摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 引言 | 第14-37页 |
1 血栓性疾病概述 | 第14-32页 |
·血栓性疾病危害与类型 | 第14-15页 |
·凝血和抗凝的基本原理 | 第15-21页 |
·凝血系统 | 第15-17页 |
·抗凝系统 | 第17页 |
·纤溶系统 | 第17-21页 |
·-1 纤溶系统的组成 | 第17-20页 |
·-2 纤维蛋白降解过程及其调控 | 第20-21页 |
·血栓性疾病的治疗 | 第21页 |
·治疗血栓性疾病的药物 | 第21-28页 |
·抗凝血药物 | 第22-23页 |
·抗血小板药物 | 第23-24页 |
·溶栓药 | 第24-26页 |
·-1 第一代溶栓药 | 第24-25页 |
·-2 第二代溶栓药 | 第25-26页 |
·-3 第三代溶栓药 | 第26页 |
·现有溶栓药的作用途径 | 第26-27页 |
·抗血栓的中草药 | 第27-28页 |
·临床常用纤溶酶与具有临床应用前景的纤溶酶 | 第28-30页 |
·动物来源纤溶酶 | 第28-29页 |
·微生物来源纤溶酶 | 第29-30页 |
·-1 葡激酶(staphylokinase,SAK) | 第29页 |
·-2 纳豆激酶(nattokinase,NK) | 第29-30页 |
·-3 根霉(Rhizopus chinensis)12# | 第30页 |
·海洋生物来源的心脑血管药物及活性物质 | 第30-32页 |
·海洋生物多糖类及其衍生物 | 第30-31页 |
·海洋生物中蛋白及糖蛋白类 | 第31-32页 |
2 海洋无脊椎动物单环刺螠研究 | 第32-35页 |
·生态习性及环境 | 第32-33页 |
·形态解剖 | 第33-34页 |
·分类与进化 | 第34页 |
·营养 | 第34-35页 |
·生物活性物质 | 第35页 |
·单环刺螠的潜在开发价值与未来展望 | 第35页 |
3 立论依据 | 第35-37页 |
·选题依据与背景情况 | 第35-36页 |
·课题研究的目的与意义 | 第36-37页 |
第二章 单环刺螠纤溶酶UFEI的筛选与分离纯化 | 第37-45页 |
1 前言 | 第37页 |
2 材料与方法 | 第37-41页 |
·材料、试剂与仪器 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-39页 |
·蛋白浓度测定: | 第38页 |
·以酪蛋白为底物Folin-酚试剂法测定酶活力: | 第38-39页 |
·-1 Folin-酚试剂的制备: | 第38页 |
·-2 标准曲线的制备 | 第38-39页 |
·酶的纤溶活性确定: | 第39页 |
·统计学方法: | 第39页 |
·纤溶酶的制备工艺 | 第39-41页 |
·工艺A | 第39-40页 |
·工艺B | 第40-41页 |
3 结果 | 第41-44页 |
·酶粗品的制备 | 第41页 |
·酶的分离纯化 | 第41-42页 |
·酶UFEIa的分离纯化收率 | 第42-43页 |
·酶的纤溶活性确定: | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44页 |
5 小结 | 第44-45页 |
第三章 酶UFEIa的纯度鉴定和分子量测定 | 第45-51页 |
1 前言 | 第45页 |
2 材料和方法 | 第45-47页 |
·试剂与主要仪器 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-47页 |
·纤溶酶组分纯度的测定: | 第45-46页 |
·SDS-PAGE电泳操作步骤: | 第46-47页 |
·分子量测定: | 第47页 |
·统计学方法: | 第47页 |
3 结果 | 第47-49页 |
·单环刺螠纤溶酶的非变性和变性凝胶电泳 | 第47-48页 |
·质谱图谱 | 第48-49页 |
·电泳后酶区带活性的检验 | 第49页 |
4 讨论 | 第49-50页 |
5 小结 | 第50-51页 |
第四章 单环刺螠纤溶酶的酶学性质研究 | 第51-64页 |
1 前言 | 第51页 |
2 材料与方法 | 第51-54页 |
·试剂与主要仪器 | 第51-52页 |
·实验方法 | 第52-54页 |
·温度对酶反应的影响(琼脂糖纤维蛋白平板法) | 第52页 |
·pH对酶反应的影响(琼脂糖纤维蛋白平板法) | 第52页 |
·金属离子对酶反应的影响(酪蛋白为底物Folin-酚试剂法) | 第52-53页 |
·底物浓度对酶反应速度的影响(以酪蛋白为底物Folin-酚试剂法) | 第53页 |
·激酶活力测定 | 第53-54页 |
·-1 平板制作 | 第53页 |
·-2 溶液配制 | 第53页 |
·-3 蛋白水解酶活性测定 | 第53-54页 |
·-4 激酶活性测定 | 第54页 |
·-5 样品效价计算 | 第54页 |
·酶蛋白的糖含量测定(王秀奇等,1999) | 第54页 |
·统计学方法: | 第54页 |
3 结果 | 第54-61页 |
·温度对酶反应的影响 | 第54-55页 |
·pH对酶反应的影响 | 第55-57页 |
·以琼脂糖纤维蛋白平板法测得不同pH条件下酶的稳定性 | 第56页 |
·酶的最适反应pH: | 第56-57页 |
·金属离子对酶反应的影响 | 第57-58页 |
·底物浓度对酶反应速度的影响 | 第58-59页 |
·酶的动力学常数 | 第59页 |
·激酶活力测定结果 | 第59-61页 |
·单环刺螠纤溶酶的糖含量 | 第61页 |
4 讨论 | 第61-62页 |
ⅰ 单环刺螠纤溶酶作为溶栓剂的可能作用机制 | 第61-62页 |
ⅱ 酶学性质的研究 | 第62页 |
5 小结 | 第62-64页 |
第五章 单环刺螠纤溶酶的体外抗凝和溶栓活性研究 | 第64-71页 |
1 前言 | 第64页 |
2 材料与方法 | 第64-66页 |
·材料与主要仪器 | 第64-65页 |
·实验方法 | 第65-66页 |
·蚓激酶的提取: | 第65页 |
·单环刺螠纤溶酶抗凝活性检测 | 第65页 |
·UFEIa和EFE体外溶栓比较研究 | 第65页 |
·统计学方法: | 第65-66页 |
3 结果 | 第66-69页 |
·酶的抗凝效果 | 第66页 |
·酶对血红细胞形态和释放量的影响 | 第66-68页 |
·两种酶不同浓度下水解血栓速度的比较 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-70页 |
5 小结 | 第70-71页 |
总结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
致谢 | 第79页 |