| 中文摘要 | 第1-5页 |
| English Abstract | 第5-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-44页 |
| ·海绵生物学特性简介 | 第13-18页 |
| ·海绵的分类、分布与进化 | 第13-14页 |
| ·海绵的形态与组织结构 | 第14-16页 |
| ·海绵的生理与生殖发育 | 第16-18页 |
| ·海绵在药物开发及其它领域的研究 | 第18-23页 |
| ·海绵在药物开发中的研究 | 第18-20页 |
| ·海绵硅材料与硅酶的研究 | 第20-23页 |
| ·海绵在海洋环境领域中的研究 | 第23页 |
| ·中国海绵的研究 | 第23-25页 |
| ·中国海绵的资源分布 | 第23-24页 |
| ·中国海绵天然产物研究 | 第24-25页 |
| ·中国海绵研究面临的问题 | 第25页 |
| ·动物细胞培养 | 第25-31页 |
| ·动物细胞培养技术概况 | 第25-27页 |
| ·动物细胞培养的研究进展 | 第27-30页 |
| ·海洋无脊椎动物细胞培养的现状和困难 | 第30-31页 |
| ·海绵细胞离体培养技术的研究 | 第31-43页 |
| ·海绵细胞离体培养技术的发展 | 第31-34页 |
| ·海绵细胞团离体培养的技术方法 | 第34-35页 |
| ·海绵细胞团离体培养的现状 | 第35-42页 |
| ·海绵细胞团离体培养中存在的主要问题 | 第42-43页 |
| ·论文研究背景和计划 | 第43-44页 |
| 第二章 海绵细胞离体培养定量研究方法的建立 | 第44-59页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·MTT法反应条件的考察 | 第45-46页 |
| ·光密度法检测细胞生物量的条件 | 第46-47页 |
| ·细胞直接计数与MTT法、光密度法的比较 | 第47-48页 |
| ·5-BrdU掺入法检测海绵细胞增殖 | 第48页 |
| ·端粒酶活性检测海绵细胞增殖潜力 | 第48-49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-58页 |
| ·MTT法的反应条件 | 第49-51页 |
| ·光密度法适用条件 | 第51-53页 |
| ·MTT法、光密度法、直接计数法的比较 | 第53-55页 |
| ·5-BrdU掺入法检测海绵细胞增殖 | 第55-56页 |
| ·端粒酶活性检测海绵细胞增殖潜力 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第三章 海绵混合细胞团成团生长基本规律的研究 | 第59-69页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·实验材料 | 第59-60页 |
| ·方法 | 第60-62页 |
| 1 细胞离散 | 第60页 |
| 2 MCP Primmorph成团的关键因素 | 第60-61页 |
| 3 MCP Primmorph形成过程的显微镜观察 | 第61-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-68页 |
| ·MCP Primmorph形成动态观察 | 第62-64页 |
| ·MCP Primmorph形成过程的团尺寸变化 | 第64-65页 |
| ·接种密度对MCP Primmorph形成的影响 | 第65页 |
| ·EDTA离散细胞对MCP成团的影响 | 第65-66页 |
| ·海绵健康状况对MCP Primmorph形成的影响 | 第66页 |
| ·培养温度对MCP Primmorph形成的影响 | 第66页 |
| ·接种密度对MCP Primmorph形成的影响 | 第66-67页 |
| ·其它因素对MCP Primmorph形成的影响 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第四章 混合细胞细胞团原代培养营养、生长与代谢特征 | 第69-90页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·MCP Primmorph培养的营养需求 | 第69-83页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·方法 | 第70-72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-83页 |
| ·MCP Primmorph36h培养的营养考察 | 第72-77页 |
| ·5天期MCP Primmorph培养的营养考察 | 第77-80页 |
| ·组合培养基的5天期培养 | 第80-83页 |
| ·MCP Primmorph的生长与代谢特征 | 第83-88页 |
| ·引言 | 第83页 |
| ·实验方法 | 第83-85页 |
| 1 细胞离散与培养 | 第83-84页 |
| 2 MTT细胞活性检测 | 第84页 |
| 3 5-BrdU免疫组化检测增殖细胞比例 | 第84页 |
| 4 总蛋白表征的基础代谢检测 | 第84页 |
| 5 色素合成能力表征的次生代谢能力检测 | 第84-85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-88页 |
| 1 Suberites d.细胞培养中的MTT检测的细胞活性动力学特征 | 第85-86页 |
| 2 Suberites d.细胞培养中的5-BrdU检测的细胞增殖规律 | 第86页 |
| 3 Suberites d.细胞培养中的总蛋白代谢特征 | 第86-87页 |
| 4 Suberites d.细胞培养中的色素代谢为代表的次生代谢动力学 | 第87-88页 |
| ·小结 | 第88-90页 |
| 第五章 富集海绵原细胞(ADCP)的成团、培养与增殖研究 | 第90-114页 |
| ·引言 | 第90页 |
| ·Ficoll分离与富集原细胞方法研究 | 第90-98页 |
| ·实验材料与方法 | 第90-91页 |
| ·结果与讨论 | 第91-98页 |
| 1 梯度密度离心条件的选择 | 第91-93页 |
| 2 梯度密度离心细胞的类型鉴别 | 第93-98页 |
| ·ADCP Primmorph与MCP Primmorph对比培养 | 第98-108页 |
| ·实验材料与方法 | 第98-100页 |
| ·结果与讨论 | 第100-108页 |
| 1 ADCP Primmorph与MCP Primmorph成团过程的比较 | 第100-103页 |
| 2 ADCP Primmorph与MCP Primmorph细胞团维持培养对比 | 第103-104页 |
| 3 ADCP Primmorph与MCP Primmorph维持培养细胞增殖规律对比 | 第104-105页 |
| 4 梯度分离各细胞组分与混合细胞端粒酶活性对比 | 第105-107页 |
| 5 ADCP Primmorph与MCP Primmorph的结构差异 | 第107-108页 |
| ·ADCP Primmorph培养中的特殊现象 | 第108-113页 |
| ·ADCP Primmorph的细胞贴壁生长 | 第108-109页 |
| ·ADCP Primmorph的成团特征 | 第109-110页 |
| ·ADCP Primmorph分泌胶原与骨针的生长 | 第110-112页 |
| ·ADCP Primmorph的光敏感特性 | 第112-113页 |
| ·小结 | 第113-114页 |
| 第六章 ADCP Primmorph传代初步探索 | 第114-123页 |
| ·引言 | 第114页 |
| ·实验材料与方法 | 第114-115页 |
| ·材料 | 第114页 |
| ·方法 | 第114-115页 |
| ·离散传代培养 | 第114-115页 |
| ·切块传代培养 | 第115页 |
| ·结果与讨论 | 第115-122页 |
| ·离散传代培养的细胞生长观察 | 第115-119页 |
| ·离散传代培养的细胞活性变化 | 第119页 |
| ·离散传代培养中的细胞增殖规律 | 第119-120页 |
| ·切块传代方式中的细胞团生长规律 | 第120-122页 |
| ·小结 | 第122-123页 |
| 第七章 海绵细胞团培养色素活性物质代谢调控初步考察 | 第123-141页 |
| ·引言 | 第123页 |
| ·海绵色素的组成分析和半定性研究 | 第123-131页 |
| ·实验材料与方法 | 第123-125页 |
| ·结果与讨论 | 第125-131页 |
| ·Hp-EAP的生物活性 | 第131-134页 |
| ·实验材料与方法 | 第131-132页 |
| ·结果与讨论 | 第132-134页 |
| ·繁茂膜海绵色素在细胞培养中的代谢特征 | 第134-139页 |
| ·实验材料与方法 | 第134-135页 |
| ·结果与讨论 | 第135-139页 |
| ·结论 | 第139-141页 |
| 第八章 结论 | 第141-147页 |
| ·结论 | 第141-142页 |
| ·本论文的几点重要发现 | 第142-143页 |
| ·后续工作建议 | 第143-147页 |
| 附录1. 细胞团形成流程 | 第147-148页 |
| 附录2. 实验所用仪器一览 | 第148-149页 |
| 附录3. 实验所用药品一览 | 第149-150页 |
| 附录4. 常用培养基与试剂配方 | 第150-152页 |
| 参考文献 | 第152-164页 |
| 符号说明 | 第164-165页 |
| 作者简历 | 第165-167页 |
| 致谢 | 第167页 |
