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杨树单宁合成关键酶基因LARs和ANR的功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第1章 文献综述第10-16页
   ·杨树的生物学特征第10页
   ·杨树的病害及黑斑病介绍第10页
   ·杨树转基因工程进展第10-11页
   ·杨树抗病基因工程研究进展第11页
   ·杨树黄酮类化合物的研究概况第11-16页
     ·黄酮类化合物的分类及功能第11-12页
     ·缩合单宁的分类及功能第12页
     ·黄酮类化合物的研究进展第12-14页
     ·黄酮代谢与植物抗病的关系第14-16页
第2章 引言第16-18页
   ·研究内容与目标第16-17页
     ·研究内容第16页
     ·研究目标第16-17页
   ·技术路线第17-18页
第3章 实验材料与方法第18-30页
   ·实验材料第18页
     ·植物材料第18页
     ·菌种和质粒第18页
   ·仪器和设备第18页
   ·实验试剂第18-19页
     ·试剂及试剂盒第18-19页
     ·常用抗生素、激素及培养基的配制第19页
   ·实验方法第19-30页
     ·基因的进化分析第19-20页
     ·氨基酸序列比对第20页
     ·毛白杨不同组织RNA的提取第20页
     ·目的基因的组织特异性分析第20-22页
     ·基因的引物设计第22页
     ·目的基因的PCR扩增第22页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第22-23页
     ·农感菌感受态细胞的制备及转化第23页
     ·毛白杨遗传转化第23-24页
     ·转基因DNA的提取第24-25页
     ·转基因植株的分子检测第25页
     ·转基因毛白杨的RT-PCR和QRT-PCR检测第25-26页
     ·PtrLAR和PtrANR转基因植株中缩合单宁含量和组分的测定第26页
     ·DMACA染色第26页
     ·可溶性缩合单宁中儿茶素和表儿茶素含量的测定第26-27页
     ·花青素含量的测定第27页
     ·转基因杨树抗病分析第27页
     ·毛白杨感病前后缩合单宁含量变化的比较第27页
     ·数字基因表达谱(DGE)和荧光定量PCR分析第27-28页
     ·拟南芥的遗传转化第28-30页
第4章 结果与分析第30-54页
   ·毛果杨LAR和ANR与其它物种同源基因的进化分析第30页
   ·毛果杨LAR和ANR与其它物种LAR、ANR的氨基酸序列比对第30-34页
   ·毛白杨PtrLAR和PtrANR的组织特异性分析第34-35页
   ·缩合单宁在毛白杨不同组织中的含量分析第35-36页
   ·杨树PtrANR和PtrLARs的克隆及载体构建第36-37页
   ·毛白杨的遗传转化及转基因植株的获得第37-39页
     ·毛白杨的遗传转化第37页
     ·转基因植株的检测第37-39页
   ·转基因植株单宁含量的测定第39-42页
     ·DMACA染色检测转基因毛白杨不同组织单宁含量第39-40页
     ·PtrLAR1,PtrLAR3转基因植株不同组织中缩合单宁含量分析第40-41页
     ·PtrANR和PtrANR-As转基因植株缩合单宁含量分析第41-42页
   ·PtrLARs和PtrANR转基因植株的表达量分析第42-44页
   ·PtrLAR1,PtrANR转基因植株儿茶素和表儿茶素含量的测定第44-47页
   ·PtrLAR1,PtrANR转基因植株花青素含量的测定第47页
   ·PtrLAR1转基因拟南芥中儿茶素和表儿茶素含量分析第47-50页
   ·毛白杨叶片接种黑斑病后数字基因表达谱(DGE)分析第50-51页
   ·野生型毛白杨接种黑斑病后单宁含量的变化第51页
   ·PtrLAR3转基因植株的抗病性分析第51-54页
第5章 讨论第54-58页
参考文献第58-62页
附录第62-64页
致谢第64-66页
攻读硕士学位期间发表的论文第66页

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