中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-30页 |
·疫霉属病原菌的分类、寄主范围及其侵染循环 | 第11-16页 |
·病原菌PG的分子生物学研究 | 第16-20页 |
·PG基因的种类 | 第16-19页 |
·曲霉菌(Aspergillus) PG | 第16-18页 |
·灰霉菌(Botrytis cinerea) PG | 第18页 |
·镰孢菌(Fusarium spp)的PG | 第18页 |
·其它真菌的PG | 第18-19页 |
·PG基因的结构与功能 | 第19页 |
·表达与调空 | 第19-20页 |
·植物PG的结构、功能及表达调控 | 第20-26页 |
·植物PG的作用方式和组织定位 | 第20-21页 |
·植物PG同工酶 | 第21页 |
·PG结构及序列的差异性 | 第21-22页 |
·PG功能的多样性 | 第22-24页 |
·PG与果实颜色 | 第22页 |
·PG与果胶的降解 | 第22-23页 |
·PG与器官脱落 | 第23-24页 |
·PG与花粉授粉 | 第24页 |
·PG基因的表达调控 | 第24-25页 |
·PG和乙烯与果实成熟关系的新观点 | 第25-26页 |
·PG抑制蛋白--PGIP的研究进展 | 第26-30页 |
·PGIP的含量、分布的差异与植物抗性强弱的关系 | 第27-28页 |
·植株不同发育时期PGIP的含量与其抗病性 | 第27页 |
·PGIP在植物不同器官和组织内的分布 | 第27-28页 |
·PGIP对病原菌的抑制程度 | 第28页 |
·PGIP在植物抗病中的作用 | 第28-30页 |
·PGIP的生物学功能 | 第28页 |
·PGIP参与植物局部和系统诱导抗性 | 第28-30页 |
2 引言 | 第30-32页 |
3 材料与方法 | 第32-41页 |
·菌种与来源 | 第32页 |
·樟疫霉菌和曲霉菌基因组DNA的提取 | 第32页 |
·质粒DNA的提取与纯化 | 第32-33页 |
·PCR反应 | 第33-34页 |
·PCR引物设计与耐热聚合酶来源 | 第33-34页 |
·PCR反应液组成 | 第34页 |
·PCR反应条件 | 第34页 |
·PCR产物的纯化与连接 | 第34-35页 |
·PCR产物的纯化 | 第34-35页 |
·连接与转化大肠杆菌 | 第35页 |
·菌落PCR | 第35-36页 |
·大肠杆菌菌落PCR | 第35-36页 |
·酵母菌菌落PCR | 第36页 |
·酶切分析与测序 | 第36-37页 |
·酵母菌的遗传转化与质粒DNA的提取 | 第37-38页 |
·酵母菌的遗传转化 | 第37-38页 |
·酵母菌质粒DNA的提取 | 第38页 |
·蛋白质的分离与Western blotting | 第38-39页 |
·PG蛋白质的诱导与分离 | 第38页 |
·Western blotting | 第38-39页 |
·PG活性的检测 | 第39-40页 |
·PGs与PGIPs的相互作用 | 第40-41页 |
·PGIPs表达载体的获得与遗传转化 | 第40页 |
·PGs与PGIPs的相互作用 | 第40-41页 |
4 结果与分析 | 第41-66页 |
·pg基因表达载体的构建策略 | 第41-49页 |
·Pcpg1基因表达载体的构建策略 | 第41-42页 |
·Pcpg2和Pcpg4基因表达载体的构建策略 | 第42-43页 |
·Pcpg6基因表达载体的构建策略 | 第43-44页 |
·AnpgⅠ基因表达载体的构建策略 | 第44-46页 |
·Pcpg7、Pcpg10和Pcpg19基因表达载体的构建策略 | 第46-47页 |
·Pcpg12、Pcpg16和Pcpg17基因表达载体的构建策略 | 第47-48页 |
·Pcpg9基因表达载体的构建策略 | 第48页 |
·Ppgip基因表达载体的构建策略 | 第48-49页 |
·pg基因与PPgip基因的克隆与测序 | 第49-53页 |
·克隆Pg基因与PPgip基因的PCR条件的优化 | 第49-50页 |
·大肠杆菌菌落PCR条件的优化 | 第50-51页 |
·AnpgⅠ基因的克隆与测序 | 第51-52页 |
·Pcpg1、Pcpg2和Pcpg4基因的克隆与测序 | 第52页 |
·Pcpg6基因的克隆与测序 | 第52页 |
·Pcpg7、Pcpg10和Pcpg19基因的克隆与测序 | 第52-53页 |
·Pcpg9、Pcpg12、Pcpg16和Pcpg17基因的克隆与测序 | 第53页 |
·PPgip基因的克隆与测序 | 第53页 |
·PG基因的连接与检测 | 第53-58页 |
·Pcpg1基因的连接与检测 | 第53-54页 |
·Pcpg2、Pcpg4、Pcpg6和PPgip基因连接与检测 | 第54-55页 |
·AnpgⅠ基因的连接与检测 | 第55-56页 |
·Pcpg7、Pcpg10和Pcpg19基因的连接与检测 | 第56-57页 |
·Pcpg9、Pcpg12、Pcpg16和Pcpg17基因的连接与检测 | 第57-58页 |
·遗传转化与菌落PCR检测 | 第58-61页 |
·酵母菌菌落PCR条件的优化 | 第58页 |
·遗传转化与菌落PCR检测 | 第58-61页 |
·转化PG基因系的Western blotting | 第61-62页 |
·PG蛋白质诱导适宜时间的确定 | 第61-62页 |
·转化pg基因系的Western blotting | 第62页 |
·PG活性的检测 | 第62-64页 |
·PG与PGIP相互作用的初步研究 | 第64-66页 |
5 讨论 | 第66-71页 |
·P.cinnamomi pg多基因家族的生物学意义 | 第66-67页 |
·P.cinnamomi PGs的糖基化及其多样性 | 第67-68页 |
·P.cinnamomi pg多基因家族的进化 | 第68页 |
·基因克隆效率与菌落PCR技术 | 第68-71页 |
结论 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
附表1 | 第85-86页 |
附图1 | 第86-87页 |
附图2 | 第87-88页 |
附图3 | 第88-89页 |
附图4 | 第89-90页 |
附图5 | 第90-92页 |
附图6 | 第92-114页 |
附图6-1 | 第92-94页 |
附图6-2 | 第94-96页 |
附图6-3 | 第96-98页 |
附图6-4 | 第98-100页 |
附图6-5 | 第100-102页 |
附图6-6 | 第102-104页 |
附图6-7 | 第104-106页 |
附图6-8 | 第106-108页 |
附图6-9 | 第108-110页 |
附图6-10 | 第110-112页 |
附图6-11 | 第112-114页 |
附图7 | 第114-116页 |
作者简介 | 第116-117页 |