| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-19页 |
| 1 植物胚胎发生基因调控的研究进展 | 第8-13页 |
| ·原胚期——极性建成 | 第8-9页 |
| ·球形胚-心形胚过渡期——区域形态建成 | 第9-10页 |
| ·器官形成与成熟期——分生组织形成及发育 | 第10-12页 |
| ·胚芽分生组织形成的基因调控 | 第11页 |
| ·胚根分生组织形成的基因调控 | 第11-12页 |
| ·胚分生组织发育成熟的基因调控 | 第12页 |
| ·小结 | 第12-13页 |
| 2 LEC1的研究 | 第13-15页 |
| 3 花粉管通道转基因技术 | 第15-17页 |
| ·转化机理的研究和探讨 | 第15-17页 |
| ·转化途径 | 第15-16页 |
| ·转化时期 | 第16页 |
| ·DNA重组 | 第16-17页 |
| ·小结 | 第17页 |
| 4 研究内容与目的 | 第17-19页 |
| 第二章 实验材料与试剂 | 第19-22页 |
| 1 材料 | 第19-20页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·菌种和载体 | 第19-20页 |
| 2 主要试剂 | 第20-22页 |
| ·酶类 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·试剂盒 | 第21页 |
| ·PCR引物 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·抗生素 | 第21-22页 |
| 第三章 研究方法 | 第22-34页 |
| 1 植物胚胎发生调控基因的克隆 | 第22-29页 |
| ·拟南芥LEC1基因的克隆 | 第22-28页 |
| ·拟南芥发育时期的观察 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·总RNA的分离 | 第22-23页 |
| ·cDNA的合成 | 第23页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的切胶回收纯化 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌Inv α F~-感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·PCR产物的连接与质粒转化 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
| ·菌落PCR检测 | 第26页 |
| ·强碱法小量提取质粒DNA | 第26-27页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第27页 |
| ·DNA测序及核苷酸序列生物信息学分析 | 第27-28页 |
| ·水稻LEC1基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·总DNA的提取 | 第28页 |
| ·目的片段的扩增 | 第28-29页 |
| ·目的片段的克隆 | 第29页 |
| ·DNA测序及核苷酸序列生物信息学分析 | 第29页 |
| 2 植物表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·克隆载体上目的基因的释放 | 第29-30页 |
| ·pWM101载体片段制备 | 第30-31页 |
| ·表达载体构建 | 第31页 |
| ·表达载体的检测 | 第31页 |
| 3 植物胚胎发生调控基因LEC1对水稻的遗传转化 | 第31-34页 |
| ·花粉管通道法转化水稻 | 第31-33页 |
| ·潮霉素抗性预实验 | 第33页 |
| ·转基因水稻的分析 | 第33-34页 |
| ·转基因水稻潮霉素筛选 | 第33页 |
| ·转基因水稻分子检测 | 第33-34页 |
| 第四章 实验结果与分析 | 第34-48页 |
| 1 植物胚胎发生调控基因的克隆 | 第34-41页 |
| ·拟南芥LEC1基因的克隆 | 第34-37页 |
| ·拟南芥发育时期的确定和取材 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·总RNA的分离 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第35页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第35页 |
| ·连接、转化 | 第35页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第35-36页 |
| ·菌落PCR检测 | 第35页 |
| ·酶切检测 | 第35-36页 |
| ·DNA测序及核苷酸序列生物信息学分析 | 第36-37页 |
| ·水稻LEC1基因的克隆 | 第37-41页 |
| ·引物设计 | 第37-38页 |
| ·水稻总DNA提取 | 第38页 |
| ·PCR扩增水稻LEC1基因 | 第38页 |
| ·连接、转化 | 第38页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第38-39页 |
| ·菌落PCR检测 | 第38-39页 |
| ·酶切检测 | 第39页 |
| ·DNA测序及核苷酸序列生物信息学分析 | 第39-41页 |
| ·小结 | 第41页 |
| 2 植物表达载体的构建 | 第41-44页 |
| ·LEC1片段的释放 | 第41页 |
| ·pWM101载体片段制备 | 第41页 |
| ·连接转化 | 第41页 |
| ·表达载体的检测 | 第41-44页 |
| ·菌落PCR检测 | 第41-42页 |
| ·酶切检测 | 第42-43页 |
| ·质粒PCR检测 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44页 |
| 3 植物胚胎发生调控基因LEC1对水稻的遗传转化 | 第44-48页 |
| ·花粉管通道法转化水稻 | 第44-45页 |
| ·潮霉素抗性预实验 | 第45-46页 |
| ·转基因水稻的分析 | 第46-47页 |
| ·转基因水稻潮霉素筛选 | 第46页 |
| ·转基因水稻分子检测 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第五章 分析与讨论 | 第48-51页 |
| 1 无融合生殖的研究与应用 | 第48-49页 |
| 2 转基因植株的筛选 | 第49页 |
| 3 转基因植株后代遗传性状的分析 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第56-58页 |
| 附录 | 第58-76页 |
| 附录A 拟南芥LEC1序列 | 第58-60页 |
| 附录B 拟南芥LEC1测序结果 | 第60-63页 |
| 附录C 拟南芥LEC1测序结果与NCBI中序列的比对 | 第63-65页 |
| 附录D 水稻LEC1基因 | 第65-68页 |
| 附录E 水稻LEC1测序结果 | 第68-71页 |
| 附录F 水稻LEC1测序结果与NCBI中序列的比对 | 第71-74页 |
| 附录G 水稻LEC1测序结果与拟南芥LEC1测序结果在NCBI中比对 | 第74-76页 |
| Blast 2 Sequences results | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
