中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 枯草芽孢杆菌 WHNB02植酸酶phyC基因的克隆及序列分析 | 第16-37页 |
摘要 | 第16-17页 |
1 引言 | 第17页 |
2 材料与方法 | 第17-21页 |
3 结果 | 第21-35页 |
3.1 芽孢杆菌植酸酶phyC基因的PCR及克隆 | 第21页 |
3.2 克隆片段的序列测定及同源性分析 | 第21-29页 |
3.3 枯草芽孢杆菌植酸酶phyC基因的生物信息学分析 | 第29-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
第二章 芽孢杆菌植酸酶phyC基因在大肠杆菌中的非融合和融合表达 | 第37-58页 |
摘要 | 第37-38页 |
1 引言 | 第38页 |
2 材料和方法 | 第38-45页 |
3 结果 | 第45-55页 |
3.1 植酸酶phyC基因非融合和融合表达片段的克隆 | 第45-46页 |
3.2 植酸酶phyC基因pET-30b(+)非融合、融合表达载体的构建 | 第46-47页 |
3.3 植酸酶phyC基因表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第47-51页 |
3.4 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第51-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
第三章 芽孢杆菌植酸酶phyC基因在毕赤巴斯德酵母中的胞内和分泌表达 | 第58-76页 |
摘要 | 第58-59页 |
1 引言 | 第59页 |
2 材料和方法 | 第59-67页 |
3 结果 | 第67-73页 |
3.1 植酸酶phyC基因pPIC3.5K和pPIC9K表达片段的克隆 | 第67-68页 |
3.2 植酸酶phyC基因pPIC3.5K和pPIC9K表达载体的构建 | 第68-69页 |
3.3 重组酵母的筛选 | 第69-70页 |
3.3 植酸酶phyC基因的在毕赤巴斯德酵母中的表达 | 第70-71页 |
3.5 PP9KC5的产酶曲线测定 | 第71-72页 |
3.6 表达产物的SDS-PAGE | 第72-73页 |
4 讨论 | 第73-76页 |
第四章 基因工程芽孢杆菌植酸酶的纯化及最适反应温度、热稳定性、最适反应pH的测定 | 第76-94页 |
摘要 | 第76-77页 |
1 引言 | 第77页 |
2 材料和方法 | 第77-82页 |
3 结果 | 第82-90页 |
3.1 纯化产物的SDS-PAGE | 第82-84页 |
3.2 分泌表达植酸酶的去糖基化 | 第84页 |
3.3 表达产物最适反应温度的测定 | 第84-86页 |
3.4 表达产物热稳定性的测定 | 第86-88页 |
3.5 表达产物最适反应pH的测定 | 第88-90页 |
4 讨论 | 第90-94页 |
结论 | 第94-95页 |
文献综述 | 第95-116页 |
芽孢杆菌植酸酶的晶体结构与基因工程 | 第95-103页 |
大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展 | 第103-116页 |
参考文献 | 第116-124页 |
致谢 | 第124-125页 |
在读期间发表论文及获奖情况 | 第125-127页 |
声明 | 第127页 |