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单环刺螠纤溶酶UFEⅠ的分离纯化和性质研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-37页
 1 血栓性疾病概述第14-32页
   ·血栓性疾病危害与类型第14-15页
   ·凝血和抗凝的基本原理第15-21页
     ·凝血系统第15-17页
     ·抗凝系统第17页
     ·纤溶系统第17-21页
     ·-1 纤溶系统的组成第17-20页
     ·-2 纤维蛋白降解过程及其调控第20-21页
   ·血栓性疾病的治疗第21页
   ·治疗血栓性疾病的药物第21-28页
     ·抗凝血药物第22-23页
     ·抗血小板药物第23-24页
     ·溶栓药第24-26页
     ·-1 第一代溶栓药第24-25页
     ·-2 第二代溶栓药第25-26页
     ·-3 第三代溶栓药第26页
     ·现有溶栓药的作用途径第26-27页
     ·抗血栓的中草药第27-28页
   ·临床常用纤溶酶与具有临床应用前景的纤溶酶第28-30页
     ·动物来源纤溶酶第28-29页
     ·微生物来源纤溶酶第29-30页
     ·-1 葡激酶(staphylokinase,SAK)第29页
     ·-2 纳豆激酶(nattokinase,NK)第29-30页
     ·-3 根霉(Rhizopus chinensis)12#第30页
   ·海洋生物来源的心脑血管药物及活性物质第30-32页
     ·海洋生物多糖类及其衍生物第30-31页
     ·海洋生物中蛋白及糖蛋白类第31-32页
 2 海洋无脊椎动物单环刺螠研究第32-35页
   ·生态习性及环境第32-33页
   ·形态解剖第33-34页
   ·分类与进化第34页
   ·营养第34-35页
   ·生物活性物质第35页
   ·单环刺螠的潜在开发价值与未来展望第35页
 3 立论依据第35-37页
   ·选题依据与背景情况第35-36页
   ·课题研究的目的与意义第36-37页
第二章 单环刺螠纤溶酶UFEI的筛选与分离纯化第37-45页
 1 前言第37页
 2 材料与方法第37-41页
   ·材料、试剂与仪器第37-38页
   ·实验方法第38-39页
     ·蛋白浓度测定:第38页
     ·以酪蛋白为底物Folin-酚试剂法测定酶活力:第38-39页
     ·-1 Folin-酚试剂的制备:第38页
     ·-2 标准曲线的制备第38-39页
     ·酶的纤溶活性确定:第39页
     ·统计学方法:第39页
   ·纤溶酶的制备工艺第39-41页
     ·工艺A第39-40页
     ·工艺B第40-41页
 3 结果第41-44页
   ·酶粗品的制备第41页
   ·酶的分离纯化第41-42页
   ·酶UFEIa的分离纯化收率第42-43页
   ·酶的纤溶活性确定:第43-44页
 4 讨论第44页
 5 小结第44-45页
第三章 酶UFEIa的纯度鉴定和分子量测定第45-51页
 1 前言第45页
 2 材料和方法第45-47页
   ·试剂与主要仪器第45页
   ·实验方法第45-47页
     ·纤溶酶组分纯度的测定:第45-46页
     ·SDS-PAGE电泳操作步骤:第46-47页
     ·分子量测定:第47页
     ·统计学方法:第47页
 3 结果第47-49页
   ·单环刺螠纤溶酶的非变性和变性凝胶电泳第47-48页
   ·质谱图谱第48-49页
   ·电泳后酶区带活性的检验第49页
 4 讨论第49-50页
 5 小结第50-51页
第四章 单环刺螠纤溶酶的酶学性质研究第51-64页
 1 前言第51页
 2 材料与方法第51-54页
   ·试剂与主要仪器第51-52页
   ·实验方法第52-54页
     ·温度对酶反应的影响(琼脂糖纤维蛋白平板法)第52页
     ·pH对酶反应的影响(琼脂糖纤维蛋白平板法)第52页
     ·金属离子对酶反应的影响(酪蛋白为底物Folin-酚试剂法)第52-53页
     ·底物浓度对酶反应速度的影响(以酪蛋白为底物Folin-酚试剂法)第53页
     ·激酶活力测定第53-54页
     ·-1 平板制作第53页
     ·-2 溶液配制第53页
     ·-3 蛋白水解酶活性测定第53-54页
     ·-4 激酶活性测定第54页
     ·-5 样品效价计算第54页
     ·酶蛋白的糖含量测定(王秀奇等,1999)第54页
     ·统计学方法:第54页
 3 结果第54-61页
   ·温度对酶反应的影响第54-55页
   ·pH对酶反应的影响第55-57页
     ·以琼脂糖纤维蛋白平板法测得不同pH条件下酶的稳定性第56页
     ·酶的最适反应pH:第56-57页
   ·金属离子对酶反应的影响第57-58页
   ·底物浓度对酶反应速度的影响第58-59页
   ·酶的动力学常数第59页
   ·激酶活力测定结果第59-61页
   ·单环刺螠纤溶酶的糖含量第61页
 4 讨论第61-62页
  ⅰ 单环刺螠纤溶酶作为溶栓剂的可能作用机制第61-62页
  ⅱ 酶学性质的研究第62页
 5 小结第62-64页
第五章 单环刺螠纤溶酶的体外抗凝和溶栓活性研究第64-71页
 1 前言第64页
 2 材料与方法第64-66页
   ·材料与主要仪器第64-65页
   ·实验方法第65-66页
     ·蚓激酶的提取:第65页
     ·单环刺螠纤溶酶抗凝活性检测第65页
     ·UFEIa和EFE体外溶栓比较研究第65页
     ·统计学方法:第65-66页
 3 结果第66-69页
   ·酶的抗凝效果第66页
   ·酶对血红细胞形态和释放量的影响第66-68页
   ·两种酶不同浓度下水解血栓速度的比较第68-69页
 4 讨论第69-70页
 5 小结第70-71页
总结第71-72页
参考文献第72-79页
致谢第79页

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