摘要 | 第1-4页 |
Summary | 第4-8页 |
缩写词英汉对照表 | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1 IFN 的概述 | 第10-13页 |
·IFN 的发现、定义和分类 | 第10-11页 |
·IFN 的发现和定义 | 第10页 |
·IFN 的分类 | 第10-11页 |
·PoIFN-α和 rPoIFN-α 的概述 | 第11-13页 |
·IFN-α的诱生机制 | 第11-12页 |
·IFN-α的生物学活性 | 第12-13页 |
·rPoIFN-α 的研究进展 | 第13页 |
2 P.pastoris 表达系统及其发酵工程 | 第13-15页 |
·P.pastoris 表达系统简介 | 第13-14页 |
·P.pastoris 的概述 | 第13-14页 |
·P.pastoris 作为表达载体的优点 | 第14页 |
·P.pastoris 表达 rPoIFN-α 的发酵工程 | 第14-15页 |
·影响 Pichia pastoris 生长和表达 rPoIFN-α 的因素 | 第14-15页 |
·P.pastoris 表达 rPoIFN-α 发酵工程的研究现况 | 第15页 |
3 蛋白质纯化简介及 rPoIFN-α 纯化的研究现况 | 第15-17页 |
·蛋白质纯化简介 | 第15-17页 |
·蛋白质纯化的基本原则 | 第15-16页 |
·蛋白质纯化的常用方法 | 第16-17页 |
·rPoIFN-α 纯化的研究现状 | 第17页 |
4 rPoIFN-α 抑制 PRRSV 和 PRV 的研究进展 | 第17-18页 |
·PRRSV 的简介 | 第17页 |
·rPoIFN-α 抑制 PRRSV 的研究进展 | 第17-18页 |
·PRV 的简介 | 第18页 |
·rPoIFN-α 抑制 PRV 的研究进展 | 第18页 |
·rPoIFN-α 抑制其它病毒的研究进展 | 第18页 |
5 研究的目的和意义 | 第18-19页 |
6 研究的内容和方法 | 第19-20页 |
第二章 P.pastoris 高效表达 rPoIFN-α | 第20-26页 |
1 材料和方法 | 第20-23页 |
·材料 | 第20页 |
·菌种、细胞株、病毒 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
·方法 | 第20-23页 |
·发酵的种子液制备 | 第20-21页 |
·P.pastoris 表达 rPoIFN-α | 第21页 |
·发酵液的菌体浓度测定 | 第21页 |
·表达液的 rPoIFN-α 分子量和浓度测定 | 第21页 |
·rPoIFN-α 表达液的活性测定 | 第21-23页 |
2 结果与分析 | 第23-24页 |
·rPoIFN-α 的高效表达 | 第23页 |
·rPoIFN-α 表达液的活性测定 | 第23-24页 |
·VSV 的 TCID50 测定 | 第23页 |
·不同诱导时间 rPoIFN-α 表达液的活性测定 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-26页 |
第三章 rPoIFN-α 的纯化 | 第26-31页 |
1 材料与方法 | 第26-27页 |
·材料 | 第26页 |
·菌种、细胞株、病毒 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·方法 | 第26-27页 |
·rPoIFN-α 的沉淀条件选择 | 第26页 |
·层析缓冲液的选择 | 第26-27页 |
·rPoIFN-α 的脱盐试验 | 第27页 |
·Q Sepharose FF 阴离子交换柱纯化 rPoIFN-α | 第27页 |
·Superdex 200 分子筛层析纯化 rPoIFN-α | 第27页 |
·纯化 rPoIFN-α 浓度和纯度的分析 | 第27页 |
·纯化 rPoIFN-α 的活性测定 | 第27页 |
2 结果与分析 | 第27-29页 |
·rPoIFN-α 沉淀条件选择结果 | 第27-28页 |
·层析缓冲液的选择 | 第28页 |
·rPoIFN-α 的重溶试验结果 | 第28页 |
·rPoIFN-α 盐溶试验结果 | 第28页 |
·rPoIFN-α 的脱盐 | 第28页 |
·Sepharose FF 阴离子交换柱纯化 rPoIFN-α | 第28页 |
·Superdex 200 分子筛层析纯化 rPoIFN-α | 第28页 |
·纯化 rPoIFN-α 的浓度和纯度 | 第28-29页 |
·纯化 rPoIFN-α 的活性 | 第29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
第四章 rPoIFN-α 抗 PRRSV、PRV 的活性测定 | 第31-37页 |
1 材料与方法 | 第31-32页 |
·材料 | 第31页 |
·细胞株、病毒株 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·方法 | 第31-32页 |
·PRRSV 的 TCID50 测定 | 第31页 |
·rPoIFN-α 的抗 PRRSV 活性测定 | 第31-32页 |
·PRV 的 TCID50 测定 | 第32页 |
·rPoIFN-α 的抗 PRV 活性测定 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-35页 |
·PRRSV 的 TCID50 | 第32页 |
·rPoIFN-α 的抗 PRRSV 活性 | 第32-34页 |
·PRV 的 TCID50 | 第34页 |
·rPoIFN-α 的抗 PRV 活性 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-37页 |
结论 | 第37-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-42页 |
附录 | 第42-43页 |
作者简介 | 第43-44页 |
导师简介 | 第44-45页 |