| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-32页 |
| ·引言 | 第10-12页 |
| ·病原菌生物学特性 | 第12-15页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌分类地位与危害症状 | 第12-13页 |
| ·小麦矮腥黑穗病的发病及传播 | 第13-14页 |
| ·冬孢子的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·TCK 检验检疫技术研究现状 | 第15-19页 |
| ·病株症状识别 | 第15页 |
| ·冬孢子形态鉴定 | 第15-16页 |
| ·冬孢子自发荧光检测 | 第16-17页 |
| ·冬孢子萌发实验 | 第17页 |
| ·血清学鉴定 | 第17页 |
| ·生化鉴定 | 第17-18页 |
| ·分子生物学检测 | 第18-19页 |
| ·超分支滚环扩增技术 | 第19-30页 |
| ·锁式探针的结构 | 第20页 |
| ·锁式探针的扩增及检测 | 第20-22页 |
| ·滚环扩增的种类及特征 | 第22-24页 |
| ·滚环扩增技术的特点 | 第24-25页 |
| ·滚环扩增的应用 | 第25-28页 |
| ·实时荧光RCA 技术 | 第28-30页 |
| ·研究目标与意义 | 第30页 |
| ·研究目的 | 第30页 |
| ·研究意义 | 第30页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第30-31页 |
| ·研究内容 | 第30页 |
| ·技术路线 | 第30-31页 |
| ·本研究的创新点 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-42页 |
| ·供试菌株 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第32-34页 |
| ·小麦矮腥黑穗病菌基因组DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·TCK 冬孢子的萌发及菌丝体的培养 | 第34页 |
| ·CTAB 法提取TCK 冬孢子基因组DNA | 第34-35页 |
| ·CTAB 法提取TCK 菌丝体基因组DNA | 第35页 |
| ·锁式探针及扩增引物的设计 | 第35-36页 |
| ·滚环扩增检测体系的建立及优化 | 第36-37页 |
| ·连接及Exonuclease I 酶切消化 | 第36页 |
| ·超分支滚环扩增(HRCA) | 第36页 |
| ·体系优化 | 第36-37页 |
| ·TCK 滚环扩增检测体系性能测试及实际样品的检测 | 第37页 |
| ·滚环扩增检测的特异性 | 第37页 |
| ·滚环扩增检测的灵敏度 | 第37页 |
| ·滚环扩增检测体系的初步应用 | 第37页 |
| ·连接酶依赖性PCR | 第37-38页 |
| ·常规PCR | 第37-38页 |
| ·Real time L-PCR | 第38页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌大片段基因组文库的构建 | 第38-42页 |
| ·氯化卞法提取大片段TCK 基因组DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·CTAB 法提取大片段TCK 基因组DNA 的提取 | 第39页 |
| ·TCK 基因组文库的构建 | 第39-40页 |
| ·TCK 基因组文库质量鉴定 | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-53页 |
| ·TCK 基因组DNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·TCK 冬孢子DNA 提取 | 第42页 |
| ·TCK 菌丝DNA 提取 | 第42-43页 |
| ·HRCA 检测体系的优化 | 第43-45页 |
| ·HRCA 检测体系性能的检测及实际样品检测 | 第45-49页 |
| ·锁式探针特异性检测 | 第45-46页 |
| ·HRCA 体系灵敏度检测 | 第46-49页 |
| ·实际样品检测 | 第49页 |
| ·连接酶依赖性PCR | 第49-50页 |
| ·TCK 基因组大片段DNA 文库的构建 | 第50-53页 |
| ·TCK 基因组DNA 的提取 | 第50-51页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌基因组文库的构建及其质量评估 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| ·锁式探针的设计策略 | 第53-54页 |
| ·HRCA 检测体系的优化策略 | 第54-55页 |
| ·实际样品检测 | 第55页 |
| ·Real-time L-PCR | 第55-56页 |
| ·基因组文库的构建策略 | 第56-57页 |
| 5 主要结论与后续工作展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| 攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |