| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| ·脂肪酸研究进展 | 第11-19页 |
| ·脂肪酸分类 | 第11页 |
| ·多不饱和脂肪酸 | 第11-12页 |
| ·ω-3 多不饱和脂肪酸 | 第12-15页 |
| ·多不饱和脂肪酸的合成 | 第15-18页 |
| ·重要的多不饱和脂肪酸—α-亚麻酸 | 第18-19页 |
| ·线虫ω-3 脂肪酸脱氢酶研究进展 | 第19-20页 |
| ·线虫简介 | 第19-20页 |
| ·线虫fat-1 基因研究进展 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 线虫fat-1 基因ORF 序列的克隆 | 第22-30页 |
| ·材料和方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·线虫的收集 | 第23页 |
| ·线虫总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第24页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第24页 |
| ·目的基因的纯化 | 第24-25页 |
| ·E. coli DH10B 电转化感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·目的基因的连接和转化 | 第25-26页 |
| ·克隆产物的鉴定 | 第26页 |
| ·目的基因的核苷酸序列测定 | 第26页 |
| ·菌种的保存 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-28页 |
| ·线虫总RNA 的提取 | 第26页 |
| ·线虫fat-1 基因CDS 全长的克隆 | 第26-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 fat-1 基因的原核表达、纯化及其抗体的制备 | 第30-42页 |
| ·材料和方法 | 第30-36页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-36页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第31-34页 |
| ·融合蛋白的诱导表达与分析 | 第34-35页 |
| ·表达蛋白的可溶性分析 | 第35页 |
| ·谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白 | 第35-36页 |
| ·纯化蛋白的浓度测定 | 第36页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第36页 |
| ·抗体效价的测定 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第36-39页 |
| ·fat-1 基因N 端序列的扩增 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的构建示意图 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的菌落PCR 和酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39页 |
| ·融合蛋白GST-fat1-N 的纯化 | 第39-40页 |
| ·抗体效价的测定 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 fat-1 基因在HEK293T 细胞中的表达 | 第42-54页 |
| ·材料和方法 | 第42-46页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·HEK293T 细胞的培养 | 第44-45页 |
| ·HEK293T 细胞的转染 | 第45页 |
| ·免疫印迹（Western Blotting）程序 | 第45页 |
| ·脂肪酸的提取与分析 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-52页 |
| ·真核表达质粒的构建及鉴定 | 第46-49页 |
| ·fat-1 基因的扩增 | 第46页 |
| ·重组质粒的构建示意图 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的菌落PCR 和酶切鉴定 | 第47-49页 |
| ·绿色荧光蛋白的观察 | 第49-50页 |
| ·RNA 分析 | 第50页 |
| ·Western Blotting 分析 | 第50-51页 |
| ·脂肪酸的提取及GC/MS 分析 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简介 | 第62页 |
