| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| 1. 游离小孢子培养的研究进展 | 第10-11页 |
| 2. 原生质体培养研究进展 | 第11-16页 |
| ·植物原生质体培养研究进展 | 第11-13页 |
| ·禾本科植物原生质体培养研究进展 | 第13-16页 |
| 3. 小麦花药培养研究进展 | 第16-18页 |
| 4. 小麦遗传转化研究进展 | 第18-23页 |
| ·细胞融合法 | 第19页 |
| ·载体介导法 | 第19-20页 |
| ·直接导入法 | 第20-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-31页 |
| 1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2 试验材料的获得与处理 | 第24页 |
| ·低温预处理 | 第24页 |
| 3 小麦花粉的分离 | 第24-25页 |
| ·磁力搅拌器法 | 第24页 |
| ·挤压法 | 第24-25页 |
| ·漂浮释放法 | 第25页 |
| 4. 游离小孢子的培养 | 第25-26页 |
| ·幼穗的选取 | 第25页 |
| ·幼穗的预处理 | 第25页 |
| ·幼穗的消毒 | 第25页 |
| ·花药的接种 | 第25页 |
| ·花粉的分离 | 第25-26页 |
| ·花粉的培养 | 第26页 |
| ·培养基的组成 | 第26页 |
| ·统计方法 | 第26页 |
| 5. 游离小孢子的活性检测 | 第26页 |
| 6. 酶解小孢子细胞壁 | 第26-27页 |
| ·酶溶液的配制 | 第26-27页 |
| ·酶溶液时提取到的小孢子的处理 | 第27页 |
| ·酶解处理后的细胞壁厚度荧光染色观察 | 第27页 |
| ·最佳酶解组合的筛选 | 第27页 |
| 7. 外源DNA 的提取 | 第27-29页 |
| ·所需的药品试剂 | 第27-28页 |
| ·试验仪器及设备 | 第28页 |
| ·提取外源DNA 的步骤 | 第28-29页 |
| 8. DNA 的浓度测定与调整方法(紫外分光光度计法) | 第29页 |
| 9. 外源DNA 电击转化操作 | 第29-30页 |
| ·电击缓冲液的配制 | 第29页 |
| ·电击转化操作步聚 | 第29-30页 |
| 10. 外源DNA 类物质导入率的荧光显微镜检测 | 第30页 |
| 11. 试验数据分析方法 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-46页 |
| 1. 影响小麦游离小孢子活性的因素 | 第31-34页 |
| ·低温预处理天数对游离小孢子活性的影响 | 第31页 |
| ·热激处理温度对游离子孢子活性的影响 | 第31-32页 |
| ·热激处理天数对小麦游离小孢子活性的影响 | 第32-33页 |
| ·花药接种密度对小麦游离小孢子活性的影响 | 第33页 |
| ·培养基中的碳原对小麦游离小孢子活力的影响 | 第33-34页 |
| ·小麦游离小孢子提取方法的筛选 | 第34页 |
| 2 影响小麦游离小孢子半原生质体分离的因素 | 第34-38页 |
| ·不同温度处理对小孢子细胞壁平均厚度的影响 | 第34-35页 |
| ·不同酶浓度处理对小孢子细胞壁平均厚度的影响 | 第35-36页 |
| ·不同酶解时间处理对带壁小孢子细胞壁平均厚度的影响 | 第36页 |
| ·最佳酶解处理参数组合的筛选 | 第36-37页 |
| ·花粉提取缓冲液中的碳源及pH 值对半原生质体分离的影响 | 第37页 |
| ·荧光增白剂对小麦小孢子细胞壁的染色效果 | 第37页 |
| ·酶浓度,处理温度及时间在小孢子半原生质体分离中的相互作用 | 第37-38页 |
| 3. 影响小麦游离小孢子培养的因素 | 第38-42页 |
| ·培养基附加成份对提高小麦花粉诱导率的影响 | 第38-39页 |
| ·低温预处理对愈伤组织数的影响 | 第39-40页 |
| ·接种密度对大于2mm 的愈伤组织比率的影响 | 第40页 |
| ·培养温度对于大于2mm 的愈伤组织比率的影响 | 第40-41页 |
| ·不同小麦及小黑麦品种的基因型对培养结果的影响 | 第41-42页 |
| ·培养基中青霉素浓度对小孢子培养的影响 | 第42页 |
| 4. 采用正交设计对电击转化参数组合进行优化 | 第42-46页 |
| ·电击参数正交试验结果分析 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-52页 |
| 1. 影响小麦小孢子分离后的活性的因素 | 第46-47页 |
| 2. 影响小麦游离小孢子半原生质体分离的因素 | 第47-48页 |
| 3. 影响小麦及小黑麦游离小孢子愈伤组织诱导的因素 | 第48-49页 |
| 4. 影响电击参数正并试验结果的因素 | 第49-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 图版Ⅰ | 第59-60页 |
| 图版Ⅱ | 第60-61页 |
| 图版Ⅲ | 第61-62页 |
| 图版说明 | 第62-63页 |
| 导师简介 | 第63-64页 |
| 个人简介 | 第64-65页 |
| 独创性声明 | 第65页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第65页 |
