| 1 引言 | 第1-23页 |
| ·传染性喉气管炎及传染性喉气管炎病毒 | 第6-12页 |
| ·传染性喉气管炎病毒分子生物学研究 | 第12-19页 |
| ·传染性喉气管炎诊断技术的研究现状及进展 | 第19-22页 |
| ·本实验目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 实验一: 鸡传染性喉气管炎病毒GB基因的高效表达 | 第23-34页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·主要实验材料 | 第23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| ·gB基因片段的PCR扩增及克隆 | 第24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·重组质粒的构建 | 第24页 |
| ·碱裂解法提取质粒DNA | 第24-25页 |
| ·表达载体的构建 | 第25页 |
| ·gB基因片段的诱导表达 | 第25页 |
| ·重组蛋白His-tgB的Western blotting分析 | 第25-26页 |
| ·兔抗His-tgB多克隆血清的制备 | 第26-27页 |
| ·实验结果 | 第27-31页 |
| ·gB蛋白功能区分析 | 第27-28页 |
| ·传染性传染性喉气管炎病毒WG株gB基因片段的扩增 | 第28页 |
| ·重组原核表达载体的构建 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE检测重组蛋白 | 第28页 |
| ·重组蛋白His-tgB的Western blotting 检测结果 | 第28-30页 |
| ·兔抗His-tgB多克隆血清的免疫学检测 | 第30页 |
| ·多克隆血清的Western blotting 检测结果 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-34页 |
| 3 实验二: 间接ELISA检测传染性喉气管炎抗体方法的建立 | 第34-44页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·主要实验材料 | 第34页 |
| ·试剂配置 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白的制备和纯化 | 第34-35页 |
| ·间接tgB-ELISA操作程序 | 第35页 |
| ·抗原最适包被浓度与血清最适工作浓度的确定 | 第35-36页 |
| ·间接ELISA判定标准的获得 | 第36页 |
| ·特异性实验 | 第36页 |
| ·符合性试验 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-39页 |
| ·重组蛋白His-tgB的纯化 | 第36页 |
| ·抗原最适包被浓度与血清最适工作浓度的确定 | 第36-37页 |
| ·间接ELISA判定标准的确定 | 第37-38页 |
| ·特异性试验 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-44页 |
| 4 结 论 | 第44-45页 |
| 致 谢 | 第45-46页 |
| 参 考 文 献 | 第46-56页 |
| 附 录 | 第56-62页 |
| 作 者 简 介 | 第62页 |
