中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
缩略词 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
·生物体内的活性氧与清除活性氧系统 | 第11-21页 |
·活性氧的种类 | 第11页 |
·活性氧的生理作用 | 第11-13页 |
·活性氧产生的主要部位 | 第13-15页 |
·植物中的ROS清除酶系统 | 第15-18页 |
·酵母中的NADPH代谢 | 第18页 |
·细菌中的NADPH代谢 | 第18-21页 |
·NAD(H)激酶的发现、种类与分布 | 第21-22页 |
·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 拟南芥NADK激酶CDNA克隆及其表达分析 | 第23-30页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-26页 |
·NADK激酶同源序列的搜索 | 第24页 |
·NADK2,NADK3基因编码区的RT-PCR扩增及克隆 | 第24-26页 |
·结果与分析 | 第26-30页 |
·NADK基因的搜索及序列克隆 | 第26-27页 |
·NADK基因的组织表达特性 | 第27-28页 |
·NADK3基因在胁迫条件下的的表达特性 | 第28-30页 |
第三章 NADK基因的亚细胞定位 | 第30-34页 |
·材料与方法 | 第30-31页 |
·实验材料 | 第30页 |
·实验所需试剂配制 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31-34页 |
·NADK-GFP融合基因的载体构建 | 第31-32页 |
·NADK2-GFP融合蛋白的瞬时表达 | 第32-34页 |
第四章 拟南芥NAD(H)激酶基因突变体抗逆性分析 | 第34-53页 |
·材料 | 第34-36页 |
·植物材料及胁迫处理 | 第34页 |
·工程菌与质粒载体 | 第34页 |
·试剂盒,杂交膜及放射性同位素 | 第34-35页 |
·常用培养基 | 第35页 |
·基因组DNA提取 | 第35-36页 |
·Southern杂交 | 第36页 |
·方法 | 第36-41页 |
·NADK2,3突变体的鉴定 | 第36页 |
·真核表达载体pCAMBtA 1391-NADK3构建与鉴定 | 第36-37页 |
·Southem blot分析 | 第37页 |
·农杆菌的转化 | 第37-38页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化(真空渗入法) | 第38-39页 |
·转基因拟南芥的鉴定 | 第39页 |
·叶绿素的提取 | 第39页 |
·NADPH含量测定 | 第39页 |
·叶绿素中间代谢物的测定 | 第39页 |
·RT-PCR分析下游基因的表达差异 | 第39-41页 |
·胁迫处理 | 第41页 |
·电子显微镜观察 | 第41页 |
·气孔的测量 | 第41页 |
·拟南芥NADK2突变体结果与分析 | 第41-49页 |
·拟南芥NADK2突变体的鉴定 | 第41-43页 |
·NADK2突变体叶绿素合成减少 | 第43-46页 |
·NADK2突变体对环境胁迫敏感 | 第46-49页 |
·拟南芥NADK3突变体结果与分析 | 第49-53页 |
·拟南芥NADK3突变体的表型分析 | 第49-50页 |
·拟南芥NADK3突变体的萌发率试验 | 第50-51页 |
·拟南芥NADK3突变体的ABA抑制剂试验 | 第51页 |
·拟南芥NADK3突变体中胁迫基因的表达 | 第51-53页 |
第五章 讨论 | 第53-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |