中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
本文常用英文缩略词表 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-35页 |
·原子力显微镜(AFM) | 第14-19页 |
·AFM的基本原理 | 第14-16页 |
·AFM的操作模式 | 第16-17页 |
·AFM的技术要点 | 第17-19页 |
·AFM力-距离曲线 | 第19-21页 |
·AFM力-距离曲线测定的基本原理 | 第19-20页 |
·AFM力-距离曲线的分析 | 第20-21页 |
·AFM在生物分析中的应用 | 第21-33页 |
·AFM在生物分析中的优势 | 第22页 |
·表面形貌测定在生物分析中的应用 | 第22-28页 |
·AFM力测定在生物分析中的应用 | 第28-33页 |
·本论文拟开展的工作 | 第33-35页 |
第2章 AFM研究分子信标与目标核酸的相互作用 | 第35-52页 |
·前言 | 第35-36页 |
·实验部分 | 第36-40页 |
·分子信标的设计 | 第36-37页 |
·实验原理 | 第37-38页 |
·仪器和试剂 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-40页 |
·结果与讨论 | 第40-51页 |
·分子信标性能的检测 | 第40-41页 |
·探针修饰及巯基化目标核酸分子固定方法的讨论 | 第41-43页 |
·分子信标与目标核酸的杂交 | 第43-46页 |
·分子信标与目标核酸相互作用的单分子力分析 | 第46-48页 |
·分子信标的特异性考察 | 第48-49页 |
·分子信标与线性DNA探针的比较 | 第49-51页 |
·结论 | 第51-52页 |
第3章 可连续研究分子信标与目标核酸相互作用的AFM量测 | 第52-67页 |
·前言 | 第52-53页 |
·实验部分 | 第53-57页 |
·实验原理 | 第53-54页 |
·试剂与仪器 | 第54-55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·结果与讨论 | 第57-66页 |
·核酸杂交 | 第57-58页 |
·探针的再生 | 第58-60页 |
·非特异性吸附的考察 | 第60-61页 |
·分子信标识别目标核酸特异性的考察 | 第61-62页 |
·流通体系的应用—实时考察反应介质对分子信标与目标核酸相互作用的影响 | 第62-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
第4章 基于胶体金标记分子信标与目标核酸相互作用的AFM研究 | 第67-81页 |
·前言 | 第67-68页 |
·实验部分 | 第68-71页 |
·实验原理 | 第68页 |
·仪器与试剂 | 第68-69页 |
·实验方法 | 第69-71页 |
·结果与讨论 | 第71-80页 |
·胶体金的表征 | 第71-72页 |
·基底处理 | 第72-75页 |
·分子信标与完全互补序列的杂交 | 第75-76页 |
·非特异性吸附影响的考察 | 第76-77页 |
·分子信标杂交特异性的考察 | 第77-78页 |
·胶体金表面覆盖度与互补DNA的浓度间的关系 | 第78-80页 |
·结论 | 第80-81页 |
第5章 基于胶体金标记应用AFM研究DNA连接 | 第81-97页 |
·前言 | 第81页 |
·实验部分 | 第81-88页 |
·实验原理 | 第81-84页 |
·仪器与试剂 | 第84-85页 |
·实验方法 | 第85-88页 |
·结果与讨论 | 第88-96页 |
·胶体金表征 | 第88页 |
·基底的处理 | 第88-89页 |
·非特异性吸附的影响 | 第89页 |
·磷酸化过程对胶体金标记的影响 | 第89-90页 |
·模板长度的筛选 | 第90-92页 |
·连接酶作用的考察 | 第92-93页 |
·T_4 DNA连接酶的保真性的考察 | 第93-95页 |
·温度对T_4 DNA连接酶连接效率的影响 | 第95-96页 |
·小结 | 第96-97页 |
结论 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-117页 |
致谢 | 第117-119页 |
附录A:攻读博士学位期间所发表的学术论文 | 第119-120页 |
附录B:Poisson分布 | 第120-121页 |