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转录因子AINTEGUMENTA特异性识别的DNA基序筛选

第一章 前言第1-15页
 1 AP2/EREBP 转录调控因子超家族第7-9页
 2 AP2 亚家族的研究进展第9-11页
 3 研究蛋白质与DNA 相互作用的方法第11-13页
 4 实验目的及其意义第13-15页
第二章 实验仪器及试剂第15-22页
 1 实验仪器第15-16页
 2 实验试剂与溶液的配制第16-22页
  (1) 常用大肠杆菌培养基的配制第16页
  (2) 常用缓冲液配制第16-19页
  (3) 酶与Markers第19-20页
  (4) 其它试剂第20页
  (5) 菌株和质粒第20页
  (6) PCR 引物合成及其他寡聚核苷酸的合成第20-22页
第三章 实验方法及流程第22-31页
 1 重组质粒的构建第22-23页
 2 聚合酶链式反应(PCR)第23页
 3 限制性核酸内切酶反应条件第23-24页
 4 目的DNA的回收纯化第24页
 5 目的DNA片段与载体DNA片段的连接第24页
 6 感受态细胞的制备第24-25页
 7 转化第25页
 8 重组质粒的提取第25-26页
 9 重组质粒的筛选第26页
 10 筛选的重组质粒的测序第26页
 11 重组质粒的表达及蛋白质纯化第26-27页
 12 DNA 结合位点的体外筛选第27-31页
  (1) SELEX 体外筛选第27-29页
  (2) 膜过滤结合分析法(Filter binding assay)第29-30页
  (3) 凝胶阻滞电泳分析(EMSA)第30-31页
第四章 实验结果及讨论第31-45页
 1 质粒构建第31-33页
 2 蛋白质表达及纯化第33-35页
 3 SELEX 筛选第35-45页
第五章 讨论第45-47页
参考文献第47-51页
中文摘要第51-53页
英文摘要第53-55页
附录第55-57页
缩略表第57-58页
致谢第58-59页
导师简介第59页

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