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不同工艺铁观音香气形成的生化及分子生物学机制研究

摘要第1-14页
Abstract第14-18页
第一章 前言第18-25页
 1 乌龙茶香气分类、形成途径及测定方法第18-19页
   ·茶叶香气分类、香型特点第18-19页
   ·乌龙茶香气特征及形成途径第19页
   ·乌龙茶香气测定方法第19页
 2 铁观音香气研究进展第19-21页
   ·铁观音加工工艺研究进展第19-20页
     ·清香型铁观音加工工艺第19-20页
     ·传统铁观音加工工艺第20页
   ·不同工艺铁观音的香气成分比较分析第20页
   ·铁观音与其他乌龙茶(成品茶)香气成分比较分析第20-21页
 3 乌龙茶香气形成关键酶——糖苷酶类研究进展第21-23页
   ·茶叶中糖苷酶类的概述第21页
   ·茶叶中糖苷酶类作用机理第21-22页
   ·乌龙茶中β-glucosidase (β-葡萄糖苷酶)的研究进展第22页
   ·乌龙茶香气形成相关的其他酶第22-23页
 4 茶叶香气相关基因研究进展第23-24页
 5 本研究的目的意义和研究内容第24-25页
   ·研究的目的意义第24页
   ·主要研究内容第24-25页
第二章 不同工艺铁观音香气变化及不同风格铁观音香气差异研究第25-51页
 1 材料与方法第25-29页
   ·供试材料第25页
   ·试验设计第25-27页
   ·取样方法第27-28页
   ·检测内容与方法第28-29页
     ·香气测定方法第28页
     ·乌龙茶感官审评方法第28-29页
 2 结果分析第29-47页
   ·不同工艺铁观音在制品香气变化研究第29-41页
     ·低温轻发酵做青工艺铁观音在制品香气变化第29-34页
     ·传统自然做青工艺铁观音在制品香气变化第34-38页
     ·不同工艺铁观音在制品香气成分差异分析第38-41页
   ·不同季节、不同工艺铁观音成品茶香气差异分析第41-47页
     ·不同季节、不同工艺铁观音成品茶香气组分差异分析第43页
     ·不同季节、不同工艺铁观音成品茶香气成分差异分析第43-46页
     ·不同季节、不同品质风格铁观音感官审评结果第46-47页
 3 讨论第47-51页
   ·铁观音香气形成与加工工艺的关系第47-48页
     ·铁观音香气形成与晒青的关系第47页
     ·铁观音香气形成与摇青的关系第47-48页
     ·铁观音香气形成与摊青的关系第48页
   ·不同风格铁观音成品茶香气组分、成分含量差异与感官审评的关系第48-51页
     ·不同风格铁观音成品茶香气组分、成分含量差异第48-49页
     ·不同风格铁观音成品茶香气组分、成分含量差异与感官审评的关系第49-50页
     ·铁观音成品茶香气成分与花果类香气成分的关系第50-51页
第三章 不同工艺铁观音β-glucosidase 酶活性变化研究第51-65页
 1 材料与方法第51-54页
   ·材料处理第51页
   ·β-glucosidase 酶活性测定方法第51-54页
     ·主要仪器设备及试剂第51-52页
     ·测定方法第52页
     ·对硝基苯酚标准曲线制作第52-53页
     ·计算公式第53页
     ·数据统计与分析第53-54页
 2 结果与分析第54-62页
   ·低温轻发酵做青工艺铁观音在制品不同叶位β-glucosidase 酶活性变化第54-56页
     ·春季低温轻发酵做青工艺铁观音在制品不同叶位β-glucosidase 酶活性变化第54-55页
     ·秋季低温轻发酵做青工艺铁观音在制品不同叶位β-glucosidase 酶活性变化第55-56页
   ·传统自然做青工艺铁观音在制品不同叶位β-glucosidase 酶活性变化第56-58页
     ·春季传统自然做青工艺铁观音在制品不同叶位β-glucosidase 酶活性变化第56-57页
     ·秋季传统自然做青工艺铁观音在制品不同叶位β-glucosidase 酶活性变化第57-58页
   ·不同季节、不同工艺铁观音在制品β-glucosidase 酶活性差异分析第58-59页
   ·不同工艺铁观音β-glucosidase 酶活性变化与香气形成相关性分析第59-62页
     ·铁观音β-glucosidase 酶活性与香气总量相关性分析第59页
     ·铁观音β-glucosidase 酶活性与醇系香气含量、特征醇类香气成分含量相关性分析第59-60页
     ·不同工艺铁观音β-glucosidase 酶活性与香气峰面积值线性相关性第60-62页
 3 讨论第62-65页
   ·不同季节、不同工艺铁观音不同叶位β-glucosidase 酶活性变化差异第62-63页
     ·不同叶位铁观音β-glucosidase 酶活性变化差异第62页
     ·不同季节、不同工艺铁观音β-glucosidase 酶活性变化差异第62-63页
   ·不同工艺铁观音β-glucosidase 酶活性变化与香气形成的关系第63-65页
第四章 铁观音香气形成相关基因β-glucosidase 基因克隆第65-81页
 1 材料与方法第65-69页
   ·供试材料第65页
   ·主要仪器设备第65页
   ·主要试剂第65-66页
   ·试验方法第66-69页
     ·茶叶总 RNA 的提取与分离第66页
     ·总 RNA 质量的检测第66页
     ·茶叶β-glucosidase 基因 cDNA 保守区的克隆第66-67页
     ·茶叶β-glucosidase 基因 cDNA 3’ RAC 克隆第67-68页
     ·茶叶β-glucosidase 基因 cDNA 5’RAC 克隆第68页
     ·全长序列拼接第68页
     ·全长序列生物信息学分析第68-69页
 2 结果分析第69-79页
   ·铁观音总 RNA 的提取与质量检测第69页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 保守区的克隆第69-70页
   ·铁观音 cβ-glucosidase3’RACE 扩增结果第70-72页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 序列拼接第72-74页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 序列分析第74-76页
     ·cβ-glucosidase 核苷酸序列同源性比较第74-76页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 生物信息学分析第76-79页
     ·铁观音 cβ-glucosidase 蛋白的基本理化特性第76页
     ·铁观音 cβ-glucosidase 蛋白的疏水性预测与分析第76-77页
     ·铁观音 cβ-glucosidase 亚细胞定位与预测第77页
     ·铁观音 cβ-glucosidase 蛋白的跨膜信号分析第77-78页
     ·铁观音 cβ-glucosidase 信号肽预测与分析第78-79页
     ·铁观音 cβ-glucosidase 磷酸化位点预测与分析第79页
 3 讨论第79-81页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 克隆及序列分析第79-80页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 生物信息学分析第80-81页
第五章 不同工艺铁观音β-glucosidase 基因的定量表达第81-90页
 1 材料与方法第81-83页
   ·材料处理第81页
   ·试剂与仪器第81页
   ·总 RNA 提取及纯度、完整性鉴定第81页
   ·cDNA 合成第81页
   ·实时荧光定量 PCR第81-83页
     ·实时荧光定量 PCR 引物设计第81-82页
     ·两步法荧光定量 PCR第82页
     ·标准曲线的制定第82页
     ·结果计算第82-83页
 2 结果分析第83-88页
   ·RNA 纯度和完整性第83页
   ·标准曲线的建立第83-84页
   ·目的基因与内参基因的特异性扩增第84-86页
   ·不同工艺铁观音β-glucosidase 基因的表达量差异第86-87页
   ·不同工艺铁观音β-glucosidase 基因定量与β-glucosidase 酶活性表达的相关性分析第87-88页
   ·不同工艺铁观音β-glucosidase 基因定量表达与香气变化的相关性分析第88页
 3 讨论第88-90页
   ·不同工艺铁观音β-glucosidase 基因的表达量差异第88-89页
   ·不同工艺铁观音β-glucosidase 基因定量表达与酶活性、香气变化的相关性第89-90页
第六章 结论第90-94页
 1 本研究的主要结论第90-93页
   ·不同工艺铁观音香气的动态变化第90页
   ·不同季节、不同风格铁观音成品茶香气差异第90-91页
   ·铁观音成品茶香气成分与感官审评的关系第91页
   ·不同叶位、不同季节、不同工艺铁观音β-glucosidase 酶活性变化差异第91-92页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 克隆第92页
   ·铁观音 cβ-glucosidase 生物信息学分析第92页
   ·不同工艺铁观音 cβ-glucosidase 的表达量差异第92页
   ·不同工艺铁观音香气变化、β-glucosidase 酶活性、基因定量表达的相关性第92-93页
 2 本研究的主要创新点第93-94页
附表 1 2011 年春季铁观音在制品香气质谱图各成分峰面积分析结果第94-97页
附表 2 2010 年秋季、2011 年春季铁观音成品茶香气质谱图各成分峰面积分析结果第97-100页
附表 3 2010 年秋季、2011 年春季铁观音在制品 β-glucosidase 酶活性与相关数据分析结果第100-104页
参考文献第104-111页
在学期间发表的主要论文第111-112页
致谢第112页

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