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蛋白质酶促水解过程集总动力学研究

前言第1-14页
第一章 文献综述第14-38页
 1.1 蛋白酶促水解研究进展第14-22页
  1.1.1 水解蛋白的来源第14-17页
   1.1.1.1 植物蛋白第14页
   1.1.1.2 动物蛋白第14-17页
  1.1.2 蛋白酶促水解工艺第17-19页
   1.1.2.1 酶促水解反应操作条件开发第17页
   1.1.2.2 反应操作流程的开发第17-18页
   1.1.2.3 蛋白酶固定化技术的应用第18-19页
  1.1.3 蛋白水解产物的开发与应用第19-22页
 1.2 蛋白及多肽高效液相色谱分析进展第22-24页
 1.3 蛋白酶促水解动力学研究现状第24-27页
  1.3.1 改进的米氏方程第24-25页
  1.3.2 用水解度描述宏观水解过程第25-27页
  1.3.3 动力学研究中存在的问题第27页
 1.4 复杂反应体系动力学研究方法―集总简介第27-35页
  1.4.1 集总方法的发展历史第28-30页
  1.4.2 集总模型的研究方法第30-35页
   1.4.2.1 明确反应机理第30-31页
   1.4.2.2 合理集总第31-32页
   1.4.2.3 构建反应网络第32-33页
   1.4.2.4 集总模型的数学表达第33-34页
   1.4.2.5 模型参数估算第34-35页
   1.4.2.6 反应活化能计算第35页
   1.4.2.7 模型的验证第35页
 1.5 集总方法在生物化工领域的应用第35-36页
 1.6 本课题主要研究内容第36-38页
第二章 胰蛋白酶水解牛血清白蛋白工艺研究第38-49页
 2.1 实验部分第38-40页
  2.1.1 材料与仪器第38页
  2.1.2 实验方法第38-40页
 2.2 反应体系的选择第40-41页
  2.2.1 底物蛋白的选择第40-41页
  2.2.2 蛋白酶的选择第41页
 2.3 胰蛋白酶失活动力学第41-44页
  2.3.1 胰蛋白酶热失活测定第41-43页
  2.3.2 胰蛋白酶失活动力学常数及活化能计算第43-44页
 2.4 BSA-trypsin体系操作条件对蛋白酶促水解的影响第44-48页
  2.4.1 温度的影响第45页
  2.4.2 反应时间的影响第45-46页
  2.4.3 pH的影响第46页
  2.4.4 底物浓度的影响第46-47页
  2.4.5 酶用量的影响第47-48页
 2.5 小结第48-49页
第三章 胰蛋白酶水解牛血清白蛋白过程色谱分析及肽链断裂位点推断第49-65页
 3.1 实验部分第49-50页
  3.1.1 材料与仪器第49-50页
  3.1.2 实验方法第50页
 3.2 分子量标准曲线第50-51页
 3.3 灭酶方式及色谱检测条件的确定第51-53页
 3.4 水解产物质量浓度定量分析第53-57页
  3.4.1 不同分子量范围水解产物的制备第53-54页
  3.4.2 多肽质量浓度与吸收峰面积的关系第54-57页
 3.5 胰蛋白酶水解BSA过程色谱分析第57-59页
  3.5.1 水解产物液相色谱表征第57-59页
  3.5.2 水解产物分子量分布变化分析第59页
 3.6 BSA胰蛋白酶促水解断裂位点分析第59-64页
  3.6.1 理论肽段及其分子量分布的计算第59-62页
  3.6.2 理论肽段与色谱中肽段的比较第62-63页
  3.6.3 BSA断裂位点初步推断第63-64页
 3.7 小结第64-65页
第四章 蛋白酶促水解集总动力学通用模型的建立第65-76页
 4.1 理论基础第65-70页
  4.1.1 蛋白酶促水解反应机理第65-69页
   4.1.1.1 蛋白酶促水解过程第65-66页
   4.1.1.2 蛋白酶专一性对酶促反应的影响第66-67页
   4.1.1.3 底物蛋白结构对酶促反应的影响第67-68页
   4.1.1.4 蛋白酶促水解反应中的抑制作用第68-69页
  4.1.2 本征动力学方程的推导第69-70页
 4.2 集总动力学模型基本假设第70-72页
 4.3 集总组分的划分第72-73页
  4.3.1 集总组分划分的基本原则第72-73页
  4.3.2 蛋白酶解反应体系集总组分划分的依据第73页
 4.4 集总反应网络构建第73-75页
  4.4.1 集总反应网络构建第73-74页
  4.4.2 反应网络的数学描述第74-75页
 4.5 小结第75-76页
第五章 牛血清白蛋白胰蛋白酶促水解集总动力学研究第76-100页
 5.1 实验部分第76-78页
  5.1.1 材料与仪器第76-77页
  5.1.2 实验方法第77-78页
 5.2 牛血清白蛋白―胰蛋白酶反应体系四集总模型描述第78-80页
  5.2.1 集总组分的划分第78-79页
  5.2.2 四集总反应网络第79页
  5.2.3 四集总反应网络数学描述第79-80页
 5.3四 集总模型参数估算第80-95页
  5.3.1 各集总组分本征动力学常数的测定第80-89页
   5.3.1.1 米氏常数的测定第80-82页
   5.3.1.2 产物抑制常数的测定第82-85页
   5.3.1.3 底物抑制常数的测定第85-88页
   5.3.1.4 本征动力学常数与温度的关系第88-89页
  5.3.2 反应网络动力学参数估算第89-92页
   5.3.2.1 子反应网络的建立第89页
   5.3.2.2 Marquadt法估算动力学参数的计算流程第89-91页
   5.3.2.3 子反应网络动力学参数估算第91页
   5.3.2.4 四集总反应网络动力学参数的估算第91-92页
  5.3.3 集总模型拟合结果第92-94页
  5.3.4 集总组分反应活化能计算第94-95页
 5.4 模型的实验验证第95-98页
  5.4.1 实验验证条件下动力学参数的计算第95-96页
  5.4.2 实验验证结果第96-98页
  5.4.3 模型误差分析第98页
 5.5 小结第98-100页
第六章 牛血清白蛋白胰蛋白酶促水解拟一级反应集总动力学模型第100-109页
 6.1 实验部分第100页
 6.2 本征动力学方程的简化第100-101页
 6.3 反应体系集总动力学模型数学描述第101-102页
 6.4 反应网络动力学参数估算第102-105页
  6.4.1 反应网络动力学参数估算第102页
  6.4.2 模型拟合结果第102-103页
  6.4.3 集总组分反应活化能计算第103-105页
 6.5 模型的实验验证第105-106页
  6.5.1 实验验证条件下动力学参数的计算第105页
  6.5.2 实验验证结果第105页
  6.5.3 模型误差分析第105-106页
 6.6 两种模型的比较第106-108页
 6.7 小结第108-109页
第七章 蛋白酶促水解集总模型综论第109-115页
 7.1 集总方法在蛋白酶促水解动力学研究上的优越性第109-112页
  7.1.1 首次在生化工程领域引入集总思想第109-110页
  7.1.2 集总模型可对反应复杂体系进行定量描述第110-111页
  7.1.3 集总模型可反映机理第111页
  7.1.4 集总模型可适用于工业化生产第111-112页
 7.2 集总模型中尚待完善之处第112-115页
  7.2.1 水解产物的分析方法第112页
  7.2.2 集总的划分标准第112-113页
  7.2.3 集总模型中未考虑传质的影响第113页
  7.2.4 本征动力学方程中未考虑反应器形式的影响第113-115页
第八章 结论第115-118页
参考文献第118-126页
攻博期间发表论文及参加科研情况第126-127页
致谢第127页

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