中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第9-19页 |
第一章 小鼠表皮全蛋白提取及双向电泳条件的优化 | 第19-28页 |
1 材料与仪器 | 第19页 |
·小鼠 | 第19页 |
·试剂 | 第19页 |
·仪器及软件 | 第19页 |
2 实验方法 | 第19-22页 |
·小鼠表皮全蛋白提取 | 第19-20页 |
·2-D Clean-up kit纯化 | 第20页 |
·蛋白定量 | 第20页 |
·SDS-PAGE | 第20-21页 |
·二维凝胶电泳 | 第21-22页 |
·扫描 | 第22页 |
3 结果与讨论 | 第22-27页 |
·小鼠表皮组织全蛋白提取方法优化 | 第22-23页 |
·裂解体系的优化 | 第23-25页 |
·双向电泳分离条件优化 | 第25-27页 |
4 本章小结 | 第27-28页 |
第二章 荧光差示凝胶电泳技术的建立及评价 | 第28-37页 |
1 材料与仪器 | 第28页 |
·试剂 | 第28页 |
·仪器及软件 | 第28页 |
2 实验设计及实验方法 | 第28-29页 |
·荧光染料的性能考察 | 第28页 |
·荧光染料选择性评价 | 第28页 |
·CyDye标记 | 第28-29页 |
·扫描 | 第29页 |
3 结果与讨论 | 第29-36页 |
·荧光染料性能考察 | 第29-32页 |
·荧光染料选择性评价 | 第32-36页 |
本章小结 | 第36-37页 |
第三章 角质细胞特异性 Smad4条件基因剔除前后出生15天和20天小鼠表皮中的差异蛋白质组分析 | 第37-55页 |
第一节 实验分组、实验设计及2-DE DIGE分析 | 第37-41页 |
1 材料与仪器 | 第37页 |
2 实验分组、实验设计与实验方法 | 第37-38页 |
·实验分组 | 第37-38页 |
·2-DE DIGE实验设计 | 第38页 |
·实验方法 | 第38页 |
3 结果与讨论 | 第38-41页 |
·基因型鉴定 | 第38-39页 |
·蛋白定量及其 SDS-PAGE验证 | 第39页 |
·2-DE DIGE分析 | 第39-41页 |
第二节 图像分析 | 第41-43页 |
1 使用软件 | 第41页 |
2 结果与讨论 | 第41-43页 |
第三节 差异蛋白质鉴定 | 第43-46页 |
1 材料与仪器 | 第43-44页 |
·试剂 | 第43页 |
·仪器 | 第43-44页 |
2 实验方法 | 第44-45页 |
·制备胶 | 第44页 |
·胶内酶解、肽段提取 | 第44页 |
·Q-TOF条件 | 第44-45页 |
·MALDI-TOF-TOF | 第45页 |
·数据库检索 | 第45页 |
3 结果与讨论 | 第45-46页 |
第四节 差异蛋白质功能分析 | 第46-47页 |
第五节 部分差异蛋白的 Western验证 | 第47-55页 |
1 相关试剂 | 第47-48页 |
2 实验方法 | 第48页 |
3 结果与讨论 | 第48-55页 |
第四章 角质细胞特异性 Smad4条件基因剔除诱发小鼠皮肤肿瘤的差异蛋白质组分析 | 第55-64页 |
第一节 实验分组、实验设计和2-DE DIGE分析 | 第55页 |
1 材料与仪器 | 第55页 |
2 实验分组、实验设计与实验方法 | 第55页 |
·实验分组 | 第55页 |
·2-DE DIGE实验设计 | 第55页 |
·实验方法 | 第55页 |
第二节 图像分析 | 第55-56页 |
第三节 差异蛋白质的鉴定 | 第56-57页 |
1 材料与仪器 | 第56页 |
2 实验方法 | 第56页 |
3 结果与讨论 | 第56-57页 |
第四节 差异蛋白质的功能分析 | 第57页 |
第五节 部分差异蛋白的Western验证 | 第57-64页 |
1 相关试剂 | 第57页 |
2 实验方法 | 第57页 |
3 结果与讨论 | 第57-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第69-70页 |
综述 | 第70-73页 |
致谢 | 第73页 |