流感病毒H1N1型神经氨酸酶基因的克隆与表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-23页 |
| ·流感概述 | 第8-9页 |
| ·流感病毒概述 | 第9-13页 |
| ·流感病毒的分类和命名 | 第9-10页 |
| ·流感病毒的形态和结构 | 第10-11页 |
| ·流感病毒的基因和产物 | 第11页 |
| ·流感病毒的抗原变异 | 第11-12页 |
| ·流感病毒的理化特性 | 第12-13页 |
| ·神经氨酸酶(Neuraminidase,NA) | 第13-15页 |
| ·神经氨酸酶的结构 | 第13-14页 |
| ·神经氨酸酶的功能 | 第14-15页 |
| ·神经氨酸酶在流感病毒跨宿主传播中的作用 | 第15页 |
| ·H1N1亚型流感病毒 | 第15-16页 |
| ·流感疫苗的研究进展 | 第16-20页 |
| ·正在应用的流感疫苗 | 第16-17页 |
| ·研制中的流感疫苗 | 第17-20页 |
| ·针对神经氨酸酶的流感治疗方法 | 第20-22页 |
| ·神经氨酸酶抑制剂药物 | 第20-21页 |
| ·神经氨酸酶蛋白疫苗 | 第21页 |
| ·神经氨酸酶核酸疫苗 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·载体 | 第23-24页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·主要工具酶及试剂 | 第24页 |
| ·PCR引物 | 第24页 |
| ·实验所用试剂和配制 | 第24-26页 |
| ·实验仪器设备 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-38页 |
| ·重组克隆载体PMD-NA1的构建 | 第27-30页 |
| ·表达载体PET21-NA1的构建 | 第30-34页 |
| ·阳性重组菌株的表达与保存 | 第34-37页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-46页 |
| ·重组克隆载体pMD-NA1的构建与鉴定 | 第38-39页 |
| ·目的DNA的获得 | 第38页 |
| ·重组克隆载体阳性菌株的鉴定 | 第38-39页 |
| ·表达载体PET21-NA1的构建与鉴定 | 第39-42页 |
| ·表达载体PET21-NA1的构建 | 第39-40页 |
| ·两种酶切方法的比较 | 第40页 |
| ·阳性重组子的鉴定 | 第40-42页 |
| ·阳性重组子的诱导表达 | 第42-45页 |
| ·培养液不同OD值对表达产物的影响 | 第42-43页 |
| ·诱导剂的浓度对表达产物的影响 | 第43-44页 |
| ·温度对表达产物的影响 | 第44页 |
| ·诱导时间对表达产物的影响 | 第44-45页 |
| ·蛋白质纯化 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| ·关于引物的设计和PCR条件的确定 | 第46页 |
| ·关于两种酶切方法的对比 | 第46-47页 |
| ·关于表达载体和宿主菌的选择 | 第47页 |
| ·关于进一步研究神经氨酸酶蛋白疫苗的讨论 | 第47-48页 |
| ·关于进一步研究神经氨酸酶核酸疫苗的讨论 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 论文发表情况 | 第55-56页 |
