第一章 绪论 | 第1-26页 |
第一节 新型微生物蛋白质农药 | 第10-22页 |
1 过敏蛋白HARPIN | 第10-16页 |
·HR和SAR | 第10-11页 |
·hrp基因簇 | 第11-12页 |
·hrp基因的生化功能 | 第12-13页 |
·Harpin蛋白的产生 | 第13页 |
·Harpin蛋白结构与特点 | 第13-14页 |
·Harpin蛋白的生物学功能 | 第14-15页 |
·Harpin蛋白的应用 | 第15-16页 |
2 激发素ELICITINS | 第16-19页 |
·Elicitins蛋白 | 第16-17页 |
·Elicitins的基因结构 | 第17-18页 |
·Elicitins抗病基因工程 | 第18-19页 |
3 激活蛋白ACTIVATOR | 第19-22页 |
·激活蛋白研究概况 | 第19页 |
·激活蛋白的作用机理 | 第19-22页 |
第二节 应用GTEWAY技术构建CDNA文库 | 第22-26页 |
第二章 交链孢JH505菌株CDNA入门文库的构建 | 第26-42页 |
1 材料与方法 | 第26-36页 |
·材料 | 第26-27页 |
·实验菌株 | 第26页 |
·主要试剂、酶及载体 | 第26页 |
·主要实验仪器及耗材 | 第26页 |
·实验中主要溶液的配制 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-36页 |
·器皿的处理 | 第27页 |
·实验菌株的培养 | 第27页 |
·总RNA提取 | 第27-28页 |
·总RNA质量检测 | 第28页 |
·mRNA的纯化 | 第28-29页 |
·cDNA第一链合成 | 第29页 |
·cDNA第二链合成及连接attB1接头 | 第29-30页 |
·cDNA片段分级 | 第30-31页 |
·平板印迹实验检测cDNA的产量 | 第31-32页 |
·BP重组反应 | 第32页 |
·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第32-34页 |
·cDNA文库质量验证 | 第34-35页 |
·cDNA入门文库转变为cDNA文库 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-40页 |
·总RNA提取和mRNA纯化 | 第36页 |
·cDNA一链合成、二链合成及片段分级 | 第36-38页 |
·入门文库构建及文库质量平价 | 第38-39页 |
·构建表达文库及文库质量的评价 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
·应用Gteway技术构建cDNA文库的优点 | 第40-41页 |
·cDNA文库的构建对交链孢植物病原菌研究的作用 | 第41页 |
·cDNA文库的构建对植物激活蛋白研究的作用 | 第41-42页 |
第三章 编码植物激活蛋白基因的克隆 | 第42-52页 |
1 材料与方法 | 第42-45页 |
·材料 | 第42-43页 |
·植物激活蛋白抗血清 | 第42页 |
·主要试剂、酶等 | 第42页 |
·实验中主要溶液的配制 | 第42页 |
·实验中用到的主要仪器及耗材 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-45页 |
·从血清中去除交叉反应性抗体 | 第43页 |
·表达文库的免疫筛选 | 第43-44页 |
·编码植物激活蛋白基因的克隆及序列的分析 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-50页 |
·用免疫生色方法筛选区cDNA表达文库 | 第45-46页 |
·编码植物激活蛋白基因的克隆、测序及序列分析 | 第46-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
·文库的筛选 | 第50-51页 |
·编码激活蛋白基因的克隆 | 第51页 |
·基因的克隆意义 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62页 |
基本信息 | 第62页 |
学习经历 | 第62页 |
攻读硕士学位期间已投稿并接受的论文 | 第62页 |