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化疗药物纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙支架骨重建及药物控释系统的研究

中文摘要第1-16页
Abstract第16-23页
中英文缩略词表第23-24页
第一部分 纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的制备及生物相容性检测第24-52页
 前言第24-26页
 实验 一纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的制备第26-34页
  1 材料第26页
  2 试验方法第26-28页
   ·纳米磷酸钙粉体的制备及检测第26-27页
   ·纳米氧化锆粉体制备及检测第27页
   ·纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的制备及检测第27-28页
   ·纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的物理学指标测定第28页
     ·纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的孔隙率测定第28页
     ·纳米氧化锆/磷酸钙生物力学强度检测第28页
  3 结果第28-32页
   ·纳米磷酸钙颗粒的表征第28-29页
   ·纳米氧化锆颗粒的表征第29页
   ·纳米氧化锆/磷酸钙骨支架检测及表征第29-32页
  4 讨论第32-33页
  5 结论第33-34页
 实验二 纳米氧化锆/磷酸钙骨支架生物相容性检测第34-52页
  1 材料与方法第34-41页
   ·细胞毒性试验的材料与方法第34-37页
     ·检测材料第34页
     ·主要仪器和试剂第34-35页
     ·常用试剂配制第35-36页
     ·细胞形态观察法第36页
     ·MTT 法测定材料的细胞相对增值率及细胞毒性第36-37页
   ·急性全身毒性试验的材料和方法第37-38页
     ·检测材料第37页
     ·实验动物第37-38页
     ·实验方法第38页
     ·评价方法第38页
   ·溶血试验的材料和方法第38-39页
     ·检测材料第38-39页
     ·实验动物第39页
     ·实验方法第39页
     ·结果评价方法第39页
   ·免疫与相容性检测的材料和方法第39-40页
     ·检测材料第40页
     ·实验动物第40页
     ·实验方法第40页
   ·成骨细胞MC3T3 细胞与骨支架联合培养实验的材料与方法第40-41页
     ·实验材料第40-41页
     ·实验方法第41页
     ·电镜观察第41页
   ·统计学分析第41页
  2 结果第41-46页
   ·细胞毒性试验的实验结果第41-43页
     ·细胞形态观察第41-42页
     ·MTT 法第42-43页
   ·急性全身毒性试验的实验结果第43页
   ·溶血试验的实验结果第43-44页
   ·免疫与相容性检测的实验结果第44页
   ·MC3T3 细胞与骨支架联合培养电镜观察第44-46页
  3 讨论第46-49页
  4 结论第49-52页
第二部分 MTX-PLGA 纳米囊的制备、理化特性及体外释放第52-69页
 前言第52-53页
 1 实验试剂与仪器第53-54页
   ·实验试剂第53页
   ·实验仪器第53-54页
 2 实验方法及结果第54-57页
   ·MTX-PLGA 纳米囊的制备第54页
   ·MTX-PLGA 纳米囊的形态学及粒径考察第54页
   ·包封率和载药量的测定第54-56页
     ·空白PLGA 波长的测定第54-55页
     ·MTX-PLGA 纳米囊波长的测定第55页
     ·标准曲线的绘制第55-56页
     ·载药量及包封率的测定第56页
   ·回收率实验及精密度实验第56页
   ·MTX-PLGA 纳米囊稳定性初步考察第56页
   ·MTX-PLGA 纳米囊的体外释放第56-57页
     ·高效液相色谱条件第56-57页
     ·标准曲线的绘制第57页
     ·体外释放第57页
 3 实验结果第57-65页
   ·MTX-PLGA 纳米囊的形态学及粒径考察第57-59页
   ·包封率和载药量的测定第59-60页
     ·标准曲线的绘制第59-60页
     ·载药量及包封率的测定第60页
   ·回收率实验及精密度实验第60-61页
   ·MTX-PLGA 纳米囊稳定性初步考察第61-62页
   ·MTX-PLGA 纳米囊的体外释放第62-65页
     ·MTX-PLGA 的 HPLC 图谱分析第62-63页
     ·体外释放的标准曲线的绘制第63-64页
     ·体外释放曲线图第64-65页
 4 讨论第65-67页
 5 结论第67-68页
 参考文献第68-69页
第三部分 化疗药物MTX-PLGA 纳米囊体外抗肿瘤实验第69-84页
 前言第69-70页
 1 实验试剂和器材第70-72页
   ·实验试剂第70页
   ·主要实验器材第70页
   ·常用试剂的配制及保存第70-72页
     ·MEM 培养基第70-71页
     ·胎牛血清第71页
     ·PBS 缓冲溶液第71页
     ·0.25%胰蛋白酶溶液第71页
     ·含二甲基甲酰胺的脱色液第71-72页
 2 实验方法第72-76页
   ·肿瘤细胞的解冻、复苏、扩增、冻存第72-73页
     ·肿瘤细胞的解冻、复苏第72页
     ·骨肉瘤细胞的扩增第72页
     ·骨肉瘤细胞的冻存第72-73页
   ·体外MG-63 肿瘤细胞的特点及肿瘤细胞生长曲线图绘制(MTT 法)第73-74页
   ·肿瘤细胞增值抑制实验(MTT 法)第74页
   ·不同浓度MTX-PLGA 纳米囊对MG-63 肿瘤细胞抑制(MTT 法)第74-75页
   ·MTX-PLGA 纳米囊与MTX 对MG-63 肿瘤抑制(MTT 法)第75-76页
   ·统计学分析第76页
 3 结果第76-80页
   ·观察正常MG-63 肿瘤细胞生长并绘制生长曲线图第76-77页
   ·肿瘤细胞增值抑制实验第77页
   ·不同浓度MTX-PLGA 纳米囊抑制MG-63 骨肉瘤细胞生长作用第77-78页
   ·MTX-PLGA 纳米囊与游离MTX 化疗药物抑制MG-63 肿瘤细胞生长第78-80页
   ·MTX-PLGA 纳米囊与游离MTX 对MG-63 骨肉瘤细胞抑制率的比较第80页
 4 讨论第80-82页
 5 结论第82-83页
 参考文献第83-84页
第四部分 化疗药物纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙骨支架动物体内实验第84-113页
 前言第84-85页
 实验一 化疗药物纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的体内降解与修复骨缺损实验第85-104页
  1 实验材料及仪器第85-86页
   ·实验试剂和材料第85页
   ·试剂配制第85-86页
   ·主要仪器第86页
   ·试验动物及饲养第86页
  2 实验方法第86-90页
   ·MTX-PLGA 纳米囊复合氧化锆/磷酸钙骨支架的制备第86-87页
   ·材料准备第87-88页
   ·MTX-PLGA 纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的体内免疫相容性研究及体内降解实验第88-89页
   ·MTX-PLGA 纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙骨支架修复骨缺损的实验第89-90页
     ·实验步骤第89页
     ·茜素红法(ARS)步骤第89-90页
     ·扫描电镜观察第90页
  3 结果第90-100页
   ·制备的MTX-PLGA 纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙骨支架中药物质量第90-91页
   ·MTX-PLGA 纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的体内免疫相容性研究及体内降解实验的结果第91-93页
   ·MTX-PLGA 纳米囊复合纳米氧化锆/磷酸钙骨支架修复骨缺损的实验结果第93-100页
  4 讨论第100-103页
   ·动物模型的建立及其特点第100-101页
   ·纳米氧化锆/磷酸钙骨支架的降解及成骨机理第101-102页
   ·化疗药物对骨支架诱导成骨细胞生长的影响及对支架生物力学的改变第102-103页
  5 结论第103-104页
 实验二 化疗药物纳米囊复合氧化锆/磷酸钙骨支架体内抗肿瘤实验第104-113页
  1 实验试剂和仪器第104-105页
   ·试剂第104页
   ·仪器第104-105页
   ·实验动物第105页
  2 实验方法第105-106页
   ·裸鼠肿瘤模型的建立第105页
   ·MTX-PLGA 纳米囊复合氧化锆/磷酸钙骨支架的植入第105-106页
   ·观察指标第106页
   ·肿瘤病理检查第106页
   ·统计学方法第106页
  3 结果第106-110页
   ·肿瘤生长情况及成瘤率第106-107页
   ·动物模型的瘤体体积比较第107-108页
   ·各重要器官病理切片第108页
   ·肿瘤病理形态学检查第108-110页
  4 讨论第110-111页
   ·骨肉瘤治疗的研究现状第110页
   ·动物模型的建立第110-111页
   ·复合支架抗肿瘤及骨修复第111页
  5 结论第111-112页
  6 参考文献第112-113页
综述 化疗药物纳米囊复合骨支架重建及药物控释系统的研究第113-119页
附录第119-120页
致谢第120-121页
查新结论第121页

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