第一章 前言 | 第1-15页 |
1 AP2/EREBP 转录调控因子超家族 | 第7-9页 |
2 AP2 亚家族的研究进展 | 第9-11页 |
3 研究蛋白质与DNA 相互作用的方法 | 第11-13页 |
4 实验目的及其意义 | 第13-15页 |
第二章 实验仪器及试剂 | 第15-22页 |
1 实验仪器 | 第15-16页 |
2 实验试剂与溶液的配制 | 第16-22页 |
(1) 常用大肠杆菌培养基的配制 | 第16页 |
(2) 常用缓冲液配制 | 第16-19页 |
(3) 酶与Markers | 第19-20页 |
(4) 其它试剂 | 第20页 |
(5) 菌株和质粒 | 第20页 |
(6) PCR 引物合成及其他寡聚核苷酸的合成 | 第20-22页 |
第三章 实验方法及流程 | 第22-31页 |
1 重组质粒的构建 | 第22-23页 |
2 聚合酶链式反应(PCR) | 第23页 |
3 限制性核酸内切酶反应条件 | 第23-24页 |
4 目的DNA的回收纯化 | 第24页 |
5 目的DNA片段与载体DNA片段的连接 | 第24页 |
6 感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
7 转化 | 第25页 |
8 重组质粒的提取 | 第25-26页 |
9 重组质粒的筛选 | 第26页 |
10 筛选的重组质粒的测序 | 第26页 |
11 重组质粒的表达及蛋白质纯化 | 第26-27页 |
12 DNA 结合位点的体外筛选 | 第27-31页 |
(1) SELEX 体外筛选 | 第27-29页 |
(2) 膜过滤结合分析法(Filter binding assay) | 第29-30页 |
(3) 凝胶阻滞电泳分析(EMSA) | 第30-31页 |
第四章 实验结果及讨论 | 第31-45页 |
1 质粒构建 | 第31-33页 |
2 蛋白质表达及纯化 | 第33-35页 |
3 SELEX 筛选 | 第35-45页 |
第五章 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
中文摘要 | 第51-53页 |
英文摘要 | 第53-55页 |
附录 | 第55-57页 |
缩略表 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
导师简介 | 第59页 |