摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第1章 综述 | 第12-37页 |
·海洋无脊椎动物细胞培养 | 第12-18页 |
·海绵 | 第12-13页 |
·腔肠动物 | 第13-14页 |
·甲壳动物 | 第14-15页 |
·软体动物 | 第15-16页 |
·棘皮动物 | 第16-17页 |
·海鞘 | 第17-18页 |
·生殖干细胞 | 第18-28页 |
·哺乳动物精原干细胞生物学特性概述 | 第18-20页 |
·哺乳动物精原干细胞的体外培养 | 第20-25页 |
·哺乳动物精原干细胞的鉴定 | 第25-26页 |
·果蝇生殖干细胞 | 第26-28页 |
·肿瘤坏死因子 | 第28-31页 |
·TNF的分子结构及其受体 | 第29页 |
·TNFα的生物学活性 | 第29-30页 |
·无脊椎动物中TNFα的研究进展 | 第30-31页 |
·昆虫杆状病毒表达系统 | 第31-33页 |
·昆虫杆状病毒表达系统的基本原理 | 第31-32页 |
·昆虫杆状病毒表达系统的优势 | 第32页 |
·Bac to Bac杆状病毒表达系统 | 第32-33页 |
·海鞘 | 第33-35页 |
·海鞘的研究背景 | 第34-35页 |
·海鞘细胞培养的优势和意义 | 第35页 |
·本研究的目的意义 | 第35-37页 |
第2章 海鞘(Ciona savignyi)性腺组织细胞和血细胞的原代培养和应用 | 第37-53页 |
·材料与方法 | 第37-44页 |
·实验材料 | 第37-40页 |
·实验方法 | 第40-44页 |
·结果 | 第44-49页 |
·海鞘性腺组织细胞分离方法比较 | 第44页 |
·不同培养液对海鞘性腺组织细胞和血细胞生长的影响 | 第44-45页 |
·不同温度对海鞘性腺组织细胞和血细胞生长的影响 | 第45-46页 |
·不同pH值对海鞘性腺组织细胞和血细胞生长的影响 | 第46-47页 |
·海鞘性腺组织细胞的原代培养 | 第47页 |
·海鞘血细胞的原代培养 | 第47-48页 |
·传代培养 | 第48页 |
·LPS刺激培养的海鞘血细胞后CsTL基因的表达 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-53页 |
第3章 海鞘(Ciona savignyi)细胞培养中细菌污染的鉴别和控制 | 第53-62页 |
·材料和方法 | 第53-56页 |
·实验材料 | 第53-54页 |
·实验方法 | 第54-56页 |
·结果 | 第56-60页 |
·细菌污染的发现和分离 | 第56-57页 |
·SrDNA扩增鉴定 | 第57页 |
·细菌耐药性定性检测 | 第57-58页 |
·抗生素对细胞培养的影响及抑菌效果 | 第58-60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
第4章 海鞘(Ciona savignyi)生殖干样细胞的识别和培养 | 第62-75页 |
·材料与方法 | 第63-67页 |
·实验材料 | 第63-64页 |
·实验方法 | 第64-67页 |
·结果 | 第67-71页 |
·体内生殖干样细胞的识别 | 第67-69页 |
·生殖干样细胞的体外培养和特点 | 第69页 |
·海鞘胚胎干样细胞的体外分化 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-75页 |
第5章 海鞘(Ciona savignyi)肿瘤坏死因子配体家族成员(CsTL)的克隆、表达及纯化 | 第75-108页 |
·材料与方法 | 第76-95页 |
·实验材料 | 第76-82页 |
·实验方法 | 第82-95页 |
·结果 | 第95-105页 |
·总RNA提取 | 第95页 |
·CsTL基因全长cDNA的克隆及序列特征 | 第95-97页 |
·多序列比对及进化分析 | 第97页 |
·CsTL mRNA的组织分布 | 第97-100页 |
·重组病毒Bacmid一pFastbacCsTL载体的构建 | 第100-102页 |
·重组蛋白表达 | 第102-103页 |
·重组CsTL蛋白的纯化 | 第103-104页 |
·CsTL蛋白的生物学活性分析 | 第104-105页 |
·讨论 | 第105-108页 |
结论 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-122页 |
博士期间完成和已发表的文章 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-124页 |