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拟南芥NAD(H)激酶在非生物胁迫中的功能分析

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
缩略词第9-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·生物体内的活性氧与清除活性氧系统第11-21页
     ·活性氧的种类第11页
     ·活性氧的生理作用第11-13页
     ·活性氧产生的主要部位第13-15页
     ·植物中的ROS清除酶系统第15-18页
     ·酵母中的NADPH代谢第18页
     ·细菌中的NADPH代谢第18-21页
   ·NAD(H)激酶的发现、种类与分布第21-22页
   ·本研究的目的与意义第22-23页
第二章 拟南芥NADK激酶CDNA克隆及其表达分析第23-30页
   ·实验材料第23-24页
   ·实验方法第24-26页
     ·NADK激酶同源序列的搜索第24页
     ·NADK2,NADK3基因编码区的RT-PCR扩增及克隆第24-26页
   ·结果与分析第26-30页
     ·NADK基因的搜索及序列克隆第26-27页
     ·NADK基因的组织表达特性第27-28页
     ·NADK3基因在胁迫条件下的的表达特性第28-30页
第三章 NADK基因的亚细胞定位第30-34页
   ·材料与方法第30-31页
     ·实验材料第30页
     ·实验所需试剂配制第30页
     ·实验方法第30-31页
   ·结果与分析第31-34页
       ·NADK-GFP融合基因的载体构建第31-32页
     ·NADK2-GFP融合蛋白的瞬时表达第32-34页
第四章 拟南芥NAD(H)激酶基因突变体抗逆性分析第34-53页
   ·材料第34-36页
     ·植物材料及胁迫处理第34页
     ·工程菌与质粒载体第34页
     ·试剂盒,杂交膜及放射性同位素第34-35页
     ·常用培养基第35页
     ·基因组DNA提取第35-36页
     ·Southern杂交第36页
     ·方法第36-41页
     ·NADK2,3突变体的鉴定第36页
     ·真核表达载体pCAMBtA 1391-NADK3构建与鉴定第36-37页
     ·Southem blot分析第37页
     ·农杆菌的转化第37-38页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化(真空渗入法)第38-39页
     ·转基因拟南芥的鉴定第39页
     ·叶绿素的提取第39页
     ·NADPH含量测定第39页
     ·叶绿素中间代谢物的测定第39页
     ·RT-PCR分析下游基因的表达差异第39-41页
     ·胁迫处理第41页
     ·电子显微镜观察第41页
     ·气孔的测量第41页
   ·拟南芥NADK2突变体结果与分析第41-49页
     ·拟南芥NADK2突变体的鉴定第41-43页
     ·NADK2突变体叶绿素合成减少第43-46页
     ·NADK2突变体对环境胁迫敏感第46-49页
   ·拟南芥NADK3突变体结果与分析第49-53页
     ·拟南芥NADK3突变体的表型分析第49-50页
     ·拟南芥NADK3突变体的萌发率试验第50-51页
     ·拟南芥NADK3突变体的ABA抑制剂试验第51页
     ·拟南芥NADK3突变体中胁迫基因的表达第51-53页
第五章 讨论第53-55页
结论第55-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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