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水稻抗病相关RNA解旋酶基因OsBIRH1的功能分析及YTH蛋白基因家族的初步研究

致谢第1-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述和研究背景第16-35页
   ·植物的先天免疫系统(innate immunity)第16-17页
   ·植物的诱导免疫系统(induced immunity)第17-22页
     ·SAR及其SA信号途径第18-20页
     ·ISR及其JA/ET信号途径第20-22页
   ·DEAD box RNA解旋酶第22-28页
     ·DEAD-box RNA解旋酶的序列特征与生化活性第23-24页
     ·DEAD-box蛋白家族成员的细胞功能第24-26页
     ·DEAD-box RNA解旋酶在植物中的作用第26-28页
   ·RNA结合蛋白第28-34页
     ·蛋白质识别的RNA的二级结构单元第29页
     ·蛋白质中的RNA结合结构域第29-31页
     ·植物RNA结合蛋白的作用第31-34页
   ·本研究的目的意义和主要研究内容第34-35页
第二章 水稻抗病相关DEAD-box RNA解旋酶基因OSBIRH1的功能分析第35-77页
   ·前言第35-37页
   ·材料与方法第37-50页
     ·供试稻瘟菌菌株与接种第37-38页
     ·水稻幼苗培育与处理第38页
     ·OsBIRH1 cDNA基因的克隆第38-39页
     ·DNA的序列测定和分析第39-40页
     ·OsBIRH1融合蛋白的原核表达第40-42页
     ·OsBIRH1蛋白的体外RNA解旋和RNA结合活性分析第42-43页
     ·ATPase活性测定第43页
     ·植物组织总RNA和基因组DNA的提取第43-44页
     ·Northern和Southern杂交第44-45页
     ·水稻OsBIRH1基因植物转化双元表达载体的构建第45-46页
     ·拟南芥转化以及转基因植株的筛选鉴定第46-47页
     ·转基因拟南芥植株PR基因的RT-PCR表达分析第47-48页
     ·转OsBIRH1基因拟南芥的抗病性测定第48-49页
     ·转OsBIRH1基因拟南芥对干旱和ABA的反应第49页
     ·叶绿素含量的测定第49-50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·OsBIRH1基因全长cDNA序列的克隆及序列分析第50页
     ·OsBIRH1蛋白的结构与系统进化树分析第50-51页
     ·OsBIRH1蛋白依赖RNA的ATPase活性第51页
     ·OsBIRH1蛋白的RNA解旋活性第51-52页
     ·OsBIRH1基因在水稻抗病反应中的差异表达第52-53页
     ·OsBIRH1基因植物转化双元表达载体的构建第53页
     ·转OsBIRH1基因的拟南芥的分子鉴定第53页
     ·转OsBIRH1基因拟南芥植株提高了对不同病原菌的抗病性第53-54页
     ·过量表达OsBIRH1基因的转拟南芥植株中PR基因的表达第54-55页
     ·转OsBIRH1基因拟南芥植株提高对ABA的敏感性和干旱的抗性第55页
     ·转OsBIRH1基因拟南芥植株提高对氧化胁迫的抗性第55-56页
     ·讨论第56-77页
第三章 拟南芥和水稻YTH结构域RNA结合蛋白家族的初步研究第77-104页
   ·前言第77-81页
   ·材料和方法第81-87页
     ·供试拟南芥生长与培育第81页
     ·拟南芥和水稻YTH结构域蛋白基因的鉴定第81页
     ·AtYTH05/07融合蛋白的纯化第81-82页
     ·AtYTH5蛋白的体外RNA结合活性分析第82页
     ·AtYTH05、AtYTH07基因Promoter::GUS载体的构建第82-83页
     ·拟南芥的转化第83页
     ·植物组GUS染色第83页
     ·拟南芥突变体纯合体的筛选第83-85页
     ·拟南芥YTH基因的表达分析第85-87页
   ·结果与分析第87-92页
     ·拟南芥和水稻中YTH家族成员的鉴定第87-88页
     ·拟南芥和水稻中YTH家族蛋白的序列分析第88-89页
     ·AtYTH5蛋白的RNA结合活性第89-90页
     ·拟南芥YTH家族成员基因的表达分析第90页
     ·拟南芥AtYTH05和AtYTH07基因的启动子活性第90-91页
     ·拟南芥YTH家族T-DNA敲除纯合体的筛选鉴定第91-92页
   ·讨论第92-104页
第四章 全文小结和今后研究第104-107页
参考文献第107-128页

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