荧光 PCR 检测方法的建立 | 第29-30页 |
| 3. 结果与分析 | 第30-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| ·引物的设计 | 第35页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光 PCR 反应体系的优化 | 第35页 |
| ·多重荧光 PCR 方法提高了检测的特异性 | 第35-36页 |
| ·多重荧光 PCR 方法提高了检测效率、实验的灵敏度和准确度 | 第36-37页 |
| 试验二 产vero 毒素大肠杆菌（VTEC）多重荧光PCR 检测方法的建立 | 第37-44页 |
| 1 模拟样品的检测 | 第37-40页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| 2 出口企业养殖场、屠宰场抽样调查检测 | 第40-44页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 六. 结论 | 第44-45页 |
| 七. 参考文献 | 第45-55页 |
| 八. 致谢 | 第55-57页 |
| 九. 个人简介及攻读学位期间发表论文情况 | 第57页 |
