摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
1 绪论 | 第7-21页 |
1.1 烟草介绍 | 第7页 |
1.2 PCD研究进展 | 第7-17页 |
1.2.1 细胞程序性死亡与细胞坏死 | 第7-9页 |
1.2.2 植物PCD的一般特征 | 第9-11页 |
1.2.3 植物PCD的功能 | 第11-17页 |
1.3 PCD的检测方法 | 第17-18页 |
1.3.1 形态学观察 | 第17页 |
1.3.2 DNA ladder检测 | 第17页 |
1.3.3 原位末端标记(TUNEL) | 第17-18页 |
1.3.4 彗星电泳法 | 第18页 |
1.3.5 酶联免疫法(ELISA) | 第18页 |
1.3.6 mRNA水平的检测 | 第18页 |
1.4 PCD的相关基因 | 第18-19页 |
1.5 Beclin-1基因的研究进展 | 第19-20页 |
1.6 课题研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.1 实验材料的选择 | 第21页 |
2.1.2 实验材料时期划分 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-32页 |
2.2.1 实验药品及试剂 | 第21-22页 |
2.2.2 主要仪器 | 第22-23页 |
2.2.3 RNA的提取 | 第23页 |
2.2.4 cDNA的制备 | 第23-24页 |
2.2.5 RT-PCR的制备 | 第24页 |
2.2.6 PCR产物的回收 | 第24-25页 |
2.2.7 基因的克隆 | 第25-27页 |
2.2.8 测序 | 第27页 |
2.2.9 Northern杂交 | 第27-31页 |
2.2.10 DNA的提取 | 第31页 |
2.2.11 DNA ladder检测 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-37页 |
3.1 RNA的提取电泳检测结果 | 第32-34页 |
3.1.1 RT-PCR电泳结果及分析 | 第32-33页 |
3.1.2 载体pMD18-T的双酶切图谱分析 | 第33-34页 |
3.2 类Beclin-1基因序列分析 | 第34-35页 |
3.2.1 类Beclin-1基因的cDNA序列分析 | 第34页 |
3.2.2 类Beclin-1蛋白序列 | 第34-35页 |
3.2.3 同源性比较 | 第35页 |
3.3 Northern杂交分析 | 第35-36页 |
3.4 DNA提取电泳检测结果及分析 | 第36-37页 |
4 结论 | 第37-42页 |
4.1 PCD在植物中的发生与Beclin-1基因 | 第37-40页 |
4.1.1 植物PCD发生的三个阶段 | 第37-39页 |
4.1.2 Beclin-1基因 | 第39-40页 |
4.2 烟草花蕾的发育阶段中伴随PCD的发生 | 第40-42页 |
总结 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
附录 | 第49-53页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
致谢 | 第54页 |