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一株新型嗜热菌TTH的分离、鉴定及其质粒的研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 前言第7-13页
   ·嗜热菌第7-9页
   ·分类和鉴定第9-10页
   ·质粒第10-13页
第二章 材料和方法第13-28页
   ·实验材料第13-19页
     ·分离样品的来源第13页
     ·培养基第13-15页
     ·菌株与质粒第15页
     ·酶与试剂第15-16页
     ·常用溶液、缓冲液第16-18页
     ·主要仪器设备第18-19页
   ·方法与步骤第19-28页
     ·菌株的分离和筛选第19页
     ·菌株的光学显微镜观察第19页
     ·菌株的电子显微镜观察第19页
     ·菌种的保存第19-20页
     ·生理生化反应特征的检测第20页
     ·基因组DNA的小量制备第20页
     ·鉴定菌株的引物设计和PCR扩增第20-22页
     ·质粒DNA的大量制备第22-23页
     ·少量提取质粒DNA第23页
     ·大肠杆菌感受态的制备第23页
     ·DNA的酶切与连接第23-24页
     ·连接产物对大肠杆菌感受态细胞的转化第24页
     ·阳性克隆的筛选和酶切验证第24页
     ·重组子的质粒PCR验证第24-25页
     ·Tm值法测定DNA的G+C mol%含量第25-27页
     ·嗜热菌质粒的提取第27-28页
第三章 鉴定结果与分析第28-44页
   ·样品的采集和分离筛选第28页
   ·TTH菌株的初步鉴定第28-30页
     ·培养特征第28-29页
     ·形态学特征第29-30页
   ·TTH菌株的生理生化特征鉴定第30-33页
     ·碳源的利用第30页
     ·不同温度下的生长情况第30-31页
     ·不同pH值下的生长情况第31-32页
     ·不同NaCl浓度下的生长情况第32-33页
     ·抗生素敏感性的测定第33页
     ·其它生理生化特征的测定第33页
   ·TTH菌株DNA的G+C mol%含量的测定第33-34页
   ·TTH菌株的16S rDNA序列分析第34-40页
     ·TTH菌株总DNA的提取第34-35页
     ·PCR扩增第35-36页
     ·pMD 18-T Vector重组克隆质粒的验证第36-37页
     ·16S rDNA PCR扩增产物分析第37-38页
     ·TTH菌株的16S rDNA序列同源性比较第38-40页
   ·TTH菌株与Thermus thermophilus HB8菌株ITS序列的比较第40-41页
   ·以16S rRNA为基础的系统发育分析第41-44页
第四章 嗜热菌质粒第44-49页
   ·嗜热菌质粒的提取第44页
   ·转化大肠杆菌第44-45页
   ·酶切验证第45-46页
   ·部分测序结果第46-47页
   ·BLAST比较的结果第47-49页
第五章 讨论第49-54页
   ·嗜热菌的生理生化特征第49页
   ·G+C mol%含量的测定第49-50页
   ·系统发育分析第50页
   ·对抗生素抗性第50-51页
   ·嗜热菌质粒第51-52页
   ·DNA分子的体外重组第52页
   ·问题与展望第52-54页
第六章 结论第54-56页
参考文献第56-60页
致谢第60页

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