摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 前言 | 第7-13页 |
·嗜热菌 | 第7-9页 |
·分类和鉴定 | 第9-10页 |
·质粒 | 第10-13页 |
第二章 材料和方法 | 第13-28页 |
·实验材料 | 第13-19页 |
·分离样品的来源 | 第13页 |
·培养基 | 第13-15页 |
·菌株与质粒 | 第15页 |
·酶与试剂 | 第15-16页 |
·常用溶液、缓冲液 | 第16-18页 |
·主要仪器设备 | 第18-19页 |
·方法与步骤 | 第19-28页 |
·菌株的分离和筛选 | 第19页 |
·菌株的光学显微镜观察 | 第19页 |
·菌株的电子显微镜观察 | 第19页 |
·菌种的保存 | 第19-20页 |
·生理生化反应特征的检测 | 第20页 |
·基因组DNA的小量制备 | 第20页 |
·鉴定菌株的引物设计和PCR扩增 | 第20-22页 |
·质粒DNA的大量制备 | 第22-23页 |
·少量提取质粒DNA | 第23页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第23页 |
·DNA的酶切与连接 | 第23-24页 |
·连接产物对大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第24页 |
·阳性克隆的筛选和酶切验证 | 第24页 |
·重组子的质粒PCR验证 | 第24-25页 |
·Tm值法测定DNA的G+C mol%含量 | 第25-27页 |
·嗜热菌质粒的提取 | 第27-28页 |
第三章 鉴定结果与分析 | 第28-44页 |
·样品的采集和分离筛选 | 第28页 |
·TTH菌株的初步鉴定 | 第28-30页 |
·培养特征 | 第28-29页 |
·形态学特征 | 第29-30页 |
·TTH菌株的生理生化特征鉴定 | 第30-33页 |
·碳源的利用 | 第30页 |
·不同温度下的生长情况 | 第30-31页 |
·不同pH值下的生长情况 | 第31-32页 |
·不同NaCl浓度下的生长情况 | 第32-33页 |
·抗生素敏感性的测定 | 第33页 |
·其它生理生化特征的测定 | 第33页 |
·TTH菌株DNA的G+C mol%含量的测定 | 第33-34页 |
·TTH菌株的16S rDNA序列分析 | 第34-40页 |
·TTH菌株总DNA的提取 | 第34-35页 |
·PCR扩增 | 第35-36页 |
·pMD 18-T Vector重组克隆质粒的验证 | 第36-37页 |
·16S rDNA PCR扩增产物分析 | 第37-38页 |
·TTH菌株的16S rDNA序列同源性比较 | 第38-40页 |
·TTH菌株与Thermus thermophilus HB8菌株ITS序列的比较 | 第40-41页 |
·以16S rRNA为基础的系统发育分析 | 第41-44页 |
第四章 嗜热菌质粒 | 第44-49页 |
·嗜热菌质粒的提取 | 第44页 |
·转化大肠杆菌 | 第44-45页 |
·酶切验证 | 第45-46页 |
·部分测序结果 | 第46-47页 |
·BLAST比较的结果 | 第47-49页 |
第五章 讨论 | 第49-54页 |
·嗜热菌的生理生化特征 | 第49页 |
·G+C mol%含量的测定 | 第49-50页 |
·系统发育分析 | 第50页 |
·对抗生素抗性 | 第50-51页 |
·嗜热菌质粒 | 第51-52页 |
·DNA分子的体外重组 | 第52页 |
·问题与展望 | 第52-54页 |
第六章 结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
致谢 | 第60页 |