| Abstract | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Chapter 1 Literature Review | 第13-36页 |
| ·A comparison of expression patterns of sex-determining genes in different system of sex-determining | 第13-25页 |
| ·Introduction | 第13-15页 |
| ·The pathway of positive regulation | 第15-20页 |
| ·SRY gene | 第15-16页 |
| ·Sox3 gene | 第16-17页 |
| ·Sox9 gene | 第17-18页 |
| ·Regulation of sex determining by SRY, Sox3 and Sox9 genes | 第18-20页 |
| ·The pathway of negative regulation | 第20-25页 |
| ·MIS (Mullerian inhibitory substance) | 第20-21页 |
| ·SF1 (Steroidogenic factor 1) | 第21-22页 |
| ·WT1 (Wilms's tumour 1) | 第22-23页 |
| ·DAX1 (DSS-adrenal hypoplasia critical region of the X-chromosome) | 第23页 |
| ·Summary | 第23-25页 |
| ·Progress of study on the Sox gene family | 第25-34页 |
| ·Introduction | 第25页 |
| ·Classification of Sox genes | 第25-27页 |
| ·Relationship of SRY and Sox3 | 第27-28页 |
| ·Expression of Sox genes | 第28-30页 |
| ·Function of Sox genes | 第30-31页 |
| ·Sox genes in reptiles | 第31-34页 |
| ·Background, objectives and organization of the thesis | 第34-36页 |
| Chapter 2 General Materials | 第36-39页 |
| ·Materials used in chapter 3 and chapter 5 | 第36-37页 |
| ·Animals | 第36页 |
| ·Reagents for DNA extraction | 第36页 |
| ·Restriction enzymes | 第36页 |
| ·Reagents for PCR amplification | 第36页 |
| ·PCR machine | 第36页 |
| ·DNA preparation kit | 第36页 |
| ·Cloning vector | 第36-37页 |
| ·Reagents for ligation | 第37页 |
| ·Host cells | 第37页 |
| ·Materials used in chapter 4 | 第37-39页 |
| ·Eggs | 第37页 |
| ·RNA preparation | 第37页 |
| ·Vector | 第37页 |
| ·SMART cDNA library Construction kit | 第37页 |
| ·Enzymes | 第37-38页 |
| ·PCR machine | 第38页 |
| ·Reagents for cDNA purification | 第38页 |
| ·Reagents for colony hybridization | 第38页 |
| ·Sequencing reagent and sequencer | 第38页 |
| ·DNA size marker | 第38-39页 |
| Chapter 3 SRY-related genes of Trionyx sinensis and Alligator sinensis | 第39-55页 |
| ·Introduction | 第39-40页 |
| ·Materials and methods | 第40-44页 |
| ·Animals | 第40页 |
| ·DNA Extraction | 第40页 |
| ·PCR Amplification | 第40-41页 |
| ·Cloning and Sequencing | 第41页 |
| ·Construction of the Molecular Phylogenetic Tree | 第41-44页 |
| ·Results | 第44-50页 |
| ·Isolation SRY-related Genes | 第44-46页 |
| ·Sequence Comparison of SRY-related Genes | 第46-48页 |
| ·Molecular Phylogenetic Analysis of SRY-related Gene | 第48-50页 |
| ·Discussion | 第50-55页 |
| ·Reasons of experimental results | 第50-51页 |
| ·Molecular phylogenefic analyses of Sox genes | 第51-52页 |
| ·Evolution of the Sox-1, -2, -3 homologues | 第52-55页 |
| Chapter 4 Construction and characterization of a cDNA libraryfrom complex tissues of one-week-old embryos of Trionyx sinensis | 第55-82页 |
| ·Introduction | 第55页 |
| ·Materials and methods | 第55-62页 |
| ·Eggs and embryos | 第55-56页 |
| ·Extraction of total RNA | 第56页 |
| ·Isolation of mRNA | 第56页 |
| ·Vector | 第56页 |
| ·First-strand cDNA synthesis | 第56-57页 |
| ·cDNA amplification by long-distance (LD) PCR | 第57-58页 |
| ·Digestion of proteinase K | 第58页 |
| ·Sfi I digestion | 第58-59页 |
| ·cDNA size fractionation by CHROMA SPIN-400 | 第59页 |
| ·Ligation and transformation | 第59-60页 |
| ·Titering the unamplified library | 第60页 |
| ·Determining the percentage of recombinant clones | 第60-61页 |
| ·Screening of a cDNA library | 第61-62页 |
| ·Colony hybridization | 第61页 |
| ·Specific-primer PCR | 第61-62页 |
| ·DNA sequencing | 第62页 |
| ·Sequence analysis | 第62页 |
| ·Results | 第62-77页 |
| ·Isolation of total RNA | 第62-63页 |
| ·Construction of a cDNA library | 第63-66页 |
| ·Analysis of cDNA inserts | 第66-75页 |
| ·Screening of cDNA library | 第75-77页 |
| ·Discussion | 第77-82页 |
| ·Construction of a cDNA library | 第77-79页 |
| ·Application of a stage-specific cDNA library | 第79-82页 |
| ·Expression of tissue-specific genes | 第80页 |
| ·Expression of stage-specific genes | 第80-81页 |
| ·Exon identification | 第81页 |
| ·Regulatory mechanism of gene expression | 第81-82页 |
| Chapter 5 Cloning of CtSox2 in Trionyx sinensis using RPGW-PCR amplification | 第82-93页 |
| ·Introduction | 第82-83页 |
| ·Materials and Methods | 第83-86页 |
| ·Preparation of genomic DNA | 第83页 |
| ·Digestion of genomic DNA | 第83页 |
| ·Amplification of the specific-primer PCR | 第83-84页 |
| ·RPGW-PCR amplification | 第84-85页 |
| ·The first amplification of single-stranded (ss) DNA | 第84页 |
| ·The second amplification of double strand (ds) DNA | 第84-85页 |
| ·Cloning of PCR products | 第85页 |
| ·DNA sequencing and analysis | 第85-86页 |
| ·Results | 第86-90页 |
| ·Digestion of genomic DNA | 第86页 |
| ·Amplification of the specific-primer PCR | 第86-87页 |
| ·RPGW-PCR amplification | 第87-88页 |
| ·Cloning and sequence analysis of CtSox2 | 第88-90页 |
| ·Discussion | 第90-93页 |
| ·RPGW-PCR amplification | 第90-91页 |
| ·Comparison of Sox2 gene | 第91-93页 |
| References | 第93-103页 |
| Acknowledgements | 第103页 |
