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盾叶薯蓣类原球茎的发育及其相关基因差异表达的研究

第一章 前言第1-33页
 1. 薯蓣属植物的研究现状及存在的问题第16-22页
 2. 植物原球茎(类原球茎)的研究概况第22-26页
  2.1 原球茎(类原球茎)的定义第23页
  2.2 类原球茎的形态发生及其意义第23-26页
 3. 类原球茎发生发育的相关研究第26-32页
  3.1 植物离体形态建成的生化基础研究第26-27页
  3.2 植物生长物质与原球茎及其他变态器官发育的关系第27-32页
 4. 本项研究的立题目的和意义第32-33页
第二章 盾叶薯蓣类原球茎的离体诱导及再生体系的建立第33-47页
 1. 材料与方法第33-35页
  1.1 材料第33页
  1.2 方法第33-35页
   1.2.2 愈伤组织的诱导和增殖第33-34页
   1.2.3 类原球茎的分化与增殖第34页
   1.2.4 类原球茎的个体生长第34页
   1.2.5 类原球茎的生根第34-35页
   1.2.6 类原球茎植株的炼苗与移栽第35页
 2. 结果与分析第35-43页
  2.1 不同外植体在不同激素配比的培养基上培养的比较第35-36页
  2.2 不同激素浓度组合对致密愈伤组织形成的影响第36页
  2.3 不同激素浓度组合对诱导类原球茎的影响第36-38页
  2.4 类原球茎在分化增殖培养基上的生长第38页
  2.5 不同因素组合对类原球茎生根的影响第38-40页
  2.6 类原球茎植株的炼苗与移栽第40-42页
  2.7 盾叶薯蓣类原球茎微繁殖技术程序第42-43页
 3. 讨论第43-47页
  3.1 正交设计试验方法在类原球茎离体诱导中的应用第43页
  3.2 外植体类型与愈伤组织诱导及类原球茎分化的关系第43-44页
  3.3 6-BA和2,4-D在愈伤组织诱导中的作用第44页
  3.4 6-BA、KT和蔗糖对类原球茎诱导的影响第44-45页
  3.5 类原球茎生根培养中各因素的影响第45页
  3.6 盾叶薯蓣类原球茎的应用前景第45-47页
第三章 盾叶薯蓣类原球茎发育解剖学及薯蓣皂苷组织化学定位的比较研究第47-57页
 1. 材料与方法第47-48页
  1.1 材料第47页
  1.2 实验方法第47-48页
   1.2.1 石蜡切片与显微观察第47页
   1.2.2 扫描电镜制片与观察第47页
   1.2.3 超薄切片及透射电镜观察第47-48页
   1.2.4 组织化学法鉴定薯蓣皂苷第48页
 2. 结果与分析第48-53页
  2.1 盾叶薯蓣类原球茎的发育解剖学研究第48-52页
   2.1.1 类原球茎的结构第48-49页
   2.1.2 从愈伤组织诱导类原球茎的组织学研究第49页
   2.1.3 类原球茎初生结构的分化第49-51页
   2.1.4 类原球茎的扫描电镜结构第51页
   2.1.5 盾叶薯蓣类原球茎超微结构观察第51-52页
  2.2 盾叶薯蓣愈伤组织不定芽再生的发育解剖学研究第52页
   2.2.1 不定芽的发生第52页
   2.2.2 不定根的发生第52页
  2.3 盾叶薯蓣愈伤组织、类原球茎、叶腋基部膨大球体的组织化学比较研究第52-53页
   2.3.1 愈伤组织组织化学第52-53页
   2.3.2 类原球茎组织化学第53页
   2.3.3 盾叶薯蓣植株藤蔓部分叶腋处膨大球体的组织化学第53页
 3. 讨论第53-57页
  3.1 盾叶薯蓣类原球茎与不定芽的形态发生及发育第53-54页
  3.2 盾叶薯蓣类原球茎的发育与初生加厚分生组织(PTM)的关系第54-55页
  3.3 盾叶薯蓣繁殖体的薯预皂苷组织化学定位第55-57页
第四章 盾叶薯蓣类原球茎发生发育的生化特性研究第57-68页
 1 材料与方法第57-60页
  1.1 材料第57页
  1.2 方法第57-60页
   1.2.1 材料预处理第57-58页
   1.2.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第58页
   1.2.3 过氧化物酶(POD)同工酶电泳及活性的测定第58页
   1.2.4 过氧化氢酶(CAT)活性的测定第58页
   1.2.5 淀粉酶(AMY)同工酶电泳及活性的测定第58-59页
   1.2.6 可溶性蛋白质含量的测定第59页
   1.2.7 蛋白双向电泳第59-60页
 2 结果与分析第60-64页
  2.1 类原球茎发生发育的可溶性蛋白质含量变化第60页
  2.2 类原球茎发生发育的超氧化物歧化酶(SOD)活性变化第60-61页
  2.3 类原球茎发生发育的过氧化物酶(POD)活性的变化第61页
  2.4 类原球茎发生发育的过氧化氢酶(CAT)活性变化第61页
  2.5 类原球茎发生发育的淀粉酶(AMY)活性变化第61-62页
  2.6 过氧化物酶同工酶电泳分析第62页
  2.7 淀粉酶同工酶电泳分析第62-64页
  2.8 类原球茎发生的蛋白质双向电泳(2-DE)分析第64页
 3 讨论第64-68页
  3.1 梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与单一凝胶电泳的比较第64-65页
  3.2 抗氧化酶(AOEs)与类原球茎形成及发育的关系第65-66页
  3.3 类原球茎形成及发育与淀粉酶(AMY)的关系第66-67页
  3.4 可溶性蛋白含量及蛋白质的表达与类原球茎形成及发育的关系第67-68页
第五章 盾叶薯蓣类原球茎的发生发育与植物生长物质的关系第68-78页
 1 材料与方法第68-70页
  1.1 材料第68页
  1.2 方法第68-70页
   1.2.1 主要仪器和试剂第68-69页
   1.2.2 内源激素的提取和HPLC测定第69页
   1.2.3 多胺的提取和 HPLC测定第69-70页
 2 结果与分析第70-74页
  2.1 激素测定的HPLC色谱第70-71页
  2.2 多胺测定的HPLC色谱第71页
  2.3 盾叶薯蓣类原球茎发育过程中赤霉素(GA_3)含量的变化第71-72页
  2.4 盾叶薯蓣类原球茎发育过程中细胞分裂素(CTKs)含量的变化第72-73页
  2.5 盾叶薯蓣类原球茎发育过程中吲哚乙酸(IAA)含量的变化第73页
  2.6 盾叶薯蓣类原球茎发育过程中脱落酸(ABA)含量的变化第73-74页
  2.7 盾叶薯蓣原球茎发育过程中多胺(PAs)含量的变化第74页
 3 讨论第74-78页
  3.1 植物激素的变化与盾叶薯蓣类原球茎发生和发育的关系第74-76页
  3.2 多胺的变化与盾叶薯蓣类原球茎发育的关系第76-78页
第六章 盾叶薯蓣类原球茎发育的mRNA荧光差异显示第78-101页
 1. 材料第78-79页
  1.1 植物材料第78页
  1.2 主要试剂及仪器第78-79页
   1.2.1 试剂第78-79页
   1.2.2 仪器第79页
 2 实验方法第79-86页
  2.1 总RNA的提取及检测第79-80页
   2.1.1 实验器皿的处理第79页
   2.1.2 总 RNA抽提步骤第79-80页
   2.1.3 RNA质量和浓度的检测第80页
  2.2 荧光mRNA差异显示(FDD)第80-86页
   2.3.1 逆转录反应第80-81页
   2.3.2 逆转录荧光多聚酶链式反应(fluoroDD-PCR反应)第81页
   2.3.3 聚丙烯酰胺变性凝胶电泳分离差异片断第81-82页
   2.3.4 差异表达基因片段的回收及重扩增第82-83页
   2.3.5 反Northern杂交筛选差异cDNA片段第83页
   2.3.6 阳性差异片断的克隆和测序第83-86页
 3 结果与分析第86-96页
  3.1 总 RNA的质量和浓度检测结果第86页
  3.2 mRNA差异条带的显示第86-87页
  3.3 回收片断的PCR重扩增第87-88页
  3.4 反向Northern杂交第88-89页
  3.5 重扩增产物的克隆及酶切鉴定第89-90页
  3.6 差异片断cDNA的测序及与已知基因的同源性比较第90-96页
 4. 讨论第96-101页
  4.1 荧光差异显示方法的特点第96-97页
  4.2 无同源序列的基因的功能预测第97页
  4.3 F-box蛋白家族与盾叶薯蓣类原球茎发育的关系第97-98页
  4.4 smHSPs蛋白与盾叶薯蓣类原球茎发育的关系第98页
  4.5 Caleosin蛋白与盾叶薯蓣类原球茎发育的关系第98-99页
  4.6 翻译起始因子(eIF3)的表达与盾叶薯蓣类原球茎发育的关系第99-101页
全文总结第101-104页
参考文献第104-116页
缩略词第116-117页
图版第117-131页
附录第131-132页
致谢第132-133页
作者简介第133-134页

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