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△Np63特异性shRNA对膀胱肿瘤效应的实验研究

中文摘要第1-14页
ABSTRACT第14-19页
前言第19-27页
第一部分:ΔNp63 mRNA 和蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达第27-38页
 1 材料第27-28页
   ·标本来源第27页
   ·主要试剂第27-28页
   ·主要仪器设备第28页
 2 方法第28-33页
   ·免疫组化第28-31页
   ·RT-PCR第31-33页
 3 结果第33-35页
 4 讨论第35-37页
 参考文献第37-38页
第二部分:ΔNp63 物异性shRNA 表达质粒的构建第38-50页
 1 材料第38-41页
   ·细胞株第38页
   ·质粒和菌株第38-39页
   ·主要试剂第39页
   ·试剂配制第39-40页
   ·主要仪器设备第40-41页
 2 方法第41-45页
   ·特异性shRNA 转录模板设计、合成第41-42页
   ·shRNA 表达载体构建、鉴定第42-43页
   ·ΔNp63 特异性shRNA 表达载体在TCCB 细胞株中表达第43-44页
   ·RT-PCR 检测细胞内ΔNp63mRNA 表达第44-45页
   ·数据处理第45页
 3 结果第45-47页
   ·成功构建ΔNp63 特异性shRNA 表达质粒第45页
   ·确定最合适质粒量与最佳转染时间第45-46页
   ·确定最有效的阳性重组质粒第46-47页
 4 讨论第47-49页
 参考文献第49-50页
第三部分:△Np63特异性shRNA在膀胱移行细胞癌中的体外效应研究第50-60页
 1 材料第50-51页
   ·试剂第50页
   ·主要仪器设备同第一、第二部分第50-51页
   ·分组第51页
 2 方法第51-53页
   ·细胞爬片的免疫组化第51页
   ·RT-PCR第51-52页
   ·FCM 检测细胞周期第52页
   ·MTT 检测细胞增殖活性第52页
   ·统计学处理第52-53页
 3 结果第53-55页
   ·ΔNp63-shRNA 抑制ΔNp63 蛋白的表达第53页
   ·ΔNp63-shRNA 抑制cyclin D1 和ckd4 蛋白的表达第53-54页
   ·ΔNp63-shRNA 抑制ΔNp63mRNA 的表达第54页
   ·ΔNp63-shRNA 调控5637 细胞周期第54-55页
   ·ΔNp63-shRNA 抑制5637 细胞增殖活性第55页
 4 讨论第55-60页
第四部分:△Np63特异性shRNA在膀胱移行细胞癌中的体内效应研究第60-67页
 1 材料第60-61页
   ·动物来源第60页
   ·仪器设备及试剂第60-61页
 2 方法第61-62页
   ·人膀胱癌裸鼠动物模型的建立第61页
   ·ΔNp63-shRNA 表达质粒治疗第61页
   ·移植瘤组织病理学观察第61页
   ·移植瘤组织超微结构观察第61页
   ·移植瘤组织RT-PCR 检测第61-62页
   ·免疫组织化学第62页
   ·统计学处理第62页
 3 结果第62-64页
   ·荷瘤裸鼠的一般情况和毒副作用观察第62页
   ·荷瘤裸鼠肿瘤生长受抑制情况第62-63页
   ·肿瘤组织病理学和透射电镜结果第63页
   ·ΔNp63mRNA 的表达第63页
   ·ΔNp63 和cyclin D1 和cdk4 蛋白的表达第63-64页
 4 讨论第64-67页
参考文献第67-68页
全文结论第68-69页
附图第69-83页
文献综述第83-90页
致谢第90-92页
攻读博士学位期间研究成果及发表文章目录第92页

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