中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-7页 |
引言 | 第7-12页 |
一、嗅鞘细胞的形态及生理特性 | 第7-8页 |
二、嗅鞘细胞促进神经再生作用的机理 | 第8-12页 |
(一) OECs 的神经营养作用 | 第8页 |
(二) OECs 膜表面粘附分子的作用 | 第8-9页 |
(三) OECs 的成鞘作用 | 第9页 |
(四) OECs 具有迁移性且抑制胶质增生 | 第9-12页 |
材料和方法 | 第12-20页 |
一、实验材料 | 第12-14页 |
(一) 动物材料 | 第12页 |
(二) 主要试剂 | 第12-13页 |
(三) 主要实验仪器 | 第13-14页 |
(四) 常用试剂配制 | 第14页 |
二、实验方法 | 第14-20页 |
(一) 小鼠嗅球总 RNA 的提取 | 第14-15页 |
(二) cDNA 第一链的合成 | 第15-16页 |
(三) LD-PCR 法合成双链cDNA | 第16页 |
(四) 双链cDNA 的蛋白酶 K 消化 | 第16页 |
(五) 双链cDNA 的 Sfi Ⅰ消化 | 第16-17页 |
(六) CHROMA SPIN-400 柱分离小片段cDNA | 第17页 |
(七) cDNA 与λTripl Ex2 噬菌体载体的连接 | 第17页 |
(八) 体外包装 | 第17-18页 |
(九) E.coli XL1-Blue 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第18页 |
(十) 滴定原始文库的滴度 | 第18页 |
(十一) 测定文库的重组率 | 第18页 |
(十二) cDNA 文库的扩增 | 第18-19页 |
(十三) 重组噬菌体的 PCR 鉴定 | 第19-20页 |
结果与分析 | 第20-23页 |
一、小鼠嗅球总 RNA 的提取 | 第20页 |
二、cDNA 的合成 | 第20-21页 |
三、cDNA 的酶切、过柱分离的电泳鉴定 | 第21页 |
四、cDNA 文库的滴度及重组率 | 第21-22页 |
五、扩增文库的滴定 | 第22页 |
六、重组噬菌体的 PCR 鉴定 | 第22-23页 |
讨论 | 第23-26页 |
一、高质量的 RNA 是构建cDNA 文库的关键 | 第23页 |
二、文库的代表性 | 第23页 |
三、重组cDNA 片段的序列完整性 | 第23-24页 |
四、cDNA 量与载体的比例 | 第24页 |
五、高质量的cDNA 文库应主要由全长cDNA 组成 | 第24-26页 |
结论 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |