前言 | 第1-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-38页 |
1.1 蛋白酶促水解研究进展 | 第14-22页 |
1.1.1 水解蛋白的来源 | 第14-17页 |
1.1.1.1 植物蛋白 | 第14页 |
1.1.1.2 动物蛋白 | 第14-17页 |
1.1.2 蛋白酶促水解工艺 | 第17-19页 |
1.1.2.1 酶促水解反应操作条件开发 | 第17页 |
1.1.2.2 反应操作流程的开发 | 第17-18页 |
1.1.2.3 蛋白酶固定化技术的应用 | 第18-19页 |
1.1.3 蛋白水解产物的开发与应用 | 第19-22页 |
1.2 蛋白及多肽高效液相色谱分析进展 | 第22-24页 |
1.3 蛋白酶促水解动力学研究现状 | 第24-27页 |
1.3.1 改进的米氏方程 | 第24-25页 |
1.3.2 用水解度描述宏观水解过程 | 第25-27页 |
1.3.3 动力学研究中存在的问题 | 第27页 |
1.4 复杂反应体系动力学研究方法―集总简介 | 第27-35页 |
1.4.1 集总方法的发展历史 | 第28-30页 |
1.4.2 集总模型的研究方法 | 第30-35页 |
1.4.2.1 明确反应机理 | 第30-31页 |
1.4.2.2 合理集总 | 第31-32页 |
1.4.2.3 构建反应网络 | 第32-33页 |
1.4.2.4 集总模型的数学表达 | 第33-34页 |
1.4.2.5 模型参数估算 | 第34-35页 |
1.4.2.6 反应活化能计算 | 第35页 |
1.4.2.7 模型的验证 | 第35页 |
1.5 集总方法在生物化工领域的应用 | 第35-36页 |
1.6 本课题主要研究内容 | 第36-38页 |
第二章 胰蛋白酶水解牛血清白蛋白工艺研究 | 第38-49页 |
2.1 实验部分 | 第38-40页 |
2.1.1 材料与仪器 | 第38页 |
2.1.2 实验方法 | 第38-40页 |
2.2 反应体系的选择 | 第40-41页 |
2.2.1 底物蛋白的选择 | 第40-41页 |
2.2.2 蛋白酶的选择 | 第41页 |
2.3 胰蛋白酶失活动力学 | 第41-44页 |
2.3.1 胰蛋白酶热失活测定 | 第41-43页 |
2.3.2 胰蛋白酶失活动力学常数及活化能计算 | 第43-44页 |
2.4 BSA-trypsin体系操作条件对蛋白酶促水解的影响 | 第44-48页 |
2.4.1 温度的影响 | 第45页 |
2.4.2 反应时间的影响 | 第45-46页 |
2.4.3 pH的影响 | 第46页 |
2.4.4 底物浓度的影响 | 第46-47页 |
2.4.5 酶用量的影响 | 第47-48页 |
2.5 小结 | 第48-49页 |
第三章 胰蛋白酶水解牛血清白蛋白过程色谱分析及肽链断裂位点推断 | 第49-65页 |
3.1 实验部分 | 第49-50页 |
3.1.1 材料与仪器 | 第49-50页 |
3.1.2 实验方法 | 第50页 |
3.2 分子量标准曲线 | 第50-51页 |
3.3 灭酶方式及色谱检测条件的确定 | 第51-53页 |
3.4 水解产物质量浓度定量分析 | 第53-57页 |
3.4.1 不同分子量范围水解产物的制备 | 第53-54页 |
3.4.2 多肽质量浓度与吸收峰面积的关系 | 第54-57页 |
3.5 胰蛋白酶水解BSA过程色谱分析 | 第57-59页 |
3.5.1 水解产物液相色谱表征 | 第57-59页 |
3.5.2 水解产物分子量分布变化分析 | 第59页 |
3.6 BSA胰蛋白酶促水解断裂位点分析 | 第59-64页 |
3.6.1 理论肽段及其分子量分布的计算 | 第59-62页 |
3.6.2 理论肽段与色谱中肽段的比较 | 第62-63页 |
3.6.3 BSA断裂位点初步推断 | 第63-64页 |
3.7 小结 | 第64-65页 |
第四章 蛋白酶促水解集总动力学通用模型的建立 | 第65-76页 |
4.1 理论基础 | 第65-70页 |
4.1.1 蛋白酶促水解反应机理 | 第65-69页 |
4.1.1.1 蛋白酶促水解过程 | 第65-66页 |
4.1.1.2 蛋白酶专一性对酶促反应的影响 | 第66-67页 |
4.1.1.3 底物蛋白结构对酶促反应的影响 | 第67-68页 |
4.1.1.4 蛋白酶促水解反应中的抑制作用 | 第68-69页 |
4.1.2 本征动力学方程的推导 | 第69-70页 |
4.2 集总动力学模型基本假设 | 第70-72页 |
4.3 集总组分的划分 | 第72-73页 |
4.3.1 集总组分划分的基本原则 | 第72-73页 |
4.3.2 蛋白酶解反应体系集总组分划分的依据 | 第73页 |
4.4 集总反应网络构建 | 第73-75页 |
4.4.1 集总反应网络构建 | 第73-74页 |
4.4.2 反应网络的数学描述 | 第74-75页 |
4.5 小结 | 第75-76页 |
第五章 牛血清白蛋白胰蛋白酶促水解集总动力学研究 | 第76-100页 |
5.1 实验部分 | 第76-78页 |
5.1.1 材料与仪器 | 第76-77页 |
5.1.2 实验方法 | 第77-78页 |
5.2 牛血清白蛋白―胰蛋白酶反应体系四集总模型描述 | 第78-80页 |
5.2.1 集总组分的划分 | 第78-79页 |
5.2.2 四集总反应网络 | 第79页 |
5.2.3 四集总反应网络数学描述 | 第79-80页 |
5.3四 集总模型参数估算 | 第80-95页 |
5.3.1 各集总组分本征动力学常数的测定 | 第80-89页 |
5.3.1.1 米氏常数的测定 | 第80-82页 |
5.3.1.2 产物抑制常数的测定 | 第82-85页 |
5.3.1.3 底物抑制常数的测定 | 第85-88页 |
5.3.1.4 本征动力学常数与温度的关系 | 第88-89页 |
5.3.2 反应网络动力学参数估算 | 第89-92页 |
5.3.2.1 子反应网络的建立 | 第89页 |
5.3.2.2 Marquadt法估算动力学参数的计算流程 | 第89-91页 |
5.3.2.3 子反应网络动力学参数估算 | 第91页 |
5.3.2.4 四集总反应网络动力学参数的估算 | 第91-92页 |
5.3.3 集总模型拟合结果 | 第92-94页 |
5.3.4 集总组分反应活化能计算 | 第94-95页 |
5.4 模型的实验验证 | 第95-98页 |
5.4.1 实验验证条件下动力学参数的计算 | 第95-96页 |
5.4.2 实验验证结果 | 第96-98页 |
5.4.3 模型误差分析 | 第98页 |
5.5 小结 | 第98-100页 |
第六章 牛血清白蛋白胰蛋白酶促水解拟一级反应集总动力学模型 | 第100-109页 |
6.1 实验部分 | 第100页 |
6.2 本征动力学方程的简化 | 第100-101页 |
6.3 反应体系集总动力学模型数学描述 | 第101-102页 |
6.4 反应网络动力学参数估算 | 第102-105页 |
6.4.1 反应网络动力学参数估算 | 第102页 |
6.4.2 模型拟合结果 | 第102-103页 |
6.4.3 集总组分反应活化能计算 | 第103-105页 |
6.5 模型的实验验证 | 第105-106页 |
6.5.1 实验验证条件下动力学参数的计算 | 第105页 |
6.5.2 实验验证结果 | 第105页 |
6.5.3 模型误差分析 | 第105-106页 |
6.6 两种模型的比较 | 第106-108页 |
6.7 小结 | 第108-109页 |
第七章 蛋白酶促水解集总模型综论 | 第109-115页 |
7.1 集总方法在蛋白酶促水解动力学研究上的优越性 | 第109-112页 |
7.1.1 首次在生化工程领域引入集总思想 | 第109-110页 |
7.1.2 集总模型可对反应复杂体系进行定量描述 | 第110-111页 |
7.1.3 集总模型可反映机理 | 第111页 |
7.1.4 集总模型可适用于工业化生产 | 第111-112页 |
7.2 集总模型中尚待完善之处 | 第112-115页 |
7.2.1 水解产物的分析方法 | 第112页 |
7.2.2 集总的划分标准 | 第112-113页 |
7.2.3 集总模型中未考虑传质的影响 | 第113页 |
7.2.4 本征动力学方程中未考虑反应器形式的影响 | 第113-115页 |
第八章 结论 | 第115-118页 |
参考文献 | 第118-126页 |
攻博期间发表论文及参加科研情况 | 第126-127页 |
致谢 | 第127页 |