| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 本论文缩略词表 | 第8-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-41页 |
| 引言 | 第15页 |
| 第一节 植物胚胎发生过程中的基因表达研究 | 第15-21页 |
| 1.研究胚胎发生的重要性 | 第15-16页 |
| 2.胎胎发生过程中的分子生物学 | 第16-19页 |
| ·受精前后的基因表达 | 第16页 |
| ·合子基因的激活 | 第16-17页 |
| ·合子不等分裂和胚胎发育 | 第17-18页 |
| ·胚柄 | 第18页 |
| ·近期分离到的胚胎发育相关基因 | 第18-19页 |
| 3.体细胞胚胎发生过程中的分子生物学 | 第19-20页 |
| 4.早期胚乳发育过程中的分子生物学 | 第20页 |
| 5.展望 | 第20-21页 |
| 第二节 水稻基因组研究 | 第21-28页 |
| 1.国际水稻基因组测序 | 第21-22页 |
| 2.水稻功能基因组研究进展 | 第22-27页 |
| ·转录水平上的基因表达研究 | 第23页 |
| ·以PCR为研究基础的技术方法 | 第23-25页 |
| ·以大规模杂交为基础的技术方法 | 第25-26页 |
| ·基于蛋白质水平的基因表达研究-蛋白质组学的研究 | 第26-27页 |
| 3.生物信息学与基因功能的研究 | 第27-28页 |
| 4.问题与展望 | 第28页 |
| 第三节 文库的均一化 | 第28-30页 |
| 1.均一化总述 | 第28-29页 |
| 2.均一化原理 | 第29-30页 |
| 3.均一化的应用 | 第30页 |
| 第四节 RNA原位杂交技术在植物基因表达研究中的作用 | 第30-31页 |
| 第五节 植物的遗传转化 | 第31-33页 |
| 1.基因的遗传转化 | 第31-32页 |
| 2.基因沉默现象 | 第32-33页 |
| 第六节 植物的钙信号转导系统 | 第33-41页 |
| 1.植物钙信号系统 | 第34-35页 |
| 2.植物钙调素 | 第35-38页 |
| ·钙调素基础知识 | 第35-36页 |
| ·植物钙调素亚型及功能 | 第36-38页 |
| 3.植物钙相关的蛋白激酶 | 第38-40页 |
| ·蛋白质的可逆磷酸化 | 第38页 |
| ·植物中的蛋白激酶 | 第38-39页 |
| ·CDPK-SnRK超家族的分类和特性 | 第39-40页 |
| 5.展望 | 第40-41页 |
| 第二章 水稻胚胎cDNA文库的构建 | 第41-66页 |
| 引言 | 第41页 |
| 第一节 试剂与材料 | 第41-42页 |
| 1 植物材料 | 第41页 |
| 2 试剂 | 第41页 |
| 3 CPW分离液 | 第41页 |
| 4 水稻胚的显微分离 | 第41-42页 |
| 5 分离胚生活力的鉴定 | 第42页 |
| 第二节 文库的构建 | 第42-48页 |
| 1 mRNA直接提取 | 第42-43页 |
| 2.RT-PCR | 第43-45页 |
| 3 连接，包装与转染 | 第45-48页 |
| 第三节 文库的分析，鉴定 | 第48-50页 |
| 1 试剂 | 第48-49页 |
| 2 对纯化后的cDNA进行随机PCR鉴定 | 第49页 |
| 3 滴度测定 | 第49页 |
| 4 连接效率测定 | 第49页 |
| 5 cDNA插入片段的分析 | 第49-50页 |
| 第四节 文库的筛选 | 第50-51页 |
| 1 96孔板大通量提取文库质粒DNA | 第50页 |
| 2 文库质粒DNA点高密度膜 | 第50页 |
| 3 混合文库DNA探针标记 | 第50-51页 |
| 4 杂交及洗膜，压片 | 第51页 |
| 5 差异表达基因的挑选及再鉴定 | 第51页 |
| 6 测序 | 第51页 |
| 第五节 RNA原位杂交验证 | 第51-66页 |
| 一 | 第52-58页 |
| 1 石蜡切片的RNA原位杂交 | 第52-57页 |
| 2 胚胎的整体RNA原位杂交 | 第57-58页 |
| 二 结果与讨论 | 第58-66页 |
| 1 文库的构建 | 第58-61页 |
| 2 文库的筛选 | 第61-65页 |
| 3 原位杂交结果和讨论 | 第65-66页 |
| 第三章 水稻胚胎文库的均一化 | 第66-73页 |
| 引言 | 第66页 |
| 第一节 方法和材料 | 第66-70页 |
| 1 材料的准备 | 第66页 |
| 2 单双链DNA分离预实验条件确定 | 第66-67页 |
| 3 单链DNA(ssDNA)的制备 | 第67页 |
| 4 drive DNA的制备 | 第67页 |
| 5 杂交 | 第67-68页 |
| 6 转化 | 第68页 |
| 7 水稻胚胎均一化文库的质量检测 | 第68-70页 |
| 8 水稻胚胎均一化文库的筛选 | 第70页 |
| 第二节 结果和讨论 | 第70-72页 |
| 1 水稻胚胎均一化文库的构建 | 第70页 |
| 2 水稻胚胎均一化文库的质量检测 | 第70-71页 |
| 3 水稻胚胎均一化文库的筛选 | 第71-72页 |
| 第三节 问题与展望 | 第72-73页 |
| 第四章 利用基因芯片技术研究水稻胚胎基因表达谱 | 第73-88页 |
| 引言 | 第73页 |
| 第一节 材料与方法 | 第73-75页 |
| 1 水稻材料 | 第73页 |
| 2 cDNA的合成 | 第73-74页 |
| 3 cRNA合成 | 第74页 |
| 4 芯片杂交 | 第74页 |
| 5 数据分析 | 第74页 |
| 6 目的基因的获得 | 第74-75页 |
| 7 RNA原位杂交 | 第75页 |
| 第二节 结果和讨论 | 第75-88页 |
| 1 试验设计 | 第75-76页 |
| 2 芯片杂交结果的整体可靠性分析 | 第76-78页 |
| 3 对芯片杂交数据的整体分析 | 第78-82页 |
| 4 对芯片结果的分类分析 | 第82-86页 |
| 5 未知功能的水稻胚胎发育基因 | 第86页 |
| 6 部分差异表达基因的RNA原位杂交检测 | 第86-88页 |
| 第五章 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第88-103页 |
| 引言 | 第88页 |
| 第一节 材料与方法 | 第88-99页 |
| 1 常规材料的准备 | 第88-92页 |
| 2 构建表达载体过程中所用的常规质粒与一般载体构建策略 | 第92-95页 |
| 3 水稻超量表达载体的改造及构建策略 | 第95-97页 |
| 4 CIPK基因超量表达载体及RNAi载体的构建 | 第97-98页 |
| 5 水稻愈伤组织的诱导与转化 | 第98-99页 |
| 6 再生植株的PCR鉴定 | 第99页 |
| 第二节 结果和讨论 | 第99-103页 |
| 1 水稻超量表达载体的改造及构建策略 | 第99-100页 |
| 2 pZY载体的改造 | 第100页 |
| 3 利用水稻超量表达载体改造RNAi表达载体 | 第100-101页 |
| 4 CIPK基因的表达载体的构建 | 第101-102页 |
| 5 T0代转基因植株的获得 | 第102页 |
| 6 转基因植株的PCR鉴定 | 第102-103页 |
| 第六章 拟南芥CRK1的结构和生化分析 | 第103-131页 |
| 引言 | 第103页 |
| 第一节 AtCRK1基因序列分析 | 第103-111页 |
| 一 材料和方法 | 第103-105页 |
| 1 文库的筛选及5'-RACE | 第103-104页 |
| 2 Northern杂交 | 第104-105页 |
| 二 结果和讨论 | 第105-111页 |
| 第二节 AtCRK1的钙调素结合性质分析 | 第111-125页 |
| 一 材料和方法 | 第113-123页 |
| 1 全基因和缺失突变体表达载体的构建 | 第113-123页 |
| 二 结果和讨论 | 第123-125页 |
| 第三节 AtCRK1的生化特性分析 | 第125-131页 |
| 一 材料和方法 | 第125-126页 |
| 二 结果和讨论 | 第126-131页 |
| 第七章 总讨论 | 第131-135页 |
| 1.研究水稻胚胎发生的意义 | 第131-132页 |
| 2.关于基因芯片结果的讨论 | 第132-133页 |
| 3.钙调素结合蛋白激酶的研究进展 | 第133-135页 |
| 参考文献 | 第135-156页 |
| 在读期间发表与投稿论文 | 第156-157页 |
| 致谢 | 第157页 |