三种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立及甘薯脉花叶病毒（SPVMV）的分子鉴定
| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-20页 |
| ·甘薯 | 第8-9页 |
| ·甘薯的生产现状 | 第8页 |
| ·甘薯的用途 | 第8-9页 |
| ·工业原料 | 第8页 |
| ·营养价值较高 | 第8-9页 |
| ·饲料原料 | 第9页 |
| ·甘薯病毒病发生情况 | 第9-10页 |
| ·甘薯脉花叶病毒研究进展 | 第10-11页 |
| ·甘薯病毒病检测技术研究进展 | 第11-20页 |
| ·症状诊断法 | 第11页 |
| ·生物学鉴定方法 | 第11-12页 |
| ·病毒形态鉴定法 | 第12-13页 |
| ·血清学方法 | 第13-16页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第13-15页 |
| ·免疫电镜法 | 第15页 |
| ·其他血清学方法 | 第15-16页 |
| ·分子生物学方法 | 第16-20页 |
| ·核酸杂交技术 | 第16-17页 |
| ·反转录PCR技术 | 第17页 |
| ·多重RT-PCR技术 | 第17-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 材料和方法 | 第21-29页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·供试毒源 | 第21页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第21页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·酶和试剂(盒) | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-29页 |
| ·基本的分子生物学方法 | 第22-24页 |
| ·感病叶片总RNA的提取 | 第22页 |
| ·PCR扩增片段的回收纯化 | 第22-23页 |
| ·PCR产物与pMDl9-T Vector连接 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第23页 |
| ·质粒提取 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24页 |
| ·PCR产物序列测定 | 第24页 |
| ·三种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立 | 第24-26页 |
| ·RT-PCR | 第25页 |
| ·病毒样品的单一PCR检测 | 第25页 |
| ·多重PCR反应条件的初步筛选 | 第25-26页 |
| ·SPVMV基因组3′端序列的克隆和序列测定 | 第26-27页 |
| ·SPVMVCP基因原核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·外源基因的诱导表达 | 第28-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-40页 |
| ·三种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立 | 第29-30页 |
| ·多重PCR反应条件的初步筛选 | 第29页 |
| ·多重PCR和单一PCR扩增效果的比较 | 第29-30页 |
| ·多重PCR产物的序列测定 | 第30页 |
| ·SPVMV基因组3′端序列的克隆和序列测定 | 第30-32页 |
| ·SPVMV基因组3′端序列的比较与分析 | 第32-39页 |
| ·SPVMV CP基因在大肠杆菌中的表达 | 第39-40页 |
| ·SPVMV CP基因原核表达载体的构建 | 第39页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第39-40页 |
| 5 结论与讨论 | 第40-42页 |
| ·结论 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| Abstract | 第50-51页 |
