| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-13页 |
| 1 前言 | 第13-36页 |
| ·天然植物病毒抑制物质 | 第14-30页 |
| ·植物病毒抑制物质的来源 | 第14-19页 |
| ·高等植物 | 第14-17页 |
| ·微生物及其培养物 | 第17-19页 |
| ·动物和藻类 | 第19页 |
| ·植物病毒抑制物质的有效成分 | 第19-25页 |
| ·抑制植物病毒的蛋白类物质 | 第19-24页 |
| ·抗植物病毒蛋白理化特性 | 第19-21页 |
| ·蛋白的抗病毒特性 | 第21-23页 |
| ·蛋白类植物病毒抑制物应用现状 | 第23-24页 |
| ·抑制植物病毒的糖类物质 | 第24-25页 |
| ·抑制植物病毒的小分子物质 | 第25页 |
| ·植物病毒抑制物质的作用机理 | 第25-30页 |
| ·抑制病毒侵染 | 第25-27页 |
| ·钝化病毒 | 第25-27页 |
| ·作用于病毒侵染位点 | 第27页 |
| ·抑制病毒复制 | 第27-28页 |
| ·诱导抗性 | 第28-29页 |
| ·防治病毒介体 | 第29-30页 |
| ·食用菌抗植物病毒活性物质研究进展 | 第30-32页 |
| ·蛋白类植物病毒抑制物质研究中存在的问题、展望 | 第32-35页 |
| ·本研究的目的 | 第35-36页 |
| 2 抗病毒蛋白的筛选、纯化和部分特性 | 第36-60页 |
| ·材料与方法 | 第36-44页 |
| ·供试材料 | 第36-37页 |
| ·供试食用菌 | 第36页 |
| ·供试寄主植物 | 第36页 |
| ·供试植物病毒 | 第36页 |
| ·主要仪器、层析介质 | 第36-37页 |
| ·供试生化试剂 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-44页 |
| ·食用菌抗病毒活性粗测 | 第37页 |
| ·烟草花叶病毒(TMV)的提纯 | 第37-38页 |
| ·毛头鬼伞中抗病毒蛋白的分离纯化 | 第38-39页 |
| ·榆黄蘑中抗病毒蛋白的分离纯化 | 第39页 |
| ·蛋白质分子量和纯度的测定 | 第39-41页 |
| ·蛋白质的定量 | 第41页 |
| ·蛋白质糖含量的测定 | 第41-42页 |
| ·蛋白质的质谱分析 | 第42页 |
| ·蛋白质的N-端氨基酸序列测定 | 第42页 |
| ·蛋白质的氨基酸组成分析 | 第42页 |
| ·抗血清的制备和特异性检测 | 第42-44页 |
| ·蛋白y3的菌丝体发酵及检测 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-57页 |
| ·烟草花叶病毒的提纯 | 第44页 |
| ·食用菌抗TMV活性粗测 | 第44-45页 |
| ·毛头鬼伞中蛋白y3的纯化 | 第45-47页 |
| ·榆黄蘑中抗病毒蛋白YP46-46的纯化 | 第47-48页 |
| ·蛋白y3的电泳分析和分子量测定 | 第48-50页 |
| ·蛋白YP46-46的SDS-PAGE分析 | 第50页 |
| ·蛋白y3和YP46-46糖含量的测定 | 第50-51页 |
| ·蛋白y3的MALDI-TOF质谱分析 | 第51-52页 |
| ·蛋白y3和YP46-46的N-端氨基酸序列测定 | 第52页 |
| ·蛋白y3和YP46-46的氨基酸组成分析 | 第52-54页 |
| ·蛋白y3和YP46-46的免疫原性 | 第54-55页 |
| ·菌丝体发酵及检测结果 | 第55-57页 |
| ·小结与讨论 | 第57-60页 |
| 3 抗病毒蛋白生物学活性 | 第60-84页 |
| ·材料与方法 | 第60-66页 |
| ·供试材料 | 第60-61页 |
| ·供试蛋白 | 第60页 |
| ·供试病毒、寄主及抗血清 | 第60页 |
| ·供试病原真菌和细菌 | 第60页 |
| ·供试血细胞及糖类 | 第60-61页 |
| ·供试肿瘤细胞 | 第61页 |
| ·供试仪器及试剂 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-66页 |
| ·抗病毒蛋白浓度的确定 | 第61页 |
| ·蛋白对病毒的侵染抑制率测定 | 第61页 |
| ·蛋白y3抑制病毒复制试验 | 第61-62页 |
| ·蛋白y3抑制TMV侵染特性 | 第62页 |
| ·蛋白y3对TMV侵染位点的影响测定 | 第62页 |
| ·蛋白y3对TMV粒体结构影响 | 第62-63页 |
| ·蛋白y3对TMV外壳蛋白的作用 | 第63-64页 |
| ·蛋白y3对烟草叶片叶绿素含量的影响 | 第64页 |
| ·抑菌活性测定方法 | 第64-65页 |
| ·血凝活性试验 | 第65页 |
| ·蛋白对肿瘤细胞的抑制作用测定 | 第65-66页 |
| ·蛋白y3对肿瘤细胞SPC-A_1的形态影响 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-79页 |
| ·蛋白y3的抗TMV活性测定结果 | 第66-68页 |
| ·蛋白y3对TMV复制的抑制效果 | 第68-69页 |
| ·不同温度下处理的蛋白y3对TMV的抑制效果 | 第69页 |
| ·不同pH下处理的蛋白y3对TMV的抑制效果 | 第69页 |
| ·蛋白y3对TMV侵染位点的影响 | 第69-70页 |
| ·蛋白y3对TMV粒体结构的影响 | 第70-71页 |
| ·蛋白y3对TMV外壳蛋白抗原位点的作用 | 第71-72页 |
| ·蛋白y3对TMV的体外脱衣壳作用 | 第72-73页 |
| ·蛋白y3对TMV-CP体外聚合过程的影响结果 | 第73-74页 |
| ·蛋白y3对植株叶绿素含量的影响 | 第74-75页 |
| ·蛋白y3和YP46-46抗真菌和细菌效果 | 第75页 |
| ·纯化蛋白的血凝活性 | 第75-77页 |
| ·蛋白对肿瘤细胞的抑制作用 | 第77-79页 |
| ·小结与讨论 | 第79-84页 |
| 4 蛋白y3基因克隆与序列分析 | 第84-97页 |
| ·材料与方法 | 第84-89页 |
| ·供试材料 | 第84页 |
| ·供试植物、菌株和载体 | 第84页 |
| ·供试试剂和酶类 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84页 |
| ·方法 | 第84-89页 |
| ·引物设计、评价与合成 | 第84-85页 |
| ·食用菌总RNA的提取 | 第85-86页 |
| ·3'RACE-Ready cDNA的制备 | 第86页 |
| ·3'RACE扩增 | 第86-87页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及DNA片段的回收 | 第87页 |
| ·载体的连接 | 第87页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的简易制备 | 第87页 |
| ·转化 | 第87页 |
| ·质粒的提取 | 第87-88页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第88页 |
| ·重组克隆的PCR鉴定 | 第88页 |
| ·克隆子序列的测定 | 第88页 |
| ·核苷酸或氨基酸序列分析 | 第88页 |
| ·蛋白理化性质分析 | 第88-89页 |
| ·结果与分析 | 第89-95页 |
| ·蛋白y3基因的3'RACE-PCR扩增 | 第89-90页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第90页 |
| ·蛋白y3 cDNA序列及其二级结构 | 第90-91页 |
| ·推导的氨基酸序列及其二级结构 | 第91页 |
| ·食用菌中凝集素cDNA的ORF及其编码氨基酸的生物信息学分析 | 第91-93页 |
| ·碱基组成比较 | 第91-92页 |
| ·分子量、等电点以及氨基酸组成比较 | 第92-93页 |
| ·食用菌中凝集素cDNA的ORF序列同源性比较 | 第93-95页 |
| ·小结与讨论 | 第95-97页 |
| 5 总讨论 | 第97-104页 |
| ·两种新的植物病毒抑制蛋白来源 | 第97-98页 |
| ·两种蛋白与其它抗植物病毒蛋白的比较 | 第98-101页 |
| ·理化性质 | 第98-99页 |
| ·抗植物病毒特性 | 第99页 |
| ·两种蛋白的其它活性 | 第99-101页 |
| ·核酸序列 | 第101页 |
| ·有待进一步探讨的问题 | 第101-102页 |
| ·应用前景 | 第102-104页 |
| 6 总结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-118页 |
| 攻博期间发表(投稿)的论文 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 原创性声明 | 第120-121页 |
| 附录1: 蛋白y3 N-端序列测定图谱 | 第121-127页 |
| 附录2: 蛋白YP46-46 N-端序列测定图谱 | 第127-132页 |