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猪链球菌2型病理学研究及其双重荧光PCR检测方法的建立

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
综述第11-22页
 1 链球菌形态及分类第11-12页
   ·链球菌的形态第11页
   ·根据溶血特证分类第11-12页
   ·兰氏分类法(Lancefield-1928)分类第12页
   ·荚膜多糖抗原分类法第12页
 2 猪链球菌2型的毒力因子第12-16页
   ·荚膜多糖(CPs)第12-13页
   ·溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外蛋白因子(EF)第13-14页
   ·溶血素(Sly)第14页
   ·粘附素第14-15页
   ·lgG结合蛋白第15页
   ·38-KD蛋白第15页
   ·其他毒力因子第15-16页
 3 猪链球菌2型致病机理第16-18页
   ·感染途径的研究第16-17页
   ·链球菌2型致病机制研究第17-18页
 4 猪链球菌2型检测方法的研究进展第18-20页
   ·经典鉴定方法第18-19页
   ·分子方法鉴定第19-20页
     ·PCR鉴定第19页
     ·其他鉴定方法第19-20页
 5 本研究的目的与意义第20-22页
第一部分 猪链球菌2型病理学研究第22-31页
 1 材料与方法第22-23页
   ·试剂和仪器设备第22页
     ·试剂及配方第22页
     ·仪器设备第22页
   ·攻毒菌株的制备第22-23页
   ·实验动物第23页
   ·动物攻毒试验第23页
 2 观察指标第23-24页
   ·临床观察第23页
   ·病理解剖观察第23-24页
   ·病理组织学观察第24页
     ·取样固定第24页
     ·组织脱水、透明、包埋、切片第24页
     ·HE染色第24页
     ·显微镜观察第24页
 3 结果与分析第24-26页
   ·临床观察第24-25页
   ·尸体剖检病变第25页
   ·病理组织学观察第25-26页
     ·肝脏第25页
     ·肾脏第25-26页
     ·肺脏第26页
     ·脾脏第26页
     ·淋巴结第26页
     ·心脏第26页
     ·骨骼肌第26页
     ·膀胱第26页
     ·气管第26页
     ·脑部第26页
 4 讨论第26-29页
   ·不同感染途径的致病性第27页
   ·不同感染途径致病的临床表现第27页
   ·不同感染途径致病的病理变化第27-28页
   ·猪链球菌2型致病的机理第28-29页
 5 小结第29-31页
第二部分 双重实时荧光PCR快速检测2型猪链球菌方法的建立第31-45页
 1 材料与方法第32-35页
   ·试验材料第32-33页
     ·菌株第32页
     ·试剂、仪器第32-33页
     ·引物及探针的设计第33页
   ·TaqMan探针实时荧光PCR检测CPS2J、MRP的方法建立的步骤第33-34页
     ·细菌培养第33页
     ·基因组提取第33-34页
     ·引物和探针浓度的优化第34页
     ·镁离子浓度的优化第34页
     ·TaqDNA聚合酶浓度的优化第34页
     ·荧光POR循环参数的优化第34页
     ·阴性、阳性结果判定第34页
   ·双重荧光PCR检测猪链球菌2型方法的评价第34-35页
     ·特异性实验第34页
     ·敏感性实验第34-35页
     ·重复性与稳定性实验第35页
     ·普通PCR检测猪链球菌2型敏感性实验第35页
   ·双重荧光PCR检测病料的初步运用第35页
 2 结果与分析第35-41页
   ·双重荧光PCR检测2型猪链球菌方法的建立第35-36页
   ·双重荧光PcR检测猪链球菌2型四川资阳分离株的结果第36页
   ·特异性实验第36-37页
   ·双重荧光PCR检测2型猪链球菌敏感性实验第37-38页
   ·重复性和稳定性实验第38-39页
   ·普通PCR检测猪链球菌2型敏感性实验第39页
   ·双重荧光PCR检测病料的初步运用第39-41页
 3 讨论第41-43页
   ·建立双重荧光PCR检测猪链球菌2型方法依据第41-42页
   ·双重荧光PCR检测猪链球菌2型方法的优点第42-43页
 4 小结第43-45页
参考文献第45-49页
附图第49-53页
致谢第53页

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