| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·水稻基因工程研究进展 | 第11页 |
| ·转基因水稻的受体系统 | 第11-12页 |
| ·以原生质体为受体的转化系 | 第11-12页 |
| ·愈伤组织和悬浮细胞:水稻幼胚、成熟胚、幼穗来源的胚性愈伤组织 | 第12页 |
| ·分生组织 | 第12页 |
| ·以生殖细胞:幼嫩子房、花粉、卵细胞、幼胚 | 第12页 |
| ·转基因水稻的转化方法 | 第12-15页 |
| ·PEG介导法(PEG-mediated transformation) | 第12-13页 |
| ·脂质体介导法(liposome-mediated transformation) | 第13页 |
| ·电击法(electroporation-mediated transformation) | 第13页 |
| ·基因枪法(gene gun-mediated transformation) | 第13-14页 |
| ·农杆菌介导(Agrobacterium-mediation)的基因转化法 | 第14-15页 |
| ·激光微束介导基因转化(microlazer-mediated transformation) | 第15页 |
| ·离子束介导法 | 第15页 |
| ·花粉管通道法 | 第15页 |
| ·转基因水稻的分子生物学检测方法 | 第15-16页 |
| ·抗除草剂转基因水稻的应用 | 第16-17页 |
| ·HPPD及其抑制剂的作用机理 | 第17-18页 |
| ·HPPD介绍 | 第17-18页 |
| ·HPPD抑制剂的作用原理 | 第18页 |
| ·HPPD为靶酶的除草剂 | 第18-19页 |
| ·国内外对抗HPPD抑制剂农作物的研究进展 | 第19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-33页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·载体质粒 | 第21-22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·实验药品 | 第22-23页 |
| ·常用仪器设备 | 第23-24页 |
| ·实验流程 | 第24-25页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第25-29页 |
| ·Hyg、Ubi基因片段的扩增 | 第25页 |
| ·Cjhppd基因片段的扩增 | 第25-26页 |
| ·Cjhppd基因片段的电泳分离回收 | 第26页 |
| ·质粒的小量提取 | 第26页 |
| ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的转化 | 第27页 |
| ·构建克隆载体的标准连接体系 | 第27-28页 |
| ·质粒酶切鉴定体系 | 第28页 |
| ·Cjhppd基因片段与pCambia-1301-UbiN载体的连接 | 第28-29页 |
| ·水稻受体系统的建立及转化 | 第29-30页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导 | 第29页 |
| ·农杆菌悬液的制备 | 第29页 |
| ·水稻愈伤组织与农杆菌的共培养 | 第29-30页 |
| ·抗性愈伤组织的分化 | 第30页 |
| ·生根培养及移栽 | 第30页 |
| ·水稻叶片的潮霉素、除草剂胁迫处理 | 第30页 |
| ·转基因水稻的分子生物学检测 | 第30-31页 |
| ·水稻基因组DNA的微量提取 | 第30-31页 |
| ·Cjhppd基因片段的扩增 | 第31页 |
| ·Hyg、Ubi基因片段的扩增 | 第31页 |
| ·水稻总RNA的提取及定量 | 第31页 |
| ·转基因水稻叶片光合色素含量的测定 | 第31-33页 |
| 第3章 结果与分析 | 第33-47页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第33-38页 |
| ·pCambia-1301-UbiN质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| ·Cjhppd基因的PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| ·pGEM-T Easy/Cjhppd克隆载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·P1301-UbiN/Cjhppd植物表达载体的构建及鉴定 | 第36-38页 |
| ·植物表达载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第38页 |
| ·水稻转化系统的建立及转化 | 第38-41页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导与继代 | 第38-39页 |
| ·转化及抗性愈伤组织的筛选 | 第39-41页 |
| ·分化生根及移栽 | 第41页 |
| ·转基因植株的获得 | 第41页 |
| ·转基因水稻的分子生物学检测 | 第41-44页 |
| ·水稻基因组DNA提取及PCR检测 | 第41-43页 |
| ·水稻总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·转基因水稻的抗性分析 | 第44-47页 |
| ·潮霉素胁迫对水稻幼嫩叶片色素含量的影响 | 第44页 |
| ·除草剂DTP胁迫对水稻幼嫩叶片色素含量的影响 | 第44-47页 |
| 第4章 讨论 | 第47-49页 |
| ·农杆菌转化水稻的探讨 | 第47页 |
| ·不同启动子对外源基因表达的影响 | 第47-48页 |
| ·正确使用选择标记基因 | 第48页 |
| ·DTP胁迫对转基因水稻的影响 | 第48-49页 |
| 第5章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
