中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第7-21页 |
1.1 野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)分子遗传学研究进展 | 第7-9页 |
1.1.1 野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)概述 | 第7页 |
1.1.2 Xcc分子遗传学研究进展 | 第7-9页 |
1.2 胞外酶研究进展 | 第9-15页 |
1.2.1 细菌细胞壁结构与胞外酶 | 第9-10页 |
1.2.2 胞外酶合成的调控 | 第10-12页 |
1.2.3 胞外酶的分泌 | 第12-14页 |
1.2.4 植物病原菌胞外酶在致病性中的作用 | 第14-15页 |
1.3 XccTn5gusA5插入突变体库的构建 | 第15-16页 |
1.3.1 转座子诱变在分子遗传研究中的应用 | 第15-16页 |
1.3.2 构建XccTn5gusA5突变体库 | 第16页 |
1.4 TAIL-PCR技术应用于Tn5gusA5在Xcc基因组上的定位 | 第16-20页 |
1.5 本研究工作的目的、内容及意义 | 第20-21页 |
1.5.1 目的与内容 | 第20页 |
1.5.2 意义 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 材料 | 第21-23页 |
2.1.1 本实验所用菌株和质粒 | 第21页 |
2.1.2 培养基及生长条件 | 第21-22页 |
2.1.3 抗菌素及其贮存,使用浓度 | 第22页 |
2.1.4 溶液与缓冲液 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-31页 |
2.2.1 三亲本接合和两亲本接合 | 第23-24页 |
2.2.2 胞外蛋白酶的检测 | 第24-25页 |
2.2.3 PCR反应 | 第25-27页 |
2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
2.2.5 质粒的提取 | 第27-28页 |
2.2.6 限制性内切酶酶切 | 第28页 |
2.2.7 DNA连接 | 第28页 |
2.2.8 感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
2.2.9 转化 | 第29页 |
2.2.10 总DNA的提取 | 第29页 |
2.2.11 植株的致病性试验 | 第29页 |
2.2.12 生长曲线的测定 | 第29-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-48页 |
3.1 Xcc Tn5gusA5突变体库 | 第31页 |
3.2 胞外酶突变体的筛选 | 第31-32页 |
3.3 胞外酶突变体中Tn5gusA5在Xcc8004基因组上插入的定位 | 第32-33页 |
3.4 胞外酶突变体中Tn5gusA5在Xcc8004基因组上的定位的结果 | 第33-34页 |
3.5 xcc_4463的缺失验证 | 第34-41页 |
3.5.1 xcc_4463插入突变体Tn5gusA5的插入位置 | 第34页 |
3.5.2 xcc_4463缺失突变体的构建 | 第34-41页 |
3.6 xcc_4463缺失突变体的胞外酶检测和致病性试验 | 第41-43页 |
3.6.1 xcc_4463缺失突变体的胞外酶检测 | 第42页 |
3.6.2 xcc_4463缺失突变体的致病性试验 | 第42-43页 |
3.7 xcc_4463缺失突变体及插入突变体的生长曲线 | 第43-46页 |
3.8 xcc_4463推测蛋白的同源比较 | 第46-48页 |
第四章 讨论 | 第48-51页 |
4.1 关于Xcc突变体库的构建 | 第48页 |
4.2 胞外酶产生相关的基因 | 第48-49页 |
4.3 xcc_4463与胞外酶的关系 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58页 |