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胡杨液泡膜H~+-ATPase的纯化及其耐盐性机理研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-6页
缩略语第6-10页
前言第10-11页
1 文献综述第11-33页
 1.1 植物细胞中膜H+ATPase第11-14页
 1.2 H+ATPase的结构、组成、性质第14-28页
 1.3 胡杨耐盐机理及V-ATPase的关系第28-33页
2 材料与方法第33-40页
 2.1 胡杨细胞悬浮培养体系的建立第34页
 2.2 胡杨液泡膜微囊的制备第34-35页
 2.3 定磷法测定H+ATPase的水解活性第35-36页
 2.4 胡杨液泡膜上H+ATPase的质子泵活性的测定第36页
 2.5 液泡膜焦磷酸酶质子转运活性的测定第36页
 2.6 蛋白质测定及SDS-PAGE第36-37页
 2.7 免疫杂交第37-38页
 2.8 脂质体的制备第38页
 2.9 增溶实验第38页
 2.10 液泡膜微囊的分步抽提纯化第38-39页
 2.11 蔗糖密度梯度离心法纯化蛋白第39页
 2.12 活性胶(Nativegel)电泳第39-40页
3 结果与分析第40-61页
 3.1 悬浮细胞的培养第40-42页
 3.2 液泡微囊的纯化第42-45页
 3.3 盐胁迫对胡杨V-ATPase的水解活性和质子转运活性的影响第45-53页
 3.4 Western-blotting第53-54页
 3.5 胡杨液泡膜焦磷酸酶质子转运活性第54页
 3.6 盐胁迫下液泡膜ATPase和PPiase活性变化第54-55页
 3.7 OG与TritonX-100的增溶效果第55-56页
 3.8 Q2琼脂糖层析柱的图谱第56-57页
 3.9 蔗糖梯度离心部分纯化的V-ATPase第57-59页
 3.10 活性胶第59-61页
4 讨论第61-67页
 4.1 胡杨悬浮细胞的培养第61页
 4.2 胡杨液泡膜的制备第61-62页
 4.3 Mg2+启动与ATP启动H+ATPase的不同第62-63页
 4.4 Cl-对水解活性、质子泵的激活作用第63页
 4.5 BafilomycinA1对水解活性的影响第63-64页
 4.6 SO32-和抑制剂DCCD,bafilomycinA1的相互作用第64页
 4.7 液泡膜ATPase活性对MgATP依赖的冷失活第64页
 4.8 盐胁迫对V-ATPase蛋白含量的影响第64-65页
 4.9 盐胁迫下液泡膜ATPase和PPiase活性变化第65-66页
 4.10 增溶条件的选择第66-74页
 4.11 不同方法纯化V-ATPase的比较第74-67页
5 结论第67-69页
参考文献第69-74页

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