| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 文献综述（一） 抗菌肽研究进展 | 第11-15页 |
| 1. 抗菌肽的分类 | 第11-12页 |
| 2. 抗菌肽的抗菌机理 | 第12-13页 |
| 3. 抗菌肽的药物开发前景 | 第13-14页 |
| 4. 展望 | 第14-15页 |
| 文献综述（二）抗菌肽SMAP-29 研究进展 | 第15-20页 |
| 1. SMAP-29 的结构 | 第15-16页 |
| 2. SMAP-29 的基因表达及其调控 | 第16页 |
| 3. SMAP-29 的作用机理 | 第16页 |
| 4. SMAP-29 的生物学活性 | 第16-17页 |
| ·抗细菌、真菌活性 | 第16-17页 |
| ·抗螺旋体、衣原体活性 | 第17页 |
| 5. SMAP-29 生物活性与结构之间的关系 | 第17-18页 |
| 6. SMAP-29 的基因工程表达 | 第18-19页 |
| 7. 存在的问题及前景展望 | 第19-20页 |
| ·存在的问题 | 第19页 |
| ·应用前景 | 第19-20页 |
| 文献综述（三）毕赤酵母表达系统研究进展 | 第20-26页 |
| 1. 毕赤酵母表达宿主菌 | 第20-21页 |
| 2. 毕赤酵母表达载体 | 第21-23页 |
| 3. 表达载体与毕赤酵母的转化及整合 | 第23-24页 |
| 4. 外源蛋白在其中的表达 | 第24-25页 |
| 5. 毕赤酵母表达系统与大肠杆菌表达系统的比较 | 第25-26页 |
| 第二章 实验研究 | 第26-44页 |
| 试验一 抗菌肽SMAP-29 基因密码子优化及其毕赤酵母表达载体的构建 | 第26-32页 |
| 1 材料和方法 | 第26-28页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-30页 |
| ·目的基因的克隆 | 第28页 |
| ·表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| ·抗菌肽SMAP-29 基因密码子优化及合成 | 第30页 |
| ·表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 试验二 转化酵母工程菌及重组抗菌肽的诱导表达 | 第32-39页 |
| 1. 材料和方法 | 第32-34页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| 2. 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·重组质粒pPIC3.5K-SMAP-29 的线性化 | 第34-35页 |
| ·重组表达质粒pPIC3.5K-SMAP-29 的转化及其高拷贝转化子的筛选 | 第35-36页 |
| ·重组酵母基因工程菌的PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·重组表达SMAP-29 的Tricine-SDS-PAGE 结果 | 第36-37页 |
| 3. 讨论 | 第37-39页 |
| ·酵母基因组PCR | 第37页 |
| ·外源基因的转化及高拷贝重组子筛选 | 第37-38页 |
| ·小分子多肽电泳 | 第38-39页 |
| 试验三 重组抗菌肽的鉴定及其生物学活性的初步测定 | 第39-44页 |
| 1 材料和方法 | 第39-40页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-42页 |
| ·酵母SMAP-29 mRNA 的分析 | 第40-41页 |
| ·重组表达的SMAP-29 的凝胶过滤色谱分析 | 第41页 |
| ·生物活性的检测 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| ·小分子多肽的纯化 | 第42-43页 |
| ·活性检测 | 第43-44页 |
| 第三章 结论 | 第44页 |
| 创新点 | 第44页 |
| 进一步研究建议 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-55页 |
| 附录一 主要试剂的配制 | 第50-52页 |
| 附录二 感受态细胞制备 | 第52-53页 |
| 附录三 技术路线 | 第53-54页 |
| 附录四 质粒PPIC3.5K物理图谱 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 资助项目 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57-58页 |
| 导师评阅表 | 第58页 |
