中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1. 文献综述 | 第9-20页 |
·NAC转录因子的介绍 | 第9-11页 |
·转录因子的概念 | 第9-10页 |
·NAC转录因子的基本特征 | 第10页 |
·NAC转录因子的生物学功能 | 第10-11页 |
·小麦转基因技术 | 第11-14页 |
·基因枪注射法 | 第12-13页 |
·农杆菌介导法 | 第13页 |
·花粉管通道法 | 第13-14页 |
·在获得NAC转基因小麦的过程中所存在的问题 | 第14-15页 |
·小麦转基因技术存在的主要问题 | 第14-15页 |
·NAC转录因子存在的问题 | 第15页 |
·染色体步移 | 第15-18页 |
·染色体步移的分类 | 第15-16页 |
·TAIL—PCR技术的原理 | 第16-18页 |
·TAIL—PCR技术的研究进展 | 第18页 |
·本研究的目的意义 | 第18-20页 |
2. 实验材料 | 第20-22页 |
·植物材料 | 第20页 |
·质粒 | 第20-22页 |
3. 实验方法 | 第22-39页 |
·培养基的制备 | 第22-25页 |
·诱导培养基(induce media) | 第24页 |
·分化培养基(differeneial media) | 第24页 |
·用于大肠杆菌培养的LB培养基 | 第24-25页 |
·小麦组织培养体系中基因型的筛选 | 第25页 |
·愈伤组织的诱导及分化 | 第25页 |
·小麦再生植株的移栽 | 第25页 |
·数据统计和处理 | 第25页 |
·NAC转基因小麦的获得 | 第25-35页 |
·表达载体的构建 | 第25-31页 |
·基因枪法获得转基因小麦 | 第31-34页 |
·小麦转基因植株的PCR检测 | 第34-35页 |
·NAC基因插入小麦染色体位点的初步研究 | 第35-39页 |
·植物总DNA的提取:(小麦总DNA提取) | 第35页 |
·TAIL—PCR的引物设计 | 第35-36页 |
·TAIL—PCR产物的获得 | 第36-38页 |
·TAIL—PCR产物的序列分析 | 第38-39页 |
4. 结果与分析 | 第39-49页 |
·小麦组织培养体系中基因型的筛选 | 第39-41页 |
·基因型对于诱导小麦幼胚的愈伤组织的影响 | 第39页 |
·基因型对于小麦幼胚的愈伤组织的分化和再生的影响 | 第39-40页 |
·出愈率、分化率以及出苗率的相关性研究 | 第40-41页 |
·PBI121-NAC-43表达载体的构建 | 第41-43页 |
·目的基因NAC-43的获得和改造 | 第41页 |
·PBI121-NAC-43的双酶切 | 第41-42页 |
·NAC-43与PBI121的连接鉴定 | 第42-43页 |
·转基因植株的获得 | 第43-44页 |
·转基因小麦农艺性状 | 第44-45页 |
·TAIL—PCR产物的分析 | 第45-49页 |
·TAIL—PCR产物的电泳分析 | 第47页 |
·TAIL—PCR产物的序列分析 | 第47-48页 |
·第二、三次反应模板稀释倍数的比较研究 | 第48页 |
·特异引物与简并引物加入量的比较研究 | 第48-49页 |
5 讨论与结论 | 第49-53页 |
·小麦组织培养外植体的选择 | 第49页 |
·小麦基因型的局限 | 第49页 |
·金粉及DNA用量 | 第49-50页 |
·高渗处理对基因枪转化的影响 | 第50页 |
·选择剂种类的选择 | 第50-51页 |
·选择剂的浓度以及筛选时间的选择 | 第51页 |
·TAIL—PCR反应条件的选择 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-73页 |