重组人骨形成蛋白-2在大肠杆菌中的高效表达及体外复性
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词 | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-24页 |
| ·骨形成蛋白-2概述 | 第8-13页 |
| ·包涵体的概述 | 第13-16页 |
| ·包涵体的复性 | 第16-19页 |
| ·本实验使用的表达载体介绍 | 第19-21页 |
| ·本研究的的目的与主要内容 | 第21-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-30页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| 第三章 高效表达rhBMP-2大肠杆菌菌株的构建 | 第30-37页 |
| ·表达质粒pBV220／hBMP-2的构建 | 第30页 |
| ·菌株SH重组蛋白质rhBMP-2的表达 | 第30-31页 |
| ·重组质粒不稳定性研究 | 第31-33页 |
| ·表达质粒pET／hBMP-2的构建 | 第33-34页 |
| ·菌株JH重组蛋白质rhBMP-2的表达 | 第34-35页 |
| ·重组质粒不稳定性的测定 | 第35-36页 |
| ·本部分小结和讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 大肠杆菌JH菌株发酵条件的优化 | 第37-46页 |
| ·重组大肠杆菌的生长曲线 | 第37页 |
| ·初始pH对菌体生长的影响 | 第37-38页 |
| ·摇瓶装液量对菌体生长的影响 | 第38-39页 |
| ·IPTG对菌体生长的影响 | 第39-40页 |
| ·葡萄糖对菌体生长的影响 | 第40-41页 |
| ·酵母粉与蛋白胨比例对菌体生长的影响 | 第41-42页 |
| ·IPTG对rhBMP-2表达的影响 | 第42-43页 |
| ·摇瓶装液量对rhBMP-2表达的影响 | 第43-44页 |
| ·酵母粉／蛋白胨比例与rhBMP-2表达率 | 第44页 |
| ·本部分小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 rhBMP-2复性的探索 | 第46-58页 |
| ·鉴定rhBMP-2单体存在于包涵体 | 第46页 |
| ·rhBMP-2单体的清洗 | 第46-47页 |
| ·层析纯化rhBMP-2单体 | 第47页 |
| ·rhBMP-2单体的溶解 | 第47-48页 |
| ·rhBMP-2单体的复性 | 第48-51页 |
| ·rhBMP-2的纯化 | 第51页 |
| ·复性二聚体rhBMP-2的分析 | 第51-54页 |
| ·本部分小结与讨论 | 第54-58页 |
| 第六章 实验的创新与展望 | 第58-60页 |
| ·本实验的创新 | 第58页 |
| ·本实验的展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
